吕律
- 作品数：11 被引量：81H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划甘肃省高层次人才科技创新创业扶持行动项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 中草药红茶菌的制备及其体外抗口蹄疫病毒活性被引量：6
- 2014年
- [目的]研究中草药红茶菌的细胞、乳鼠毒性以及对口蹄疫病毒在体外的抗病毒活性。[方法]将中草药红茶菌过滤,用细胞培养液稀释,分别接种在BHK21细胞上观察细胞生长情况,评价其对细胞的毒性作用。将中草药红茶菌用灭菌水稀释,分别接种3日龄乳鼠,观察乳鼠生长、健康状态和接种部位变化情况,评价其对乳鼠的毒性作用。用稀释的中草药红茶菌与浓度为1 000 LD50的口蹄疫病毒等量混合,37℃条件下作用30 min,接种3日龄乳鼠,观察乳鼠发病死亡情况,估算中草药红茶菌体外可杀灭口蹄疫病毒的最大使用浓度。用稀释的中草药红茶菌与口蹄疫病毒混合,接种BHK21细胞,观察致细胞病变效应,记录不同稀释度的中草药红茶菌对口蹄疫病毒的杀灭效果。[结果]BHK21细胞和乳鼠试验表明,中草药红茶菌在1∶4稀释后,对BHK21细胞无毒性反应,并可有效抑制1 000TCID50口蹄疫病毒在BHK21细胞生长繁殖;1∶2稀释的红茶菌微生态制剂对3日龄乳鼠无毒性反应,并可有效杀灭1 000 LD50口蹄疫病毒。[结论]中草药红茶菌是一种安全性好且对口蹄疫病毒有较好杀灭作用的口蹄疫预防中草药微生态制剂。
- 符乃方吴俊才符启俊吕律何继军李开绵叶剑秋蒋盛军蒋小强邱红辉高李泽何萍谢峥嵘陈吉雄
- 关键词：口蹄疫病毒活性体外
- Asia1型口蹄疫病毒3B蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
- 2015年
- 为了获得Asia1型口蹄疫病毒非结构蛋白3B的单克隆抗体,以含Asia1型FMDV/JS/05毒株3B基因的pCAGGS-3B质粒为模板,扩增3B蛋白基因,并克隆至pET-30a（＋）载体,进行原核表达及纯化。分别以Asia1型口蹄疫病毒、纯化的3B蛋白为抗原,免疫4~6周龄的雌性BALB/c小鼠,经过4次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按5∶1~10∶1进行细胞融合,用本实验室建立的间接ELISA对融合后的细胞进行筛选,并进行4次有限稀释筛选出的阳性细胞扩大培养后,注射小鼠腹腔,制备腹水。对制备的腹水进行类别鉴定、反应原性和效价鉴定。结果表明,获得1株能稳定分泌抗Asia1型口蹄疫病毒3B蛋白的细胞株,其抗体类别为IgM,腹水效价为1∶12 800,通过Western-blot和间接免疫荧光试验,确定其能识别口蹄疫病毒3B蛋白。
- 刘华南杨帆杨华吕律曹伟军石正旺岳城郑海学才学鹏
- 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体
- 口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型定型诊断胶体金免疫层析方法的建立被引量：29
- 2008年
- 【目的】建立一种从田间样品中快速、灵敏、简便检测O、A、AsiaI型口蹄疫病毒抗原的胶体金免疫层析方法(GICA)。【方法】采用柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记纯化的标准株O、A、AsiaI型口蹄疫抗体。将纯化的口蹄疫流行株O/China99,A/AF72and AsiaⅠ/China05抗体和羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带。经试验条件优化,组装形成胶体金定型诊断试剂盒。【结果】本试验研制的口蹄疫定型试剂盒具有良好的灵敏度,可检测到7.8×104LD50(1﹕128倍稀释乳鼠毒)的病毒量。同时对阳性及阴性样品进行3次重复检测结果完全相同,说明其有较好的重复性;特异性试验证实该方法在检测口蹄疫临床症状相似病原,如猪水疱病抗原(SVD)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)等病毒时无交叉反应;试剂盒对206份已知血清型田间及实验室样品的符合率试验,O、A、AsiaⅠ型和阴性样本的符合率分别为92.45%、91.66%、92.75%、100%定型准确率94.58%。试剂盒在4℃下可保存6个月。【结论】本试验研发的口蹄疫病毒胶体金定型诊断试剂盒是一种快速、灵敏、特异的FMD抗原检测方法,对基层现场具有广泛应用价值。
- 蒋韬梁仲陈涓何继军吕律马维民刘在新刘湘涛
- 关键词：胶体金免疫层析法
- 我国O型Mya-98口蹄疫病毒流行情况与毒株分析被引量：15
- 2014年
- 2010年年初，O型口蹄疫Mya-98毒株在我国引起疫情，随后在13个省区相继发生25次疫情。同时，该毒株也在日本、韩国、朝鲜等国家和地区报道流行，各国政府为控制疫情，大量扑杀染疫动物，引起了全球的广泛关注。为追寻我国O型Mya-98毒株的来源、归属地位和国内流行情况，收集我国2010年～2012年年底Mya-98口蹄疫流行毒株，对其进行毒株分离鉴定和VPl基因序列测定，并对其进行比对和分析。结果显示：我国O型口蹄疫Mya-98毒株源于东南亚国家，当前优势流行毒株与东南亚国家流行毒株等毒株同源性95％以上，属同-毒株；国内Mya-98毒株随流行历史不同趋向于形成3个不同的进化分支，不同分支之间毒株差异较大，最大差异率可达15％；我国Mya-98毒株宿主适应范围发生变化，由最初猪、牛、羊均可感染到2010年之后主要感染猪。
- 何继军杨亚民马维民尚佑军吕律郑海学靳野郭建宏刘在新刘湘涛
- 关键词：口蹄疫病毒分子流行病学
- 中草药红茶菌的制备及其体内抗口蹄疫病毒活性被引量：8
- 2014年
- [目的]研究中草药红茶菌在动物体内对口蹄疫病毒复制的抑制作用。[方法]选取健康猪20头,喷雾和口服中草药红茶菌3 d后,进行O型口蹄疫毒株(猪O型O/China/99株鼠毒)攻毒试验;攻毒后,继续对猪群进行喷雾和口服给药,观察中草药红茶菌对攻毒猪的保护作用及体内抗口蹄疫病毒的作用。[结果]攻毒结果显示,低剂量给药猪3/5保护,中剂量给药猪1/5保护,高剂量给药猪0/5保护;在低剂量给药条件下,攻毒保护效果优于中剂量和高剂量;从攻毒后的第1天到第7天,陆续从试验猪全血中检测到口蹄疫病毒,其中中草药红茶菌高浓度预防组猪的口蹄疫病毒的复制水平最高,中剂量组较低,低剂量组复制水平最低。[结论]给药合适剂量的中草药红茶菌对猪体内的口蹄疫病毒具有一定的抑制作用。
- 符乃方吴俊才符启俊吕律何继军李开绵叶剑秋蒋盛军蒋小强邱红辉高李泽何萍谢峥嵘陈吉雄
- 关键词：口蹄疫病毒
- 抗口蹄疫病毒非结构蛋白3D单克隆抗体的制备和鉴定
- 2013年
- 以重组A型口蹄疫病毒(FMDV)为抗原免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并通过间接ELISA、有限稀释法及Western-blotting等试验进行筛选及鉴定。结果显示,获得了1株能够持续稳定分泌抗FMDV 3D蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(命名为5G2);经鉴定染色体数介于102～106条之间,与预期结果相符;单克隆抗体的稳定性检测表明其细胞培养上清抗体效价为1∶1 280,腹水抗体效价为1∶25 600,说明该株单克隆抗体的性质比较稳定;单克隆抗体特异性试验结果显示,获得的腹水单抗与3D蛋白、重组A型FMDV、A型FMDV、Asia1型FMDV及O型FMDV均可发生特异性反应,而与猪水疱病病毒及水疱性口炎病毒不发生反应。该非结构蛋白3D单克隆抗体的成功制备为进一步利用该单抗开发诊断试剂和研究病毒基因功能提供了技术手段。
- 杨华杨帆闫银银曹伟军吕律张荣刘华南杨波杨孝朴郑海学
- 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体
- 外来口蹄疫流行毒株跟踪分析与防控被引量：7
- 2018年
- 2008年以来,外来口蹄疫流行毒株不断侵入,给我国造成巨大危害。分子流行病学研究表明,我国现有的主要流行毒株,如A/Sea-97、O/Mya-98、O/PanAsia和O/Ind-2001等,均系外来毒株。结合全球口蹄疫流行形势和毒株遗传衍化关系推测,这些毒株由东南亚地区传入我国的可能性最大。此外,常年流行于中亚、西亚等国家的O/PanAsia-2、A/Iran-05和Asia1/Sindh-08等毒株,以及在印度等南亚地区流行的A/G VII和Asia1/G VIII等毒株传入我国的风险依旧存在。为及时判定外来口蹄疫威胁,做好诊断、免疫等阻断技术储备,本文就外来口蹄疫毒株流行情况和国家口蹄疫参考实验室有关技术储备工作进行总结,以期为我国外来口蹄疫防控提供参考。
- 何继军靳野马维民杨亚民吕律郑海学杨帆曹伟军郭建宏李彦敏刘在新刘湘涛
- 关键词：分子流行病学
- 口蹄疫病毒O型Mya98谱系猪源毒株和牛源毒株全基因组的比较被引量：2
- 2014年
- 为了查明我国新流行的口蹄疫病毒(FMDV)O型Mya98谱系猪源和牛源毒株的序列差异,采用RT-PCR方法,对FMDV O型Mya98谱系牛源毒株(O/BY/CHA/2010)和猪源毒株(O/GZ/CHA/2010)的基因组全序列进行了扩增和测序,并与O型其他牛源和猪源参考毒株的基因组进行了比较分析。结果显示,O/BY/CHA/2010毒株和O/GZ/CHA/2010毒株都属于SEA拓扑型的Mya98谱系毒株。O/BY/CHA/2010毒株和O/GZ/CHA/2010毒株与来自Mya98谱系的其他毒株的全基因的核苷酸同源性大于98.0%。除了VP4、2A和3BCD区,O/BY/CHA/2010毒株和O/GZ/CHA/2010毒株与Mya98谱系的其他毒株的其他基因区的同源性较低。与非SEA拓扑型毒株(UKG/7B/2007、Akesu/58和PanAsia谱系毒株)相比,在2A、P2和3CD区,具有较高的同源性,表明O/BY/CHA/2010和O/GZ/CHA/2010可能具有这些毒株的生长特性。进一步的序列分析表明,O/GZ/CHA/2010毒株在L蛋白第10位增加了1个亮氨酸,在S片段缺失70个核苷酸。试验结果为进一步分析氨基酸插入和核苷酸缺失对毒株致病性的影响奠定了基础。
- 吕律杨帆何继军靳野郭建宏郑海学刘湘涛
- 关键词：口蹄疫病毒全基因组S片段
- 口蹄疫O/A型嵌合病毒的构建与拯救
- 杨帆郑海学靳野郭建宏何继军杨亚民吕律刘湘涛才学鹏
- 检测AsiaⅠ型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析法的建立及应用被引量：13
- 2007年
- 目的:建立一种快速、简便的检测AsiaⅠ型口蹄疫病毒(FMDV)的胶体金免疫层析法(GICA)。方法:采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,用其标记纯化的AsiaⅠ型口蹄疫抗体后包被在玻璃纤维素膜上,另外将纯化的AsiaI型口蹄疫抗体和纯化的羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带。玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜按顺序组装成胶体金快速诊断试纸条,通过系列实验验证其灵敏度、特异性、重复性及稳定性。结果:研制的AsiaⅠ型口蹄疫快速检测试纸条对AsiaⅠ型口蹄疫病毒的检测灵敏度为0.116mg/L,对阳性样品进行重复性试验3次检测结果完全相同。交叉反应证实该方法与其他血清型口蹄疫抗原和猪水疱病抗原(SVD)无交叉反应。检测田间样品,GICA与反向间接血凝的定型的符合率为96.87%。稳定性实验证实试纸条可保存12个月。结论:建立的GICA是一种快速、灵敏、特异的FMD抗原检测方法,对基层现场具有广泛应用价值。
- 蒋韬梁仲陈涓何继军吕律马维民刘在新刘湘涛
- 关键词：ASIA胶体金免疫层析法
