吉文伟
- 作品数：11 被引量：20H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
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- Ad．mda-7高选择性杀伤不同转移潜能肝癌细胞的研究
- 2007年
- 目的利用携带人MDA-7／IL-24基因的复制缺陷型腺病毒（Ad．mda7）作为载体，感染不同转移潜能的肝癌细胞MHCC97H，MHCC97L，Hep3B和正常的肝细胞L02，观察该基因对肝癌的选择性杀伤作用和增殖抑制作用。方法将携带人MDA-7／IL-24基因的腺病毒Ad．mda-7感染正常肝细胞L02和肝癌细胞MHCC97H，MHCC97L和Hep3B，通过RT-PCR和ELISA方法观察MDA7基因的表达，通过四甲基偶氮哩蓝染色法（MTT）观察该基因对肝癌细胞的生长抑制，Hoechst染色和流式细胞仪观察MDA-7对肝癌细胞的杀伤作用，流式细胞仪检测细胞周期变化。结果RT-PCR提示复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7／IL-24在肝癌细胞株MHCC97H，MHCC97L，Hep3B和正常细胞L02中高效表达；ELISA方法检测提示细胞培养上清液中MDA-7／IL-24蛋白的表达，而且随着感染时间延长表达量升高；MTT实验结果表明MDA7能明显抑制肝癌细胞的生长，Hoechst染色和流式细胞仪提示MDA7能促进肝癌细的凋亡；细胞周期检测提示肝癌细胞大量被阻滞在G2／M期，正常细胞没有增殖阻滞作用。各项结果提示MDA7对正常的肝细胞没有促进凋亡和增殖阻滞的作用。结论Ad．mda-7选择性的杀伤肝癌细胞，促进细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡与肝癌细胞的转移潜能无关。
- 王从俊彭志海于愿陈堃郑建伟胡回忆吉文伟薛新波
- 关键词：MDA-7/IL-24基因治疗高选择性
- mda-7／IL-24联合阿霉素诱导裸鼠肝癌凋亡的初步研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨重组腺病毒介导的mda-7/IL-24基因联合阿霉素(ADM)治疗裸鼠肝癌的作用及机制。方法采用mda-7/IL-24的重组腺病毒载体(Ad-mda-7)和/或ADM治疗实验性肝癌裸鼠,观察各组裸鼠生长时间及肿瘤体积变化,并对各组瘤体组织进行TUNEL检测。结果成功构建了重组腺病毒mda-7/IL-24基因载体。Ad-mda-7+ADM联合治疗组裸鼠平均生存时间为(83.8±4.82)d,明显长于其他3组(P<0.01);Ad-mda-7+ADM组肝癌体积明显缩小,抑癌率为79.78%,与单独用药组和对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合组癌组织凋亡增加,凋亡指数为38.1%±4.2%,与其余3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组腺病毒介导mda-7/IL-24联合阿霉素有明显的协同抗肿瘤作用,效果优于单独治疗组,主要作用机制与促进癌组织凋亡有关。
- 夏岚薛新波陈堃王从俊李雁于愿吉文伟郑建伟胡回忆
- 关键词：肝细胞MDA-7/IL-24阿霉素基因治疗
- 携带mda-基因的复制缺陷型腺病毒通过促进线粒体释放促凋亡蛋白杀伤肝癌细胞被引量：5
- 2008年
- 目的探讨黑色素瘤分化相关基因7／白介素24（mda-7／IL-24）基因选择性杀伤肝癌细胞的机制。方法应用携带mda-7基因的复制缺陷型腺病毒Ad．mda-7感染正常肝细胞l02和肝癌细胞HepG2。通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、酶联免疫吸附实验（ELISA）及Westernblot方法，观察mda-7／IL-24基因的表达；应用Hoechst染色和流式细胞仪观察mda-7／IL-24对肝癌细胞的杀伤作用；采用RT—PCR和Westemblot方法，观察Bcl-2家族和caspase-9基因表达的变化，分离不同感染时点细胞内线粒体和胞浆蛋白，并检测线粒体释放促凋亡蛋白细胞色素C（Cyt-C）和Smac／DIABLO的变化过程。结果Ad．mda-7能介导mda-7／IL-24在两种细胞株中的高效表达。能选择性杀伤肝癌细胞，感染24h后，HepG2细胞凋亡率为24．0％±4．6％，而对正常的肝细胞没有影响。RT—PCR和亚细胞蛋白的分析结果显示，胞浆内Bcl-2和Bcl-xL的表达在HepG2细胞中明显下降，而在1-02细胞中的表达无变化，Bax在肝癌细胞中的表达明显增强，Bak的表达无变化；Ad．mda-7能促进细胞线粒体释放Cyt-C和Smac／DIABLO蛋白，并促进caspase-9的表达。结论Ad．mda-7能选择性杀伤肝癌细胞HepG2，通过促进线粒体促凋亡蛋白的释放而诱导肝癌细胞凋亡。
- 王从俊彭志海郑建伟陈堃胡回忆吉文伟于愿薛新波
- 关键词：MDA-7/IL-24凋亡细胞色素CSMAC/DIABLO
- Ad-mda-7联合多柔比星对人肝癌裸鼠移植瘤的协同抑制作用
- 2008年
- 目的:将重组腺病毒介导的黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation-associated gene-7,mda-7)/IL-24与多柔比星(adriamycin,ADM)联合治疗人肝癌细胞裸鼠移植瘤,探索基因治疗和化疗相结合治疗肝癌的新方法。方法:构建携带人mda-7/IL-24基因的重组腺病毒载体(Ad-mda-7),单独使用该载体或ADM以及两者联合使用对人肝癌细胞裸鼠移植瘤进行治疗,观察抗肿瘤效果。用免疫组织化学方法检测各组肿瘤组织中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase,MMP-2)与转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1的表达。结果:成功构建重组腺病毒并实现体内表达,Ad-mda-7+ADM联合治疗组的裸鼠平均生存时间为(83.8±4.82)d,与其他3组相比生存期明显延长(P<0.01);Ad-mda-7+ADM组裸鼠移植瘤平均大小与单独使用ADM或Ad-mda-7相比明显缩小(P<0.01)。Ad-mda-7能显著降低TGF-β1和MMP-2的表达,明显优于ADM组(P<0.01)。结论:重组腺病毒介导mda-7/IL-24联合多柔比星对裸鼠人肝癌转移模型有明显的抗肿瘤作用及协同效应,其机制可能与抗肿瘤侵袭转移有关。
- 陈堃薛新波王从俊郑建伟于愿吉文伟彭志海吴在德
- 关键词：肿瘤抑制抗肿瘤联合化疗方案
- 重组腺病毒介导mda-7／IL-24基因与阿霉素联合治疗裸鼠肝癌被引量：3
- 2008年
- 目的将重组腺病毒介导的mda-7／IL-24（melanoma differentiation-associated gene-7）与阿霉素（adriamycin，ADM）联合治疗裸鼠肝癌，探索基因治疗和化疗相结合治疗肿瘤的新方法。方法构建携带人mda-7／IL-24的重组腺病毒载体（Ad—mda-7），单独使用该载体或ADM以及两者联合使用对实验性肝癌裸鼠进行治疗，观察抗肿瘤效果。结果成功构建重组腺病毒并实现体内表达，Ad-mda-7-4-ADM联合治疗组裸鼠平均生存时间为（83．8±4．82）d，与其它3组相比生存期明显延长（P〈0.01）；Ad—mda-7＋ADM组裸鼠肝癌生长大小与单独使用ADM或Ad-mda-7相比明显缩小（P〈0．01）。结论重组腺病毒介导mda-7／IL-24联合阿霉素对裸鼠人肝癌转移模型有明显的抗肿瘤作用及协同效应，可望用于肝癌基因治疗的研究。
- 陈堃薛新波王从俊李雁郑建伟于愿吉文伟吴在德
- 关键词：肝细胞MDA-7/IL-24阿霉素基因治疗
- Bcl-2家族蛋白在Ad.mda-7介导HepG2细胞凋亡中的变化被引量：1
- 2008年
- 目的观察Bcl-2家族蛋白在Ad.mda-7介导HepG2细胞凋亡中的变化,初步探讨Ad.mda-7介导肝癌细胞的凋亡机制。方法将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒转染HepG2和L02,通过四甲基偶氮哩蓝染色法(MTT)及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞HepG2和正常肝胚细胞L02的生长抑制和杀伤作用。Annexin V和PI双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2家族蛋白的变化。结果Ad.mda-7能明显抑制肝癌细胞HepG2的生长,但对正常肝胚细胞L02没有明显抑制增殖作用。Hoechst染色和流式细胞仪提示Ad.mda-7能明显诱导肝癌细胞HepG2细胞的凋亡,但对正常肝胚细胞L02没有明显毒副作用。Western blot说明抑制凋亡的蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达在HepG2明显下降,在L02中则没有变化;而促凋亡蛋白Bax在HepG2和L02都升高。结论Ad.mda-7转染HepG2后,促凋亡(Bax)与抑凋亡蛋白(Bcl-2和Bcl-xl)的比率发生改变,进而发生凋亡。
- 吉文伟薛新波郑建伟陈堃于愿王从俊胡回忆
- 关键词：HEPG2凋亡BCL-2家族蛋白
- 腺病毒介导MDA-7联合多柔比星对裸鼠移植肝癌作用机制的探讨被引量：1
- 2008年
- 目的:将重组腺病毒介导的MDA-7(melanoma differentiation-associ8ated gene-7)与多柔比星联合治疗裸鼠肝癌,探讨基因治疗和化疗相结合治疗肿瘤的新方法。方法:构建携带人MDA-7的重组腺病毒载体(Ad.MDA-7),单独使用该载体或多柔比星以及两者联合使用对实验性肝癌裸鼠进行治疗,观察抗肿瘤效果。用免疫组化方法检测各组肿瘤组织中VEGF与E钙粘素(E-cadherin)的表达情况。结果:成功构建重组腺病毒并实现体内表达,Ad.MDA-7+多柔比星联合治疗组裸鼠平均生存时间为(83.8±4.82)d,与其他3组相比生存期明显延长,P=0.000 1;Ad.MDA-7+多柔比星组裸鼠肝癌平均大小与单独使用多柔比星或Ad.MDA-7相比明显缩小,P=0.003 1。E-cadherin的表达表明,MDA-7的作用弱于多柔比星;VEGF的表达则显示,MDA-7作用明显优于多柔比星,P=0.016 5。结论:重组腺病毒介导MDA-7联合多柔比星对裸鼠人肝癌转移模型有明显的抗肿瘤作用及协同效应,其机制可能与抗肿瘤侵袭转移有关。
- 薛新波陈堃王从俊李雁郑建伟吉文伟于愿吴在德
- 关键词：基因多柔比星疾病模型基因疗法
- 腺病毒介导mda-7联合阿霉素对肝癌移植瘤生长的影响
- 2008年
- 研究发现mda-7基因能阻滞多种癌细胞增殖、促进细胞凋亡，对肿瘤具有选择性杀伤作用，而对正常细胞不起不良反应，且对肺癌的生长抑制作用与血管生成的减少相关。本实验应用重组腺病毒载体介导mda-7并在裸鼠体内表达，观察其抗肿瘤效果，为探索肝细胞癌（肝癌）的基因治疗联合化疗提供理论和实验依据。
- 胡回忆薛新波陈堃王从俊李雁郑建伟于愿吉文伟吴在德
- 关键词：基因疗法MDA阿霉素
- 黑色素瘤分化相关基因-7和白介素-24选择性杀伤肝癌细胞和诱导增殖阻滞的体外研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨黑色素瘤分化相关基因-7/白介素-24基因(mda-7/IL-24)对不同种类肝癌细胞的选择性杀伤作用。方法将携带人 mda-7/IL-24基因的复制缺陷型腺病毒(Ad.mda-7)感染人正常肝细胞和各种肝癌细胞,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附(ELISA)实验观察mda-7/IL-24基因的表达,MTT 法观察肝癌细胞的生长抑制,Hoechst 染色及 Annexin-V 和 PI 双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡情况及用流式细胞仪检测细胞周期。结果 RT-PCR 和 ELISA 提示Ad.mda-7能介导外源基因 mda-7/IL-24在各种肝癌细胞株和正常肝细胞中高效表达。MTT 实验结果提示 mda-7/IL-24能明显抑制各种肝癌细胞的生长,Hoechst 染色和流式细胞仪检测提示 mda-7/IL-24能选择性杀伤肝癌细胞,细胞周期分析提示 mda-7/IL-24阻滞肝癌细胞在 G2/M 期,同时对正常的肝细胞没有促凋亡和增殖阻滞作用。结论 mda-7/IL-24基因能选择性杀伤各种肝癌细胞,促进细胞增殖阻滞及诱导细胞凋亡。
- 王从俊彭志海于愿陈堃郑建伟胡回忆吉文伟薛新波
- 关键词：基因治疗凋亡
- 腺病毒介导mda-7基因联合阿霉素治疗裸鼠移植肝癌的作用被引量：2
- 2008年
- 目的将重组腺病毒介导的黑色素瘤分化相关基因-7(melanomadifferentiation-associatedgene-7,mda-7)/IL-24与阿霉素(adriamycin,ADM)联合治疗裸鼠肝癌,探索基因治疗和化疗相结合治疗肿瘤的新方法。方法构建携带人mda-7/IL-24的重组腺病毒载体(Ad.mda-7),单独使用该载体或ADM以及两者联合使用对实验性肝癌裸鼠进行治疗(分别为Ad.mda-7组、ADM组及Ad.mda-7+ADM组,并设立对照组),观察抗肿瘤效果。用免疫组化方法检测各组肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)与转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况。结果成功构建重组腺病毒并实现体内表达,Ad.mda-7+ADM组裸鼠平均生存时间为(83.8±4.82)d,较其他3组〔对照组为(43.4±1.67)d,ADM组为(64.2±4.14)d,Ad.mda-7组为(61.4±1.67)d〕生存时间明显延长(P<0.01)。Ad.mda-7+ADM组裸鼠平均肿瘤大小与单独使用ADM或Ad.mda-7相比明显缩小(P<0.01)。Ad.mda-7组肿瘤组织VEGF和TGF-β1的表达分别为(56.2±7.7)%和(35.2±4.5)%,抑制作用明显优于ADM组〔(70.7±6.5)%,P<0.05;(52.6±7.4)%,P<0.01〕;Ad.mda-7+ADM组肿瘤组织VEGF的表达为(37.3±5.0)%,较其余各组显著下降(P<0.01);Ad.mda-7+ADM组肿瘤组织TGF-β1的表达为(31.2±3.1)%,仍明显低于对照组和ADM组(P<0.01),而与Ad.mda-7组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组腺病毒介导mda-7/IL-24联合ADM对裸鼠人肝癌转移模型有明显的抗肿瘤作用及协同效应,其机理可能与抗肿瘤侵袭、转移有关。
- 陈堃薛新波王从俊郑建伟于愿吉文伟彭志海吴在德
- 关键词：阿霉素转化生长因子-Β1基因治疗
