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肝癌抑制基因-1转运功能区的研究: 2011年; 肝癌抑制基因-1(hepatocellular carcinoma suppressor 1,HCCS1)是一种潜在的肝癌抑制基因,在细胞内发挥蛋白分拣运输的作用,其抑癌作用有可能与蛋白转运的功能有一定的关系。本研究旨在寻找HCCS1序列中与转运功能相关的序列区域。首先通过亚克隆技术,构建以pEGFP-C2为载体,对不同长度HCCS1-cDNA片段进行亚克隆,将构建的亚克隆转染到HeLa细胞,通过免疫荧光显微镜观察不同长度HCCS1蛋白在细胞内的分布,及其与6-磷酸甘露糖受体(M6PR)的共定位。经过PCR及亚克隆后,目的片段成功插入载体质粒,构建了以pEGFP-C2为载体的含有4个不同长度HCCS1片段的亚克隆。分别是:pEGFP-C2-N1836,pEGFP-C2-N1572,pEGFP-C2-1707和pEGFP-C2-1506,其中pEGFP-C2-N1836和pEGFP-C2-N1572编码的HCCS1蛋白,长度不同均呈颗粒状、极性分布于核周的胞质内,且与M6PR有共定位;而pEGFP-C2-1707片段编码的HCCS1蛋白虽然也呈颗粒状分布于核周,但极性分布消失,且与M6PR共定位消失;pEGFP-C2-1506与pEGFP-C2-1707结果相似。结果显示了HCCS1-cDNA的5’端的129 bp序列为与HCCS1的极性及M6PR共定位相关的区域。; 周华刘鸿赵新泰周秀梅; 关键词：免疫荧光转运

隧道纳米管:一种新型的细胞间通讯连接方式被引量：3: 2008年; 多细胞生物体的细胞间存在着细胞连接、细胞通讯等多种形式的相互作用,这对于个体的生长发育是至关重要的。最近在哺乳动物细胞间发现了一种新型的细胞间通讯连接方式,根据其形态及结构特征,这种细长的膜管被命名为隧道纳米管(tunneling nanotubes,TNTs)。TNTs一直处于形成和断裂的持续变化状态之中,在相互连接的细胞间形成了复杂的网络结构,并且可以作为细胞间交流的通道,从而在广泛的生理过程中发挥着重要的作用。TNTs在动物细胞间很可能是一种普遍存在的生物学现象。; 刘鸿王毅刚石文芳钱其军

磷酸化和乙酰化修饰对STAT3功能的调节被引量：3: 2010年; STAT3是细胞因子和生长因子受体的胞质转录因子。当细胞因子与JAK相连受体结合时,JAK通过自身磷酸化而被激活,激活后的JAK可磷酸化一个或多个受体位点并呈递给STAT3而与之结合。随后STAT3发生Tyr705和Ser727位点的磷酸化并从受体上解离,而后转移至细胞核中调控基因表达。近来有研究表明STAT3的Lys685可发生乙酰化修饰,并且它对STAT3二聚体的稳定形成非常重要。为了进一步研究STAT3的乙酰化与磷酸化修饰之间的关系以及对STAT3活性调节的影响,本文应用Western印迹和荧光素酶报告基因检测等方法发现CBP可以增强STAT3Ser727的磷酸化,增强STAT3的转录活性。此外,STAT3 Tyr705去磷酸化能减弱STAT3的乙酰化水平,而且Tyr705的磷酸化修饰对STAT3的转录活性影响很大。上述结果对于如何靶向持续激活的STAT3用于肿瘤治疗提供了依据。; 谢宏霞曾凤辉刘鸿蒋海王毅刚; 关键词：磷酸化乙酰化 STAT3 转录活性

Survivin介导的条件复制型溶瘤腺病毒表达IL-24蛋白对人肝癌细胞PLC作用机制探究: 2010年; 条件复制型溶瘤腺病毒Ad.sp-E1A_((△24)-IL-24对人肝癌细胞株PLC的作用机制尚不清楚。采用流式细胞仪检测PLC经PBS、Ad.sp-E1A_((△24)以及Ad.sp-E1A_((△24)-IL-24处理48h后细胞周期的变化;利用Western blot检测PLC经PBS、Ad.sp-E1A_((△24)以及Ad.sp-E1A_((△24)IL-24处理24 h、48h后细胞中凋亡信号相关蛋白表达量的变化。实验结果表明:Ad.sp-E1A_((△24)和Ad.sp-E1A_((△24)-IL-24能将PLC细胞周期阻滞在S期,其值分别为43.74%±6.61%,49.48%±7.60%,两者与未感染病毒的对照组(18.91%±1.83%)进行统计学差异分析,P值均<0.05;同时,Western blot检测发现随着处理时间的增加,病毒处理组中CHOP的表达量、caspase 12的剪切水平及STAT3、p38 MAPK的磷酸化水平都有明显提高,尤其以Ad.sp-E1A_((△24)-IL-24处理组较为明显。SOCS3的表达量病毒处理组与对照组没有显著差异。上述结果表明重组腺病毒Ad.sp-E1A_((△24)-IL-24能有效阻滞PLC细胞周期在S期,并可能通过内质网压力、STAT3与MAPK信号通路等多种途径诱发PLC细胞凋亡。; 蒋海丁鑫鑫刘鸿谢宏霞章康健; 关键词：溶瘤腺病毒人肝癌细胞 IL-24基因

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刘鸿