刘金辉 作品数:61 被引量:170 H指数:8 供职机构: 南昌大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江西省教育厅科学技术研究项目 江西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
江西地区儿童感染的乙型肝炎病毒基因型分析 2012年 目的初步调查江西地区儿童感染的乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)基因型特征,为诊疗和预防儿童HBV感染提供重要参考。方法收集118例HBV感染的儿童血清标本,抽提血清中的HBV DNA,采用PCR扩增HBV S基因并测序,利用Genotyping软件对PCR产物序列进行分型,并采用Editseq软件、Clustalx(1.83)软件和Mega 4软件绘制S基因HBsAg遗传进化树以鉴定基因亚型。结果 118份HBsAg阳性血清标本中,成功扩增出HBV S基因并测序。所测序列标本经Genotyping比对和HBsAg遗传进化树后,112例为HBV B基因型,占94.92%,都是B2亚型;6例为HBV C基因型,占5.08%,其中4例为C2亚型,2例为C3亚型。结论江西地区儿童感染的HBV以B基因型中B2基因亚型为主,有少量的C基因型(C2基因亚型和C3基因亚型);该地区儿童感染的HBV遗传距离近。 周艳 邹淑慧 刘发娣 刘金辉关键词:乙型肝炎病毒 基因型 儿童 小鼠肺组织中肿瘤坏死因子α水平的变化与真菌机会性感染的关系 被引量:2 2011年 目的探讨小鼠肺组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的变化与肺组织真菌机会性感染的关系。方法将70只小鼠按数字表法分为2组:A组25只和B组45只。B组小鼠腹腔注射环磷酰胺(Cyclophosphamide,CY)80 mg.kg-1.d-1,A组小鼠腹腔注射等量的生理盐水。2组于8、24、48 h杀死小鼠,分离肺组织。Western Blot法检测2组小鼠肺组织胞浆中TNF-α的表达;比色法检测肺组织中髓过氧化物酶(My-eloperoxidase,MPO)的活性。A组小鼠注射无菌生理盐水24 h后、B组小鼠腹腔注射CY后8、24、48 h分别鼻吸入烟曲霉菌孢子,各组小鼠分别在感染24、96 h处死,匀浆肺组织培养,计数菌落数。结果 B组CY处理后8、24、48 h肺组织TNF-α水平分别为0.152±0.011、0.314±0.029和0.631±0.035,显著低于A组小鼠肺组织中TNF-α水平(0.812±0.043)(P<0.01)。B组3个时间点的TNF-α水平比较差异有统计学意义(P<0.01)。B组小鼠8、24、48 h肺组织中MPO活性均显著低于A组[(0.028±0.007)、(0.075±0.004)、(0.125±0.009)U.g-1vs(0.218±0.015)、(0.208±0.036)、(0.211±0.012)U.g-1,均P<0.01]。A组烟曲霉菌菌落数在24、96 h时均显著低于B组(均P<0.01)。结论小鼠肺组织TNF-α表达下调,降低了肺组织MPO活性水平,导致抗感染天然免疫抑制,是机体发生机会性真菌感染的机制之一。 华锋 余克花 周艳 刘金辉关键词:机会性感染 真菌 烟曲霉菌 肿瘤坏死因子Α 肺组织 小鼠 甲型肝炎病毒变异的分子机制研究进展 2004年 刘金辉 向金华关键词:甲型肝炎病毒 基因变异 表型变异 细胞病变 败血症的实验室诊断指标 被引量:1 2009年 败血症是细菌侵入宿主血液中并繁殖释放多种毒性产物而引起的一种严重危害患者健康的全身感染性疾病。其常见的致病菌主要有革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌.其次为厌氧菌、真菌及一些条件致病菌。败血症无特异的临床表现,病情复杂并且进展迅速.若得不到及时而有效的治疗.其病死率可高达80%. 刘宁 刘金辉关键词:实验室诊断指标 败血症 条件致病菌 革兰阴性杆菌 革兰阳性球菌 感染性疾病 儿童感染的乙型肝炎病毒X基因的分子特征分析 被引量:1 2013年 目的初步调查儿童感染的乙型肝炎病毒(HBV)X基因的分子特征。方法收集20例儿童慢性乙型肝炎(乙肝)患者的血清标本,抽提血清中的HBV DNA,采用PCR扩增HBV X基因并测序,利用Clustal X、Bioedit软件对PCR产物序列进行X基因的突变分析。结果 20例HBV X基因突变区主要集中在羧基端aa120—150,氨基酸序列突变点分别为I127T、K130M、V131I、P145R、A146G/C、C148R/H和N149G/D;核苷酸序列突变点分别为T1753C、A1762T、G1764A、T1800C、C1807G、C1810G、A1811T、A1814C、T1815C、C1817T、A1819G和C1820A。结论儿童感染的HBV X存在突变,集中在羧基端aa120—150,对儿童乙肝的演变会产生重要影响。 邹淑慧 周艳 余克花 刘金辉关键词:乙型肝炎病毒 X基因 儿童 柯萨奇B组病毒致病性的分子生物学研究 被引量:1 2010年 柯萨奇B组病毒(coxsackievirus group B,CVB)是微小RNA病毒科肠道病毒属成员,病毒性心肌炎的病例中大约有20%-25%是由柯萨奇B组病毒引起。CVB的致病机制十分复杂,病毒基因组以及病毒蛋白均在病毒致病过程中发挥重要作用。因此,对柯萨奇B组病毒的基因组、结构蛋白以及某些非结构蛋白与靶细胞内分子间相互作用生物信息的认识是阐述该病分子机制的基础。 刘发娣 黄孝天 刘金辉关键词:柯萨奇B组病毒 心内膜炎 分子间相互作用 烟曲霉菌感染激活小鼠肺组织TLR3信号通路的研究 被引量:4 2013年 目的 TLR3介导的天然免疫通路是抗感染重要的天然免疫机制,本文研究鼻感染烟曲霉菌是否能激活小鼠肺组织TLR3天然免疫信号通路。方法小鼠分正常组和感染组,感染组经鼻感染烟曲霉菌孢子,正常组经鼻滴入等量的生理盐水,8 h、24 h和48 h后处死小鼠,分离肺组织,取100 mg肺组织RT-PCR检测TLR3、TRIF及IFN-βmRNA水平、Western blot检测胞核IRF3的含量。取24 h、48 h和72 h小鼠肺组织制作病理切片,100 mg肺组织碾碎接种蔡氏培养基平板以检测肺组织烟曲霉菌载荷。结果感染组小鼠肺组织烟曲霉菌负荷72 h时显著下降,正常组烟曲霉菌培养阴性;正常组小鼠肺组织结构正常,感染组小鼠24 h时肺组织可见严重的炎症反应及出血,72 h时肺组织炎症反应减轻;RT-PCR及Western blot结果显示:感染组小鼠肺组织各时相点TLR3 mRNA、TRIF mRNA、IRF3和IFN-βmRNA的表达量均显著高于正常对照组(P<0.05),均在24 h达到最高峰(P<0.05)。结论烟曲霉菌感染的小鼠肺组织中TLR3信号通路得以激活,其介导的天然免疫对感染烟曲霉菌的清除和保护小鼠肺组织起了一定的作用。 应颖 王鹏 周艳 邹淑彗 刘金辉 谢小梅关键词:天然免疫 IFN 烟曲霉菌 二种不同病毒基因表达调节元件对骨多形性蛋白12基因在COS细胞中的表达影响 2005年 目的 比较巨细胞病毒的早期启动子和腺病毒主要晚期启动子(MPL)、三联前导序列(TPL)和插入序列 (IVS)组合对BMP12在COS细胞中表达的影响。方法 BMP12cDNA分别克隆在pED载体中的腺病毒主要晚期 启动子(MPL)、三联前导序列(TPL)和插入序列(IVS)组合下游,构建了表达质粒BMP12/pED。及克隆在AD1- 1载体中巨细胞病毒的早期启动子下游,构建了表达质粒BMP12/AD1 1。采用脂质体法将二个表达质粒分别转 染入COS细胞。40h及60h后,分别取100μl培养上清进行Western印迹,检测所表达的BMP12蛋白。结果 Western印迹结果显示:转染40hr后,只在BMP12/pED转染的COS细胞培养液检测出2个BMP12特异表达产 物,大小约为50kD和44kD(较弱)。转染60h后,BMP12/Ad1 1转染的COS细胞培养液有3个BMP12特异表达 产物,大小约为:50kD、40kD、15kD;BMP12/pED转染细胞培养液有4个BMP12特异表达产物,大小约为:50kD、 48kD、44kD、15kD。结论 腺病毒主要晚期启动子(MPL)、三联前导序列(TPL)和插入序列(IVS)组合的基因表 达调节元件驱动的BMP12表达量高于巨细胞病毒的早期启动子;二种病毒基因表达调节元件驱动的BMP12表达 产物的种类与大小均有差异。 刘金辉 Glenn Larsen关键词:巨细胞病毒 乙型肝炎病毒外膜蛋白的分子生物学研究进展 2013年 乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)外膜蛋白含PreS1、PreS2和S 3种蛋白,位于病毒颗粒的外表面,参与病毒颗粒的吸附、组装与成熟,在保护性免疫应答反应中起重要作用,HBV感染肝细胞所合成的外膜蛋白对肝细胞的生长、代谢,甚至是恶性转化产生一系列重要的生物学调节效应,外膜蛋白的变异使得HBV对受染肝细胞的影响非常复杂且成多样化,在病毒性乙型肝炎慢性化及其相关疾病演变过程的分子病理机制扮演重要角色。 周艳 邹淑慧 刘金辉关键词:乙型肝炎病毒 外膜 S蛋白 PRES1蛋白 PRES2蛋白 套式PCR及测序法检测痰中结核分枝杆菌耐乙胺丁醇embB基因突变 乙胺丁醇作为抗结核一线药物在治疗结核的过程中起着重要的作用。近年来,结核病疫情及其耐药性呈现上升趋势,传统的实验室诊断方法因时间长(2-3个月)不能满足临床诊治的需要,近几年出现了许多检测结核分枝杆菌耐乙胺丁醇的新方法:... 刘珍琼 刘金辉 熊国亮 辛茶香关键词:乙胺丁醇 结核分枝杆菌 文献传递