罗闳丹
- 作品数：36 被引量：150H指数：8
- 供职机构：湖南中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学更多>>
- NODs信号通路在RAW264.7细胞抗烟曲霉菌刺激中的作用被引量：2
- 2012年
- 【目的】通过培养RAW264.7细胞,并运用siRNA沉默NOD2基因来研究NODs信号通路在体外抗烟曲霉中的作用。【方法】体外培养RAW264.7细胞,接种2×105个/孔细胞于六孔板中,分为正常对照组(N)和正常沉默组[NOD2(RNAi),正常+烟曲霉孢子刺激组(N+Af)和正常沉默+烟曲霉孢子刺激组[NOD2(RNAi)+Af],每组三复孔。通过RT-PCR法检测细胞中NOD1、NOD2、RIP2 mRNA表达;Western blot法检测细胞中分泌蛋白TNF-α表达。【结果】与N组比较,N+Af组NOD1、NOD2 mRNA和TNF-α蛋白表达显著上升。与阴性对照组(Nctrol)相比,NOD2(RNAi)组NOD2 mRNA表达明显受到抑制,沉默效果达到80%以上,说明RAW264.7细胞中NOD2基因被成功沉默。与NOD2(RNAi)组比较,NOD2(RNAi)+Af组NOD1、RIP2 mRNA和TNF-α蛋白表达小幅上升,但无显著性差异(P>0.05)。与NOD2基因沉默前比较发现:与N组比较,NOD2(RNAi)组,TNF-α蛋白表达显著性升高(P<0.05)。与N+Af组比较,NOD2(RNAi)+Af组,TNF-α蛋白显著性降低(P<0.05);NOD1、RIP2 mRNA在各组中表达均未见显著性差异。【结论】NODs信号通路在RAW264.7细胞抗烟曲霉中发挥作用,尤以NOD2的作用较突出。
- 罗闳丹张海红苏明声梁永红饶振华谢小梅
- 关键词：烟曲霉菌RAW264.7细胞SIRNA
- TLR4基因的沉默下调了NOD1信号通路在RAW264．7细胞中抗烟曲霉孢子刺激作用被引量：3
- 2012年
- 为研究单核巨噬细胞RAW264.7受烟曲霉孢子刺激时NOD1和TLR4信号通路在细胞处于正常状态和免疫抑制状态时发挥的作用,以及沉默TLR4基因后对NOD1信号通路的影响,通过建立细胞免疫抑制模型,利用RNAi技术将TLR4-siRNA转染细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h,运用RT-PCR和Western blot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后NOD1,TLR4,RIP2,MyD88 mRNA及TNF-α蛋白表达变化.研究发现:(1)给予RAW264.7细胞含免疫抑制剂甲泼尼龙琥珀酸钠浓度为0.04mg/mL的RPMI1640培养液培养12h后,细胞抑制效果最佳,存活率约为90%.(2)正常RAW264.7细胞受烟曲霉孢子刺激时,NOD1和TLR4信号通路被激活,通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用,当细胞处于免疫抑制状态时,NOD1和TLR4信号通路不能激发其有效的免疫应答.(3)TLR4-siRNA转染RAW264.7细胞,沉默效率达83%.(4)TLR4基因的沉默,使NOD1信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用,表明沉默TLR4基因下调了NOD1信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用.
- 饶振华谢卫华苏明声龙凯罗闳丹谢小梅
- 以高等教育质量提升为目标的督导制度改革研究——以湖南中医药大学为例
- 2019年
- 发展与创新教育督导制度,既是国际教育的发展趋势,也是高等教育质量提升的必由之路。本文以湖南中医药大学“专业、中立、独立”为价值引领的教学督导评价新机制为例,由三层面探析基于高等教育质量提升的督导制度架构权衡:由学术化与行政化制度架构权衡,趋于专业督导;由客观性与主观性制度架构权衡,趋于中立督导;由规范化与博弈化制度架构权衡,趋于独立督导。
- 刘蔚贺又舜常小荣何桂霞黄巧玲罗闳丹陈楚淘
- 关键词：督导教育质量制度架构
- TLR4基因沉默下调TLR2信号通路在RAW264．7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用被引量：2
- 2012年
- 目的研究单核巨噬细胞RAW264．7受烟曲霉孢子刺激时，TLR2和TLR4信号通路发挥的作用，以及沉默TLR4基因后，对TLR2信号通路的影响。方法利用RNAi技术将11LR4-siRNA转染RAW264．7细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h，将细胞随机分为正常组（N组）、正常＋烟曲霉孢子刺激组（N＋Af组）、正常＋TLR4-siRNA组[TLR4（RNAi）组]、正常＋TLR4-siRNA＋烟曲霉孢子刺激组[TLR4（RNAi）＋Af组]，RT-PCR和Westernblot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后TLR2、TLR4、MyD88mRNA及TNF-α蛋白的表达变化。结果（1）TLR4基因沉默前：与N组比较，N＋Af组TLR2、TLR4、MyD88mRNA及TNF．Ot蛋白表达量均显著升高（P〈0．05）。（2）TLR4-siRNA（100nmol／L）转染RAW264．7细胞，沉默效率达83％。（3）TLR4基因沉默后：与N组比较，TLR4（RNAi）组TLR2、MyD88mRNA的表达量均显著降低（P〈0．05）；与N＋缈组比较，rrLR4（RNAi）＋4厂组的TLR2、MyD88mRNA和TNF-α蛋白的表达量均显著降低（P〈0．05）；与TLR4（RNAi）组比较，TLR4（RNAi）＋A厂组MyD88mRNA表达量显著升高（P〈0．05），而TLR2mRNA及TNF．仪蛋白表达量却无显著变化（P〉0．05）。结论RAW264．7细胞受烟曲霉孢子刺激时，TLR2和TLR4信号通路被激活，通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用；当沉默TLR4基因后，TLR2信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用，沉默TLR4基因下调了TLR2信号通路在RAW264．7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用，可能TLR4较TLR2在抵抗烟曲霉孢子刺激时发挥更重要的作用。
- 饶振华朱根华谢卫华苏明声龙凯罗闳丹谢小梅
- 雷公藤固体发酵减毒增效的研究
- 药用真菌'固体发酵'是中药传统范畴内仅有的，也是历史上诞生最早的一类生物制药技术,其在中药传统范畴内始于北魏时期，以'制曲工艺'制作中药'神曲'起,发展至今已有1500余年，并延伸发展经'固体培养'时期进入'固体发酵'时...
- 苏明声罗闳丹梁永红谢小梅
- 关键词：雷公藤固体发酵减毒增效
- 文献传递
- 雷公藤解毒持效双向发酵工艺的建立被引量：17
- 2010年
- 采用双向发酵的原理,运用"发酵过程动态比较法"研究了灵芝接种于雷公藤药性基质上发酵不同时间所得菌质的化学成分、急性毒性和免疫功能的变化,以其确定雷公藤解毒持效双向发酵的最佳发酵终点。研究结果表明:发酵第30天所得的菌质(G30)总二萜的含量最低,为0.57%;与雷公藤生药比较,G30的LD50最高,且发酵第30天所得菌质的体液免疫和细胞免疫抑制作用最强。综合对成分含量、毒性及药效的动态数据联系比较、分析,确定了雷公藤解毒持效双向发酵的发酵终点与适宜的发酵周期是菌丝长满瓶后的第30天。
- 苏明声谢小梅罗闳丹张普照庄毅
- 关键词：灵芝发酵过程
- 侵袭性肺曲霉病小鼠肺组织差异表达蛋白的初步分析
- 2012年
- 目的初步分析侵袭性肺曲霉病(IPA)小鼠肺组织蛋白质的表达变化。方法运用双向电泳(2-DE)技术对正常组、正常感染组和IPA组小鼠肺组织总蛋白质进行分离,获得蛋白质表达谱;应用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)结合生物信息学进行蛋白质鉴定。结果初步鉴定出4个蛋白质点分别为过氧化物还原酶(peroxiredoxin-6,Prx6)、黄素还原酶(flavin reductase,FR)、Rho因子鸟苷酸解离抑制蛋白2(rho GDP-dissociation inhibitor 2,RhoGDI2)、肌球蛋白轻链2(myosin regulatory light chain 2,MLC2),它们与氧化还原平衡、信号转导通路、细胞骨架等功能有关。结论鉴定的差异表达蛋白可能与IPA的发病机制有关。
- 孙艳红龙凯罗闳丹谢卫华程文超谢小梅
- 关键词：侵袭性肺曲霉病蛋白质组学差异表达蛋白
- 灵芝固体发酵雷公藤的解毒持效作用
- ＜正＞目的:研究灵芝固体发酵对有毒中药雷公藤的解毒持效作用。方法:运用"发酵过程动态比较法"研究灵芝接种于雷公藤药性基质上发酵不同见所得菌质的化学成分、急性毒性和免疫功能的变化,以确定灵芝固体发酵雷公藤解毒持效的最佳发酵...
- 苏明声罗闳丹梁永红张普照周雪娥刘敏亮谢小梅
- 文献传递
- 四逆散对小鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治作用及机制的研究
- 目的 综合参考文献方法,复制MCD饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝炎模型及软脂酸诱导的HepG2细胞非酒精性脂肪肝模型,从体内及体外分别研究四逆散配方颗粒对非酒精性脂肪性肝炎的防治疗效及作用机制。 方法 1.将C57BL/...
- 罗闳丹
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎脂肪酸氧化氧化应激
- 文献传递
- 小鼠侵袭性肺曲霉病发病过程中TLRs/NF-κB信号通路的激活被引量：8
- 2010年
- 目的:研究小鼠侵袭性肺曲霉病(IPA)发生过程中TLRs/NF-κB信号通路的激活,探讨IPA的发病机理。方法:小鼠随机分为正常组(N)、正常接菌组(N+Af)和IPA模型组(IPA),经鼻吸入烟曲霉(Af)孢子后在不同时相点处死小鼠,无菌取肺组织行病理切片、Af菌落计数,RT-PCR法检测TLR2和TLR4 mRNA、蛋白印迹法检测NF-κBp65、IL-1β的表达。结果:(1)鼻吸入Af后72小时时,IPA组肺组织出现严重炎症反应,并有大量的菌丝生成,同时各时相点的菌负荷均高于N+Af组;(2)与N+Af组比较,IPA组TLR2 mRNA后期异常高表达,TLR4 mRNA持续低表达,NF-κBp65早期骤然升高后又持续下降,IL-1β一直呈低表达状态。结论:TLRs的异常激活导致宿主下游信号的低反应性,宿主不能清除Af促使了IPA的发生发展。
- 李祥罗闳丹石青谢小梅刘金辉
- 关键词：侵袭性肺曲霉病AF天然免疫模式识别受体
