刘玲玲
- 作品数：25 被引量：75H指数：6
- 供职机构：天津市环湖医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市卫生局科技基金更多>>
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- 富氢液对创伤性颅脑损伤大鼠急性肺损伤的影响及Nrf2/HO-1信号通路在其中的作用被引量：1
- 2022年
- 目的评价富氢液对创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠急性肺损伤的影响及核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路在其中的作用。方法成年雄性SD大鼠48只,体重220~250 g,采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(S组)、TBI组(T组)、TBI+富氢液组(T+H组)和TBI+富氢液+鸦胆子苦醇组(T+H+B组)。采用控制型皮质撞击损伤法制备TBI模型。T+H+B组于造模前10 d开始隔天腹腔注射Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇0.4 mg/kg;T+H组和T+H+B组于造模后1和6 h时腹腔注射富氢液10 ml/kg。造模后24 h时,收集支气管肺泡灌洗液(BLAF)测定蛋白浓度,取右颈总动脉血和肺组织,采用ELISA法测定血清和肺组织TNF-α、IL-10和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的水平,测定肺组织湿重/干重(W/D)比值,HE染色后观察肺组织病理学结果并进行评分,采用Western blot法检测肺组织核Nrf2、总Nrf2和HO-1表达,RT-PCR法检测肺组织HO-1 mRNA表达。结果与S组相比,T组和T+H组BALF蛋白浓度、肺组织W/D比值和肺组织病理评分升高,血清和肺组织TNF-α、HMGB1和IL-10水平升高,肺组织核Nrf2、总Nrf2、HO-1及其mRNA表达上调(P<0.05);与T组相比,T+H组BALF蛋白浓度、肺组织W/D比值和肺组织病理评分降低,血清和肺组织TNF-α和HMGB1水平降低,IL-10水平升高,肺组织核Nrf2、总Nrf2、HO-1及其mRNA表达上调(P<0.05),T+H+B组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与T+H组相比,T+H+B组BALF蛋白浓度、肺组织W/D比值和肺组织病理评分升高,血清和肺组织TNF-α和HMGB1水平升高,IL-10水平降低,肺组织核Nrf2、总Nrf2、HO-1及其mRNA表达下调(P<0.05)。结论富氢液可减轻TBI大鼠急性肺损伤,其机制与激活肺组织Nrf2/HO-1信号通路,抑制炎症反应有关。
- 刘玲玲张红涛王计伟于泳浩陈君
- 关键词：脑损伤创伤性急性肺损伤NF-E2相关因子2血红素加氧酶-1
- α2受体在右美托咪定改善创伤性颅脑损伤大鼠肠道屏障功能障碍中的作用被引量：3
- 2019年
- 目的评价α2受体在右美托咪定改善创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠肠道屏障功能障碍中的作用。方法清洁级健康雄性Wistar大鼠40只,12周龄,体重200~250 g,采用随机数字表法分为4组(n=10):对照组(C组)、TBI组(T组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定+阿替美唑组(D+A组)。采用自由落体撞击法建立大鼠TBI模型,于模型制备前30 min饲入4.0 kD异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(FITC-Dex)60 mg/100 g;D组和D+A组于模型制备前30 min腹腔注射右美托咪定50μg/kg,D+A组于注射右美托咪定前10 min腹腔注射阿替美唑500μg/kg。于模型制备后6 h时采集颈总动脉血样,采用ELISA法检测血浆肾上腺素(E)和去甲肾上腺素(NE)的浓度,采用荧光分光光度计法测定血清FITC-Dex浓度,采用比色法测定血清二胺氧化酶(DAO)活性;取小肠组织,采用比色法测定肠组织DAO活性,检测肠道上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1的表达。结果与C组比较,T组、D组和D+A组血浆E和NE浓度、血清FITC-Dex浓度和DAO活性升高,肠组织DAO活性降低,ZO-1表达下调(P<0.05);与T组比较,D组血浆E及NE浓度、血清FITC-Dex浓度和DAO活性降低,肠组织DAO活性升高,ZO-1表达上调(P<0.05);与D组比较,D+A组血浆E及NE浓度、血清FITC-Dex浓度和DAO活性均升高,肠组织DAO活性降低,ZO-1表达下调(P<0.05)。结论α2受体参与了右美托咪定改善TBI大鼠肠道屏障功能障碍的过程。
- 张红涛王焕宇刘玲玲王红光于泳浩陈君
- 关键词：右美托咪啶颅脑损伤肠黏膜
- 氢对脓毒症相关性脑病小鼠脑组织Nrf2/HO-1信号通路的影响被引量：6
- 2018年
- 目的评价氢对脓毒症相关性脑病小鼠脑组织核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1（Nrf2/HO-1）信号通路的影响。
方法成年雄性ICR小鼠90只，体重20～25 g，采用随机数字表法分为3组（n＝30）：假手术组（SH组）、脓毒症相关性脑病组（SAE组）和脓毒症相关性脑病＋氢组（SAE＋H组）。采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制备脓毒症模型。于CLP后1和3 h时SAE＋H组腹腔注射富氢盐水10 ml/kg。于CLP后24 h时，取海马CA1区组织，采用高尔基染色法计算神经元树突棘密度，采用TUNEL法观察神经细胞凋亡情况，计算凋亡指数。于CLP后6、12和24 h时，采用Western blot法测定海马核蛋白Nrf2（N-Nrf2）和总蛋白HO-1、高迁移率族蛋白1（HMGB1）的表达，采用RT-PCR法检测HMGB1 mRNA的表达。
结果与SH组比较，SAE组及SAE＋H组海马CA1区神经元树突棘密度和凋亡指数升高，海马N-Nrf2、HO-1、HMGB1及其mRNA表达上调（P〈0.05）；与SAE组比较，SAE＋H组海马CA1区神经元树突棘密度和凋亡指数降低，海马N-Nrf2、HO-1表达上调，HMGB1及其mRNA表达下调（P〈0.05）。
结论氢减轻小鼠脓毒症相关性脑病的机制可能与激活脑组织Nrf2/HO-1信号通路有关。
- 刘玲玲张红涛于泳浩谢克亮陈君梁禹
- 关键词：氢NF-E2相关因子2血红素加氧酶-1
- 异丙酚通过激活PI3K/Akt信号通路抑制癌细胞转移被引量：2
- 2016年
- 目的研究异丙酚对肿瘤细胞转移相关信号通路PI3K/Akt的影响。方法将来源于人类乳腺癌细胞株移植到SPF级裸基因的免疫缺陷型小鼠制备乳腺癌模型。将接种成功小鼠随机分为4组:对照组(C组,n=6)、异丙酚输注组(P组,50mg/kg,输注2h,n=6)、PI3K抑制剂(BYL719)组(B组,n=6)和异丙酚加PI3K抑制剂组(P+B组,n=6)。于给药后4周分别采用蛋白质免疫印迹试验(Western blot)检测4组小鼠癌组织中PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)、Akt的蛋白表达水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PI3KR1(PI3Kregulatory subunit 1)和Akt(Akt1和Akt2)的mRNA表达水平;取双肺,观察小鼠肺表面转移结节数。结果与C组相比,P组PI3K和p-Akt的蛋白表达明显增高(P<0.05),PI3KR1的mRNA表达明显升高(P<0.05),Akt1和Akt2的mRNA表达无明显变化(P>0.05),肺表面转移结节数明显减少(P<0.05);B组PI3K和p-Akt的蛋白表达明显下调(P<0.05),PI3KR1mRNA、Akt1和Akt2的mRNA表达无明显变化(P>0.05),肺表面结节数明显增加(P<0.05)。与B组相比,P+B组明显上调了PI3K和p-Akt的蛋白表达(P<0.05),PI3KR1的mRNA表达明显升高(P<0.05),Akt1和Akt2的mRNA表达无明显变化(P>0.05),肺表面结节数明显减少(P<0.05)。结论异丙酚可通过激活PI3K/Akt信号通路抑制肿瘤细胞的转移。
- 陈军赵文晖刘玲玲谢克亮宋张骏
- 关键词：异丙酚PI3K/AKT乳腺癌
- JNK在氢气改善重度脓毒症小鼠肠屏障功能障碍中的作用被引量：7
- 2016年
- 目的探讨c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)在氢气改善重度脓毒症小鼠肠屏障功能障碍中的作用。方法将80只雄性ICR小鼠按照随机数字表法分为假手术组、氢气对照组、脓毒症组和氢气治疗组,每组20只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备重度脓毒症小鼠模型,假手术组和氢气对照组只进行开腹手术而不行盲肠结扎和穿孔。氢气对照组和氢气治疗组于制模后1 h和6 h分别吸入2%的氢气1 h。于制模后20 h时各组取10只,向胃内灌注异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(FITC-右旋糖酐),4 h后经心脏穿刺取血并测定血清FITC-右旋糖酐水平。于制模后24 h各组取10只,取腹腔液进行细菌培养并计数菌落形成单位(CFU);取中段小肠组织,采用酶联免疫吸附试验测定肠组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平,采用蛋白免疫印迹法测定肠组织JNK的磷酸化水平(p-JNK)以及紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达,利用光学显微镜和透射电镜分别观察肠组织病理学改变和肠上皮细胞超微结构的变化。结果假手术组和氢气对照组各指标差异均无统计学意义。与假手术组比较,脓毒症组血清FITC-右旋糖酐、腹腔液细菌培养菌CFU和小肠组织TNF-α、IL-1β和HMGB1明显增加,小肠组织p-JNK表达明显增加并伴随ZO-1和Occludin表达下调(均P<0.05),小肠组织明显损伤伴肠上皮细胞超微结构严重受损。与脓毒症组比较,氢气治疗组制模后24 h时血清FITC-右旋糖酐、腹腔液细菌培养CFU和小肠组织TNF-α、IL-1β和HMGB1明显降低,小肠组织p-JNK表达下调并伴随ZO-1和Occludin表达增加(均P<0.05),小肠组织损伤和肠上皮细胞超微结构受损明显减轻。结论氢气可以通过抑制JNK通路降低小肠组织炎症因子的水平并增加紧密连接蛋白的表达,从而改善重度脓毒症引起的肠屏障功能障碍。
- 张红涛于洋刘玲玲于泳浩王国林
- 关键词：脓毒症JNK丝裂原活化蛋白激酶类白细胞介素1Β高迁移率族蛋白质类紧密连接蛋白
- HO-1在七氟烷改善小鼠脓毒症相关性脑病中的作用
- 2021年
- 目的:评价血红素氧合酶-1(HO-1)在七氟烷改善小鼠脓毒症相关性脑病中的作用。方法:成年雄性C57BL/6J小鼠136只,体重20~25 g,6~8周龄,采用随机数字表法分为4组(n=34):假手术组(Sham组)、脓毒症相关性脑病组(SAE组)、脓毒症相关性脑病+七氟烷组(SAE+Sevo组)和脓毒症相关性脑病+七氟烷+HO-1抑制剂锌原卟啉Ⅸ组(SAE+Sevo+ZnPPⅨ组)。采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠脓毒症相关性脑病模型。SAE+Sevo组和SAE+Sevo+ZnPPⅨ组分别于造模成功后立即吸入2%七氟烷-33%氧气2 h,Sham组和SAE组吸入33%氧气2 h。SAE+Sevo+ZnPPⅨ组于造模前30 min时腹腔注射HO-1抑制剂ZnPPⅨ25 mg/kg。于造模后6、12和24 h时处死6只小鼠,采用ELISA法检测皮层组织TNF-α、IL-1β、高迁移率族蛋白1(HMGB1)和HO-1水平,采用Western blot法检测皮层组织HO-1表达。于造模后24 h时处死6只小鼠,采用TUNEL染色检测皮层细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数。每组取10只小鼠,分别于造模后3、5、7和14 d时行Y迷宫实验,计算自发交替百分比。结果:与Sham组比较,SAE组、SAE+Sevo组及SAE+Sevo+ZnPPⅨ组皮层组织TNF-α、IL-1β、HMGB1水平、细胞凋亡指数、HO-1活性及其表达水平升高,自发交替百分比降低(P<0.05)。与SAE组比较,SAE+Sevo组皮层组织TNF-α、IL-1β、HMGB1水平和细胞凋亡指数降低,HO-1活性及其表达水平、自发交替百分比升高,SAE+Sevo+ZnPPⅨ组皮层组织TNF-α、IL-1β及HMGB1水平降低(P<0.05),其余指标差异无统计学意义(P>0.05)。与SAE+Sevo组比较,SAE+Sevo+ZnPPⅨ组皮层组织TNF-α、IL-1β、HMGB1水平和细胞凋亡指数升高,HO-1活性及其表达水平、自发交替百分比降低(P<0.05)。结论:七氟烷改善小鼠脓毒症相关性脑病的机制与提高皮层组织HO-1活性,减轻炎症反应有关。
- 王亚欣刘玲玲谢克亮陈君
- 关键词：麻醉药吸入血红素加氧酶-1
- 右美托咪定对创伤性颅脑损伤小鼠肠道屏障功能的影响及Nrf2/HO-1信号通路在其中的作用被引量：11
- 2020年
- 目的评价右美托咪定对创伤性颅脑损伤(TBI)小鼠肠道屏障功能的影响及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路在其中的作用。方法ICR级雄性野生型(WT)小鼠和Nrf2基因敲除型(Nrf2-KO)小鼠各30只,6~8周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法各分为3组(n=10):对照组(C组)、TBI组(T组)和TBI+右美托咪定组(T+D组)。采用自由落体加速撞击法建立小鼠TBI模型,T+D组于造模前30 min时腹腔注射右美托咪定30μg/kg,C组和TBI组腹腔注射等容量生理盐水。造模后18 h时排空小鼠膀胱,并经胃管给予含乳果糖13.3 mg和甘露醇10.1 mg的测试液200μl。造模后24 h时收集尿液,测定乳果糖与甘露醇的浓度比值,反映肠屏障通透性。经心脏采血,测定血浆LPS浓度,然后处死小鼠,取回肠组织,采用ELISA法测定TNF-α、IL-1β、IL-6和8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)的含量,采用羟胺法测定肠组织SOD活性,采用钼酸铵比色法测定肠组织过氧化物酶(CAT)活性,采用硫代巴比妥酸法测定肠组织MDA含量,采用Western blot法测定Nrf2和HO-1的表达水平。结果与C组WT小鼠比较,T组和T+D组WT小鼠肠屏障通透性、血浆LPS浓度、肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA、8-iso-PGF2α含量升高,肠组织CAT和SOD活性降低,Nrf2和HO-1表达上调(P<0.05);与T组WT小鼠比较,T+D组WT小鼠肠屏障通透性、血浆LPS浓度、肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA、8-iso-PGF2α含量降低,肠组织CAT和SOD活性升高,Nrf2和HO-1表达上调(P<0.05)。与C组Nrf2-KO小鼠比较,T组和T+D组Nrf2-KO小鼠肠屏障通透性、血浆LPS浓度、肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA、8-iso-PGF2α含量升高(P<0.05),肠组织CAT和SOD活性差异无统计学意义(P>0.05);与T组Nrf2-KO小鼠比较,T+D组Nrf2-KO小鼠上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。3组Nrf2-KO小鼠肠组织HO-1表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论右美托咪定可改善TBI小鼠肠道屏障功能障碍,其机制与�
- 张红涛何中壹刘玲玲于洋于泳浩陈君
- 关键词：右美托咪啶颅脑损伤NF-E2相关因子2血红素加氧酶-1
- 低氧预处理对氧糖剥夺人脑微血管内皮细胞线粒体呼吸功能的保护作用
- 2019年
- 目的通过观察低氧预处理对氧糖剥夺人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cell,HBMVEC)低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和线粒体琥珀酸脱氢酶复合体亚基2(succinate dehydrogenase complex iron sulfur subunit B,SDHB)表达水平以及线粒体ATP合成的影响,评价低氧预处理对氧糖剥夺HBMVEC的保护作用.方法离体培养HBMVEC,采用随机数字表法将HBMVEC分为5组(每组6孔):正常对照组(A组)、氧糖剥夺组(B组)、氧糖剥夺+低氧预处理组(C组)、氧糖剥夺+低氧预处理+二甲基草酰甘氨酸(dimethyloxalylglycine,DMOG)组(D组)和氧糖剥夺+低氧预处理+2-ME组(E组).给予低氧预处理及HIF-1α抑制剂和稳定剂后,对HBMVEC进行氧糖剥夺,使用Annexin V检测细胞凋亡和坏死;用ATP检测试剂盒测定细胞内ATP含量;采用Western blot法测定HIF-1α、SDHB蛋白表达.结果与A组比较,B组、C组、D组和E组HIF-1α表达水平明显升高,ATP含量明显减少,细胞凋亡率明显升高(P<0.05),B组、C组和E组SDHB表达水平明显降低(P<0.05);与B组比较,C组和D组HIF-1α和SDHB表达水平明显升高,ATP含量明显增加,细胞凋亡率明显降低(P<0.05).结论低氧预处理可通过调节HIF-1α表达改善氧糖剥夺所致的HBMVEC线粒体呼吸链复合体Ⅱ的损伤,发挥对氧糖剥夺HBMVEC模型的保护作用.
- 周璐璐刘玲玲姜连浩陈君孟春
- 关键词：氧糖剥夺人脑微血管内皮细胞低氧预处理低氧诱导因子-1Α
- 氢气对脓毒症小鼠肠组织Rho/ROCK信号通路的影响被引量：4
- 2015年
- 目的 评价氢气对脓毒症小鼠肠组织Ras同源基因（Rho）/Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶（ROCK）信号通路的影响.方法 雄性ICR小鼠64只,体重20～ 25 g,6周龄,采用随机数字表法,将其分为4组（n=16）：假手术组（SH组）、氢气组（H2组）、脓毒症组（S组）和脓毒症＋氢气组（S＋H2组）.采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制备脓毒症模型.于CLP术后1和6h时H2组和S＋H2组分别吸入2％氢气1h.于CLP术后20 h时取8只小鼠,向胃内灌注异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐（FITC-右旋糖酐）,4h后心脏穿刺取血样,测定血清FITC-右旋糖酐的浓度.于CLP术后24 h时取8只小鼠,取血液、肝脏、脾脏和肾脏进行细菌培养,观察菌群移位情况;取小肠组织,透射电镜下观察肠上皮细胞超微结构,光镜下观察肠组织病理学改变并进行评分,采用Western blot法测定肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达水平.结果 与SH组比较,S组和S＋H2组血清FITC-右旋糖酐浓度和肠损伤评分升高,血液、肝脏、脾脏和肾脏的菌群移位增加,肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达上调（P＜0.05）,H2组上述各指标差异无统计学意义（P＞0.05）;与S组比较,S＋H2组血清FITC-右旋糖酐浓度和肠损伤评分降低,血液、肝脏、脾脏和肾脏的菌群移位减少,肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达下调（P＜0.05）,肠组织病理学损伤减轻.结论 氢气减轻脓毒症小鼠肠损伤的机制与抑制Rho/ROCK信号通路激活有关.
- 张红涛于泳浩刘玲玲杨涛马小叶王国林
- 关键词：脓毒症RHO因子RHO相关激酶类肠损伤
- 维生素K_(2)对七氟烷致老龄小鼠认知功能降低的影响
- 2021年
- 目的评价维生素K_(2)对七氟烷致老龄小鼠认知功能降低的影响。方法SPF级健康雌性C57BL/6J小鼠72只,12月龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为4组(n=18):对照+玉米油组(Con+Oil组)、七氟烷+玉米油组(Sevo+Oil组)、对照+维生素K_(2)组(Con+K_(2)组)和七氟烷+维生素K_(2)组(Sevo+K_(2)组)。Sevo+Oil组和Sevo+K_(2)组小鼠给予2.5%七氟烷+33%氧气麻醉2 h。Con+Oil组和Con+K_(2)组小鼠只给予33%氧气处理。Con+Oil组和Sevo+Oil组小鼠在吸入氧气或七氟烷前30 min,腹腔注射玉米油100μl;Con+K_(2)组和Sevo+K_(2)组腹腔注射维生素K_(2)(溶于玉米油浓度为1 mg/ml)100 mg/kg。吸入七氟烷后24 h时每组随机取8只小鼠处死取海马组织,采用ELISA法测定ATP酶活性、IL-1β、IL-6和TNF-α的含量,采用Western blot法检测AT8和PHF1的表达;每组余10只小鼠进行标准化饲养,吸入七氟烷后1、3、5、7和14 d时采用Y迷宫实验检测认知功能。结果与Con+Oil组比较,Sevo+Oil组海马IL-1β、IL-6、TNF-α含量、AT8和PHF1表达水平升高,ATP酶活性降低,吸入七氟烷后1、3、5、7和14 d时自发交替百分比下降(P<0.05);与Sevo+Oil组比较,Sevo+K_(2)组海马IL-1β、IL-6、TNF-α含量、AT8和PHF1表达水平降低,ATP酶活性升高,麻醉结束后1、3、5、7和14 d时自发交替百分比升高(P<0.05);Con+K_(2)组与Sevo+K_(2)组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论维生素K_(2)可改善七氟烷致老龄小鼠认知功能降低,其机制与升高海马ATP酶活性,抑制AT8和PHF1表达上调有关。
- 王亚欣刘玲玲谢克亮陈君
- 关键词：维生素K2麻醉药吸入
