关崧
- 作品数：17 被引量：92H指数：6
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 复合培养对肺动脉平滑肌细胞周期的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨肺微血管内皮细胞 (L MVEC)与肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)复合培养时 LMVEC对 PASMC周期的影响。方法 L MVEC滤膜培养后 ,与 PASMC复合培养 ,采用流式细胞仪检测 PASMC周期的变化。结果 不同明胶浓度处理滤膜、不同种植密度相同、不同孵育时间处理滤膜对 LMVEC生长数量有明显的影响 ,但不同孔径滤膜对 LMVEC生长的影响无显著性差异。用 1‰明胶处理滤膜 ,1 0 5/cm2的种植密度及孵育 2 d即可获得较好效果。复合培养后 ,PASMC的 G1 期细胞数减少 ,S+G2 /M期细胞数增多 ,即促进细胞生长 ;使 LMVEC的 G1 期细胞数增多 ,S+G2 /M期细胞数减少 ,即抑制细胞生长。结论 复合培养后 ,促进 PASMC细胞生长 ,抑制 L MVEC细胞生长 ;但对两种细胞的凋亡影响不明显。
- 李淑萍于彬周德山白莉关崧
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞肺微血管内皮细胞周期
- 一氧化碳促进肺动脉平滑肌细胞血红素氧合酶基因的表达被引量：2
- 2002年
- 目的 :观察低浓度一氧化碳 (CO)和低氧处理肺动脉平滑肌细胞 (PASMC )后 ,血红素氧合酶 (HO)基因表达的状况。方法 :培养大鼠PASMC成功后并进行鉴定 ,应用免疫组织化学、逆转录聚合酶链式反应 (RT -PCR)和Westernblot的方法研究低浓度CO和低氧作用后PASMC的HOmRNA及HO蛋白质含量。结果 :①HO - 1抗体免疫组织化学染色低氧组细胞胞浆呈黄色 ,中等强度 ;CO处理组的细胞胞浆呈棕黄色 ,强阳性 ,比低氧组的颜色显著深。HO - 2抗体染色各组细胞胞浆均呈淡黄色 ,弱阳性。②低氧组细胞HO - 1mRNA的表达水平为 1.2 5± 0 .37,明显高于常氧组细胞 (0 .12± 0 .0 4 ) ;低浓度CO组细胞HO - 1mRNA的表达水平为 3.5 2± 0 .6 8显著高于低氧组。各组细胞HO - 2mRNA的水平无明显差异。③低氧 4 8h组细胞HO - 1的蛋白含量为 1.0 7± 0 .15 ,高于低氧 2 4h组细胞(0 .5 2± 0 .0 4 ) ;低浓度CO组细胞HO - 1的蛋白含量为 3.6 5± 0 .4 3,显著高于低氧组细胞 ,4 8h蛋白质含量为最高。结论 :低浓度CO和低氧处理PASMC ,可以促进HO - 1mRNA和蛋白质的表达 ,而HO - 1在细胞低氧损害中发挥调节作用 。
- 王关嵩钱桂生蔡文琴关崧
- 关键词：平滑肌细胞一氧化碳肺动脉血红素氧合酶逆转录聚合酶链式反应
- 血红素氧合酶1的结构和基因调控的研究进展被引量：9
- 2004年
- 陈琰刘素刚关崧
- 关键词：血红素氧合酶1基因调控生物学特性同工酶
- SOCS3基因转染对低氧条件下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨SOCS3基因对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)增殖的影响。方法 以脂质体为载体将pEFSOCS3和pSV2neo共转染至体外培养的PASMCs ,应用RT PCR和免疫细胞化学法测定转染前后细胞中SOCS3mRNA和蛋白表达。低氧处理PASMCs ,采用Westernblot法检测转染前后常氧 (N)、低氧 6h(H6)、低氧 12h(H12 )PASMCs中STAT3蛋白酪氨酸磷酸化水平变化 ;流式细胞仪、3 H TdR掺入法检测转染前后各时相点细胞增殖情况。结果 RT PCR和免疫细胞化学证实转染后细胞中有SOCS3mRNA和蛋白稳定表达 ;与同时相对照组 (包括未转染组和转染空载体组 )相比 ,SOCS3基因转染组细胞中STAT3蛋白酪氨酸磷酸化水平显著下降 (P <0 0 1) ;流式细胞仪分析显示SOCS3基因转染组细胞各时相点G0 /G1期细胞比例显著增多 (P <0 0 1) ,S +G2 /M期细胞比例显著减少 (P <0 0 1) ;SOCS3基因转染组细胞在常氧和低氧条件下 3 H TdR掺入量显著低于同时相点对照组细胞 (P <0 0 1)。结论 SOCS3蛋白可能通过降低STAT3酪氨酸磷酸化水平抑制PASMCs增殖。
- 白莉余祖滨钱桂生李淑萍关崧
- 关键词：低氧信号传导肺动脉平滑肌细胞
- 肺微血管内皮细胞系的建立及脂多糖作用后酪氨酸激酶受体活性的变化被引量：21
- 2003年
- 目的 研究肺微血管内皮细胞 (LMVEC)系培养方法并探讨脂多糖 (LPS)对LMVEC酪氨酸激酶受体 (TKR)活性的作用。方法 贴块法培养大鼠LMVEC ,并进行系列鉴定。采用放射免疫技术检测正常组、LPS(1μg ml)作用 2、8、16h组的TKR活性的变化水平。结果 获得的LMVEC具有规律的鹅卵石形态 ,对异植物血凝素结合试验及CD3 1相关抗原免疫组化染色为阳性。LPS(1μg ml)作用 2h组LMVEC的TKR活性升高 ,8h组达最高 ,16h组的表达量低于 8h组 ,与正常组比较均有明显差别 (P <0 0 5 )。结论 脂多糖 (LPS)作用后LMVEC胞浆TKR活性升高 ,而胞膜TKR活性降低。提示在LPS所致的急性肺损伤等发病机制中TKR及其相关的信号途径可能发挥重要调节作用。
- 王关嵩蔡文琴钱桂生关崧
- 关键词：脂多糖肺微血管内皮细胞酪氨酸激酶受体放射免疫法
- 低氧刺激复合培养的平滑肌细胞表达Janus激酶被引量：6
- 2003年
- 目的 研究低氧对复合培养的平滑肌细胞中Janus激酶 (JAK)基因表达的作用。方法 鼠肺微血管内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞复合培养 ,采用半定量RT PCR技术检测常氧组、低氧 2、6、12h组的JAK1、JAK2和JAK3基因的表达水平 ,并对PCR产物进行测序。结果 低氧复合培养 2h组肺动脉平滑肌细胞中JAK1、JAK2、JAK3mRNA表达水平升高 ,在低氧 6h组达最高 ,与正常组比较均有明显差别。低氧 12h组的表达量低于 6h组 ,但高于正常组。RT PCR产物直接测序证实扩增产物片断与Genebank中相应序列相同。结论 低氧增强复合培养的肺动脉平滑肌细胞中JAK基因的表达 ,而JAK基因在低氧所致的肺动脉收缩和低氧肺动脉高压的信号转导中可能发挥重要作用。
- 王关嵩蔡文琴钱桂生周德山关崧
- 关键词：低氧肺动脉平滑肌细胞JANUS激酶
- 大鼠肺动脉平滑肌细胞信号转导及转录激活因子亚型Ⅱ基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2003年
- 目的 克隆大鼠肺动脉平滑肌细胞信号传导与转录活化因子亚型Ⅱ基因 (STAT2 )并对此序列进行同源性分析。方法 单纯胶原酶法培养大鼠肺动脉平滑肌细胞 ,采用RT PCR克隆大鼠肺动脉平滑肌细胞信号传导与转录活化因子亚型Ⅱ基因 (STAT2 )cDNA编码序列 ,应用PCR、四色荧光和双脱氧终止法测序 ;并对克隆序列进行同源性分析。结果 应用RT PCR克隆出大鼠肺动脉平滑肌细胞STAT2cDNA编码序列。大鼠肺动脉平滑肌细胞STAT2cDNA编码序列与Gen bank中小鼠STAT2cDNA相应序列具有高度同源性。结论 正常培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞表达信号传导与转录活化因子亚型Ⅱ基因 (STAT2 )。
- 王关嵩钱桂生蔡文琴周德山关崧
- 关键词：RT-PCR肺动脉平滑肌细胞血管性疾病
- 低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞表达信号转导及转录激活因子基因表达的影响被引量：3
- 2003年
- 目的 研究低氧对肺动脉平滑肌细胞中信号转导及转录激活因子 (STATs)基因表达的影响。方法 低氧处理培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞 ,采用半定量RT PCR方法检测常氧组、低氧 2、6、12h组的STAT3和STAT5基因的表达水平。结果 低氧培养 2h组肺动脉平滑肌细胞中STAT3、STAT5mRNA表达水平升高 ,在低氧 6h组达最高 ,与正常组比较均有明显差别。低氧 12h组的表达量低于 6h组 ,但高于正常组。结论 低氧增强培养的肺动脉平滑肌细胞中STATs基因的表达 。
- 钱频王关嵩蒙伟宗关崧陈维中
- 关键词：低氧肺动脉平滑肌细胞基因表达RT-PCR
- 脂多糖对复合培养的微血管内皮细胞Janus激酶表达的影响被引量：2
- 2003年
- 目的 研究脂多糖 (Lipopolysaccharide ,LPS)对复合培养的微血管内皮细胞中Janus激酶 (Januskinase ,JAK)基因表达的影响。方法 与肺动脉平滑肌细胞复合培养鼠肺微血管内皮细胞 ,采用半定量RT PCR技术检测正常组、LPS2、8、16h组的JAK2和TYK2基因的表达水平。结果 LPS复合培养 2h组肺微血管内皮细胞中JAK2mRNA表达水平升高 ,在LPS 8h组达最高 ,与正常组比较均有明显差别。在正常组和LPS刺激组均未见肺微血管内皮细胞表达TYK2基因。结论 肺微血管内皮细胞不表达TYK2基因 ;
- 王关嵩钱桂生周元国关崧陈维中
- 关键词：脂多糖肺微血管内皮细胞JANUS激酶
- 大鼠肺动脉平滑肌细胞缺氧后STAT3活性变化对细胞癌基因c-jun mRNA表达及细胞增殖的影响被引量：1
- 2005年
- 目的 观察大鼠肺动脉平滑肌细胞缺氧后信号转导和转录活化因子3 (STAT3 )活性变化对细胞癌基因c junmRNA表达及细胞增殖的影响。方法 组织块法原代培养肺动脉平滑肌细胞(PASMCs) ,用AG490预孵育后进行缺氧处理,Westernblot检测缺氧2、4、6、8、12h组STAT3酪氨酸活性水平变化;半定量RT PCR检测缺氧2、4、6、8、12h组细胞中c junmRNA表达水平变化;流式细胞仪检测细胞周期变化。结果 Westernblot定量分析示缺氧培养6h组STAT3酪氨酸磷酸化水平升高,12h组达高峰;缺氧2h细胞c junmRNA表达升高,6h达高峰,8h下降;细胞在缺氧6h出现G0 G1 期细胞比例明显减少,S +G2 M期细胞比例明显增加,并随缺氧时间延长变化更显著。与对照组细胞相比,AG490处理组细胞在缺氧各时相点STAT3酪氨酸磷酸化水平及c junmRNA表达明显降低,同时G0 G1 期细胞比例显著增加,S +G2 M期细胞比例显著减少。结论 ①STAT3活化和c junmRNA表达增加参与缺氧PASMCs增殖;②AG490可通过抑制STAT3活性下调c junmRNA表达,从而抑制缺氧诱导的PASMCs增殖。
- 白莉余祖滨钱频钱桂生关崧
- 关键词：缺氧肺动脉平滑肌细胞细胞癌基因
