侯艳艳
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：郑州大学第三附属医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐血源性神经干细胞中Nestin基因的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的探讨人脐血单个核细胞(UBC-MNCs)体外定向诱导分化为神经干细胞(NSCs)的可行性,观察NSCs中Nestin基因mRNA的表达情况。方法采用密度梯度离心法从人脐血中分离出UBC-MNCs,用含人表皮细胞生长因子(hEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和B27因子的Neurobasal培养基联合诱导其向NSCs方向分化,观察NSCs增殖分化及形态学特点;免疫组织化学法检测培养细胞中神经细胞标志抗原巢蛋白Nestin、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况;RT-PCR法检测诱导前后培养细胞中NestinmRNA的表达变化。结果 UBC-MNCs可定向诱导分化为神经元样细胞,形成典型NSCs克隆团,表达Nestin、NSE、GFAP标记抗原蛋白,诱导前细胞Nestin、NSE、GFAP的表达均非常低,诱导6d时Nestin阳性细胞数达高峰,然后开始下降,NSE、GFAP阳性细胞数逐渐增高。Brdu标记靶细胞阳性率达90%。Nestin mRNA在诱导前细胞中低表达,诱导3d、6d、9d、12d时表达逐渐升高(P<0.05)。结论体外诱导培养可获得UBC-MNCs源性NSCs,Nestin基因是NSCs增殖分化的关键调控因子,在UBC-MNCs诱导分化后表达明显增强。脐血能够成为NSCs的新来源。
- 陈海王军范亚珍朱登纳吴值荣侯艳艳
- 关键词：NESTIN脐血神经干细胞诱导分化
- 神经干细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织Foxgl基因表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的观察脐血源性神经干细胞（NSCs）移植对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠脑组织海马齿状回颗粒细胞下层（SGZ）Foxgl基因表达的影响。方法采用密度梯度离心法分离脐血单个核细胞，进行定向诱导培养，并通过免疫细胞化学法鉴定培养细胞表达神经干细胞表面标志。将7日龄SD大鼠150只随机分为假手术组、HIBD组和NSCs组，HIBD组和NSCs组分离并永久性结扎左侧颈总动脉，假手术组只分离不结扎左侧颈总动脉，也不进行缺氧，NSCs组于造模24h后经大鼠尾静脉行脐血源性神经干细胞移植，3组大鼠分别于造模后第3、7、14、21、28天共5个时间点取材，每个时间点各取10只大鼠，应用原位杂交法检测各组大鼠SGZFoxgl基因HIBD后各时间点的表达水平。
- 尚凤伟王军侯艳艳朱登纳范亚珍王俊辉张贞焕
- 关键词：缺氧缺血性脑损伤神经干细胞新生大鼠
- 脐血单个核细胞诱导的神经干细胞中Foxg1和Nestin基因的表达及其相互关系被引量：6
- 2010年
- 目的探讨人脐血单个核细胞(UBC-MNCs)体外分离培养和定向诱导分化为神经干细胞(NSCs)的机制,观察培养细胞增殖分化情况,检测NSCs中Foxg1和Nestin基因mRNA的表达情况及相互关系。方法从脐血中分离出UBC-MNCs,用含人表皮细胞生长因子(hEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和B27因子的Neurobasal培养基联合诱导其向NSCs方向分化,观察NSCs增殖分化及形态学特点;免疫组织化学法检测培养细胞中神经细胞标志抗原巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)标记靶细胞,并测定增殖指数;RT-PCR法检测诱导前、培养3d、6d、9d、12d细胞中Foxg1和Nestin基因mRNA的表达变化。结果 UBC-MNCs可定向诱导分化为神经元样细胞,表达Nestin、NSE、GFAP标记抗原。Brdu标记细胞阳性率达90%。Foxg1mRNA在诱导前细胞中低表达,诱导后逐渐升高(P<0.05),6d达高峰,后逐渐下降(P<0.05);NestinmRNA表达逐渐升高(P<0.05)。结论体外诱导培养可获得UBC-MNCs源性NSCs,表达神经细胞特异性标志物Nestin、NSE和GFAP蛋白,Foxg1和Nestin基因表达明显增强,是NSCs增殖分化的关键调控因子。脐血能够成为NSCs的新来源。
- 王军范亚珍陈海朱登纳吴值荣侯艳艳
- 关键词：NESTIN脐血神经干细胞细胞培养诱导分化
- 脐血单个核细胞体外向神经干细胞的诱导及Foxg1基因的表达被引量：6
- 2010年
- 目的探讨人脐血单个核细胞(UBC-MNCs)体外向神经干细胞(NSCs)的诱导分化机制及NSCs中Foxg1基因表达的意义。方法从脐血中分离出UBC-MNCs,用含hEGF、bFGF和B27因子的Neurobasal培养基联合诱导其向NSCs方向分化,观察NSCs形态学及增殖分化特点;免疫组化法检测培养细胞中神经细胞标志抗原Nestin、NSE、GFAP的表达情况,BrdU标记靶细胞;RT-PCR法检测分离后、培养3、6、9、12 d细胞中Foxg1基因的表达。结果UBC-MNCs可定向诱导分化为神经元样细胞,表达Nestin、NSE、GFAP标记抗原。Foxg1 mRNA在诱导前细胞中低表达,诱导后逐渐升高(P<0.05),6 d达高峰,之后逐渐下降(P<0.05)。结论体外定向诱导培养可获得UBC-MNCs源性NSCs,Foxg1基因是NSCs增殖分化关键调控因子,脐血可成为NSCs的新来源。
- 范亚珍王军陈海朱登纳吴值荣侯艳艳
- 关键词：脐血神经干细胞细胞培养诱导分化
- 人胰岛素样生长因子1基因质粒载体的构建及其在人脐血源性神经干细胞中的表达被引量：2
- 2011年
- 目的构建人胰岛素样生长因子1(IGF-1)质粒表达载体,并观察重组体pcDNA3.1-IGF-1转染后的脐血源性神经干细胞(NSCs)中IGF-1基因的表达情况。方法通过反转录-PCR(RT-PCR)方法从胎肝中提取IGF-1基因,胶回收方法分别纯化PCR产物(IGF-1基因)和质粒pcDNA3.1,二者分别由DNA限制性内切酶BamHⅠ与HindⅢ双酶切后,经T4 DNA Ligase连接的方法将IGF-1基因克隆到质粒表达载体pcDNA3.1中,采用测序方法及DNA限制性内切酶BamHⅠ与HindⅢ双酶切方法鉴定重组质粒,脂质体转染法将重组体pcDNA3.1-IGF-1及空质粒pcDNA3.1分别转染至脐血源性NSCs内,经G418抗性筛选后,利用免疫细胞化学法和RT-PCR法检测IGF-1基因在基因转染脐血源性NSCs内的表达情况。结果 IGF-1基因从胎肝中成功提取。重组体pcD-NA3.1-IGF-1经基因测序及DNA限制性内切酶BamHⅠ与HindⅢ双酶切证实质粒表达载体pcDNA3.1-IGF-1构建正确。重组体经脂质体法转染脐血源性NSCs24 h后,经G418筛选2周得到细胞抗性克隆,免疫细胞化学法检测到IGF-1基因在重组质粒表达载体pcDNA3.1-IGF-1转染的脐血源性NSCs中成功表达。RT-PCR方法检测到重组质粒pcDNA3.1-IGF-1转染的脐血源性NSCs中IGF-1mRNA表达阳性,而空质粒pcDNA3.1转染的脐血源性NSCs中IGF-1 mRNA表达阴性。结论 IGF-1基因可在重组质粒表达载体pcDNA3.1-IGF-1转染的脐血源性NSCs内成功表达。
- 王军吴值荣朱登纳高峰侯艳艳陈海王留霞
- 关键词：人胰岛素样生长因子1转染脐血神经干细胞
- 缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑室管膜下区Foxg1与p21基因的表达及其关系被引量：2
- 2011年
- 目的观察缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑室管膜下区Foxg1基因与p21基因表达的动态变化,探讨二者的相互关系。方法采用R ice法制作新生大鼠HIBD动物模型,假手术组作为对照,分别在术后第3、7、14、21、28天处死,取其左侧大脑半球,应用原位杂交法测定HIBD模型组与对照组新生大鼠Foxg1基因与p21基因在脑室管膜下区(SVZ)不同时间点表达水平。结果 1.HIBD后SVZ区Foxg1基因3 d时与假手术组比较已明显升高(P<0.05),7 d时表达达高峰,此后逐渐下降,各时间点表达水平均较假手术组高(Pa<0.05),假手术组各时间点Foxg1表达水平变化不大。2.HIBD后p21基因3 d时表达较假手术组明显升高(P<0.05),7 d时表达水平最低,此后又逐渐升高,各时间点表达水平均较假手术组高(Pa<0.05),假手术组也有升高趋势。3.二组p21基因与Foxg1基因均呈负相关。结论 HIBD可以促进新生大鼠脑组织SVZ区Foxg1基因表达,HIBD后SVZ区细胞凋亡增加,p21基因表达上调。Foxg1基因可能是p21基因的上游调节基因。
- 王军侯艳艳朱登纳吴值荣范亚珍陈海熊华春王留霞
- 关键词：缺血缺氧性脑损伤P21基因
- 脐血源性神经干细胞移植对HIBD新生大鼠的治疗作用研究
- 目的探讨人脐血源性神经干细胞（NSCs）移植治疗缺血缺氧性脑损伤（HIBD）新生大鼠的可行性及机制。方法 7d龄大鼠随机分成正常对照组、HIBD模型对照组、NSCs移植组,每组40只。从人脐血中分离出单个核细胞（UBC-...
- 朱登纳王军范亚珍陈海牛国辉吴值荣侯艳艳
- 关键词：神经干细胞细胞移植缺血缺氧性脑损伤新生大鼠
- 文献传递
