严学倩
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人IL-3基因原核表达载体的构建及表达
- 2011年
- 目的:构建人IL-3基因原核表达载体pET32a-IL-3,并在大肠杆菌中诱导表达。方法:通过佛波酯(TPA)和植物球血凝素(PHA)刺激人T淋巴细胞系Jurkat细胞,增加IL-3mRNA表达水平,提取mRNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得cDNA,以Jurkat细胞cDNA为模板,通过PCR方法扩增得到人IL-3基因,将其克隆入原核表达载体pET32a(+)中,将重组质粒转化入大肠杆菌宿主菌株BL21中,以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白表达,并通过改变IPTG浓度,诱导时间,诱导温度等条件最终实现蛋白的可溶性表达。表达产物用SDS-PAGE检测表达情况。结果:酶切鉴定和测序结果证明成功构建了原核表达载体pET32a-IL-3。SDS-PAGE检测结果证明实现了人IL-3基因在大肠杆菌中的可溶性表达。结论:成功构建了人IL-3基因的原核表达载体并在大肠杆菌中获得了良好的表达。
- 严学倩尹郸丹付伟韩骅梁英民
- 关键词：白细胞介素3造血干细胞原核表达
- LIM结构域蛋白FHL1C抑制Notch信号途径的转录激活研究被引量：1
- 2011年
- 目的:克隆人表达FHL1C基因以及建立真核表达载体和慢病毒载体。方法:从人的骨骼肌细胞来源的cDNA中扩增并克隆人FHL1C基因的编码区,连接至pMD-18T载体酶切鉴定后测序。序列测定确认后,双酶切pMD18T-FHL1C回收片段,插入真核表达载体,构建真核表达载体pCMV-Myc-FHL1C酶切鉴定正确后,转染Hela细胞及Cos7细胞,用Western Blot检测其在转染细胞中的表达,用双荧光素报告基因系统检测其对Notch信号作用。构建FHL1C-IRES-GFP表达单元,建立慢病毒表达载体plen-ti6/V5-FHL1C-IRES-GFP,包装慢病毒后感染培养的细胞,用免疫荧光显微镜、Western Blot检测分析其在被感染的细胞中的表达。结果:通过PCR方法成功扩增了人FHL1C基因的编码区。通过转染Hela及Cos7细胞,使用Western Blot检测其蛋白水平表达,双荧光报告基因系统分析均能够下调激活的Notch信号。成功构建了FHL1C慢病毒表达载体pLenti6/V5-FHL1C-IRES-GFP,包装慢病毒,把获取的慢病毒感染细胞后通过荧光显微镜证实被感染的细胞绿色荧光蛋白正确表达,Western Blot检测证实其表达。结论:成功建立起FHL1C真核表达载体及慢病毒表达系统,为研究急性T淋巴细胞白血病与Notch信号转导通路之间的关系奠定了基础。
- 付伟秦鸿雁严学倩于恒超韩骅梁英民
- 关键词：急性T淋巴细胞白血病慢病毒NOTCH信号途径
- 8p11骨髓增殖综合征1例并文献回顾
- 2015年
- 8p11骨髓增殖综合征(8p11 myeloproliferative syndrome,EMS)是一组以白细胞计数明显增高、髓系细胞增生、嗜酸性粒细胞增多、淋巴瘤为特征的临床综合征。分子生物学定义是定位于8号染色体短臂(8p11-12)上的成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)基因与伙伴基因易位或插入而产生的侵袭性肿瘤。2008年WHO将本病定义为髓系、淋系肿瘤伴有成纤维细胞生长因子受体1异常。目前共发现14种与FGFR1重排相关的伙伴基因,其中最常见的是位于13q11-12上的ZNF198。EMS预后差,患者常在短期内迅速进展为急性髓系白血病,目前只有异基因造血干细胞移植能有效控制该病。现报告我科诊断的1例EMS病例,并就其分子生物学特征、发病机制和治疗等的研究现状进行讨论。
- 肖方陈任安王文清黄斯勇严学倩王萌王颖刘利
- 关键词：病例报告
- 顺应现代医学模式转变 加强医学生医患沟通能力培养被引量：4
- 2016年
- 当今社会，医患关系处于日趋紧张的状态，相关部门数据显示，2014年全国发生医疗纠纷11.5万起，而究其原因，有社会舆论导向、医生本身、患者等诸多方面的综合因素。但任何问题的产生均具有两面性，其中一个重要的原因是医患之间缺乏良好的沟通，产生误解，造成患者对医生的不信任，并将这种不良情绪不断放大，最终导致医患纠纷，甚至上演恶性事件。因此，良好的沟通能力是诊断、治疗、治愈疾病的基础。在新形势下，仅拥有课本知识并不能成为一个优秀医生。医患沟通能力是一种核心的临床能力，是缓解医患矛盾、构建和谐医患关系不可或缺的关键要素，因此医学生医患沟通能力的培养已成为我国众多医学院校关注的焦点和重要的教学任务。
- 刘利陈任安张静宜李国辉肖芳严学倩
- 关键词：医患沟通能力现代医学模式转变医学生和谐医患关系舆论导向
- 异基因造血干细胞移植后血浆microRNA的表达与急性移植物抗宿主病的相关性研究被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨血浆microRNA(miRNA)在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)与未发生a GVHD(non-a GVHD)患者的表达情况。方法:采用实时定量PCR(real-time PCR)的方法检测25例患者allo-HSCT移植前和移植后外周血血浆中miR-423,miR199a-3p,miR-93*和miR-377的表达水平。结果:miR-423,miR199a-3p,miR-93*在a GVHD患者中的表达量较未发生a GVHD的患者高(P<0.05),而miR-377在两组之间表达无统计学差异(P=0.0818)。结论:异基因造血干细胞移植后发生a GVHD患者的血浆中miR-423,miR199a-3p,miR-93*表达增高,这可作为为监测和诊断a GVHD的生物标志物。
- 胡彬付伟黄斯勇高晓彤李丹慧严学倩张阳萍刘强刘利梁英民
- 关键词：异基因造血干细胞移植急性移植物抗宿主病
- 供者型CIK细胞输注对清除异基因造血干细胞移植后微小残留病灶的疗效被引量：1
- 2016年
- 目的观察供者型细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killer,CIK）细胞免疫治疗对异基因造血干细胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT）后微小残留病灶（minimal residual disease,MRD）清除的疗效。方法回顾性分析我科2012年11月至2015年11月间的10例恶性血液病患者,其中急性淋巴细胞白血病5例,急性髓性白血病4例,慢性粒单细胞白血病1例。在allo-HSCT后出现分子生物学复发（7例）以及形态学复发（3例）后经减停免疫抑制剂、化疗、供者淋巴细胞输注等治疗后形态学缓解,但MRD仍阳性的患者,给予供者型CIK细胞输注治疗,分析其疗效。结果输注供者型CIK中位次数3（2~8）次。1例输注2次无效,最终血液学复发死亡;9例患者MRD转阴,其中1例输注10个月后再次复发死亡,1例因减停免疫抑制剂出现重度移植物抗宿主病死亡,另7例患者无病存活。输注CIK后中位随访时间为10（3~14）个月,中位生存时间8（3~14）个月,中位无病生存时间8（0~14）个月,其中5例患者输注CIK后无病生存时间长于移植后无病生存时间。结论供者型CIK细胞输注治疗对allo-HSCT后复发的患者可使其再次达到分子生物学缓解,减少血液学复发,提高造血干细胞移植疗效,且不良反应小。
- 肖方刘强郭欢绪严学倩赵辉刘利
- 关键词：造血干细胞移植微小残留病灶
