黄斯勇
- 作品数：39 被引量：61H指数：5
- 供职机构：西安高新医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人Delta-like 1蛋白的表达及其对动员外周血CD34^+细胞的扩增作用被引量：1
- 2010年
- 构建pET32a(+)-hDll1DSL原核表达载体,表达、纯化hDll1DSL蛋白,观察其对动员外周血CD34+细胞的体外扩增作用。克隆hDll1DSL,构建pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体。转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,镍珠亲合层析纯化蛋白。RBP-j报告基因实验及Notch下游分子Hes1检测证实hDll1DSL活性。磁珠分选动员外周血CD34+细胞,加入hDll1DSL或联合SCF、FL、TPO孵育一周,观察体外扩增作用。结果表明:成功克隆hDll1DSL,并构建了pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体。在大肠杆菌BL21成功表达Trx-hDll1DSL融合蛋白,经镍珠亲合层析纯化蛋白,成功获得高纯度的Trx-hDll1DSL融合蛋白。配体活性实验显示,可溶性的Trx-hDll1DSL蛋白可以激活RBP-j报告基因,并且能上调Notch下游分子Hes1的表达,证明其能够激活Notch信号通路。此外,Trx-hDll1DSL融合蛋白与SCF、FL及TPO联用,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用。我们成功构建了pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体,表达、纯化了具有生物学活性的Trx-hDll1DSL融合蛋白,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用,为造血干/祖细胞体外扩增体系的优化研究奠定了基础。
- 刘强郑瑾何飞李国辉黄斯勇郝淼旺梁英民
- 关键词：外周血CD34+细胞扩增作用细胞体外原核表达载体
- 供者外周血干细胞动员采集198例临床分析被引量：1
- 2011年
- 目的研究外周血造血干细胞移植（PBSCT）供者外周血干细胞动员采集的方法及其效果。方法198名健康供者每天皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）（5—10）ug／kg进行外周血干细胞动员，第5天开始采集。采用血细胞分析仪行单个核细胞（MNC）计数，流式细胞术（FCM）行CD34＋细胞计数。分析供者性别、身高、年龄、采集当天外周血白细胞（WBC）计数对动员采集效果的影响。结果所有供者均成功动员采集，采集当天的MNC计数平均为（4．19±1．96）×10^8／kg，CD34＋细胞计数平均为（2．98±1．40）×10^6／kg；MNC和CD34＋细胞计数与供者性别、身高、年龄无关；采集当天外周血WBC计数与MNC、CD五细胞计数呈正相关（r=0．9201，P=0．0035；r=0．8420，P=0．0149）；采集当天外周血WBC计数≥20．0×10^9／L的供者比〈20．0×10^9／L的供者采集效果更显著（F=4．688，P=0．0013；F=4．622，P=0．0006）。结论rhG-CSF动员的健康供者采集当天外周血WBC计数是一项预测CD34＋胞采集数量的简单、可行的指标。
- 黄斯勇刘利郝淼旺何华谷真陈任安秦炜炜伍艳兰李国辉尹郸丹梁英民
- 关键词：造血干细胞移植造血干细胞动员
- 人Delta-like4ext-93-217原核表达、纯化及蛋白活性检测
- ＜正＞目的:原核表达、纯化融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217,并对其活性进行检测。方法:采用PCR方法扩增hDll4ext-93-217多核苷酸序列,克隆入pMD18T载体。测序正确后,将其亚克隆入
- 伍艳兰黄斯勇牛晓丽张丽陈茹菲何飞张萍梁英民刘利
- 文献传递
- 序贯诱导治疗急性早幼粒细胞白血病长期生存分析
- 目的：观察全反式维甲酸(ATRA)及LD-HA方案序贯诱导治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的远期疗效。方法：1990年1月至2011年6月我科收住的确诊APL患者133例，给予ATRA诱导治疗，当WBC≥10×109/...
- 郝淼旺李国辉刘利刘强陈任安尹郸丹王文清黄斯勇张静宜梁英民
- 关键词：全反式维甲酸急性早幼粒细胞白血病临床疗效
- 文献传递
- 分析10例成人Ph染色体和/或BCR－ABL阳性混合表型急性白血病的临床及实验室特征
- 2016年
- 目的 总结成人Ph染色体和/或BCR－ABL阳性混合表型急性白血病(Ph＋MPAL)的临床及实验室特征.方法 对１０例Ph＋MPAL患者临床资料进行回顾性分析.结果 Ph＋MPAL患者检出率为１５??３８％,白细胞计数增高.１０例患者均为髓系和B淋系混合表达.７例患者为CD３４高９例可检测到Ph染色体.１０例患者均有BCR－ABL基因融合.治疗后完全缓解患者有７例.结论 Ph＋MPAL患者多表现为髓系和淋系混合表达,在临床治疗过程中,应兼顾淋系和髓系的联合化疗方案,联合应用造血干细胞移植,以提高临床治疗效果.
- 黄斯勇伍艳兰王颖胡彬李国辉刘利梁英民
- 关键词：PH染色体BCR-ABL
- 噬血细胞综合征30例临床分析被引量：8
- 2011年
- 目的:探讨噬血细胞综合征(HPS)的临床特点、诊断、治疗以及预后的危险因素。方法:对我院30例HPS患者的病因、临床表现、实验室检查指标、治疗方案及临床转归进行回顾性分析。结果:30例HPS病因以感染最多见(30%),其中EB病毒感染达20%,然而病因不明者也高达56.7%。HPS临床表现为持续高热(100%)、脾肿大(93.3%)、全血细胞减少(83.3%)、乳酸脱氢酶(100%)及血清铁蛋白(100%)升高。肝功能损害(90%)及心肌酶谱(60%)升高也较为常见。30例经治HPS患者30d、100d、1年的生存率分别为36.7%、23.3%、10.0%。其中7例给予包含VP16的化疗方案,30d、100d、1年的生存率分别为85.1%、71.4%、42.9%。结论:HPS可由多种病因所致,EB病毒最为常见,临床表现多样。发热、血清铁蛋白、乳酸脱氢酶升高在诊断中的灵敏度较高。包含VP16的化疗方案是有效的治疗方案。
- 李国辉范玉贞郝淼旺黄斯勇刘利杨健梁英民
- 关键词：噬血细胞综合征依托泊苷预后
- 急性淋巴细胞白血病患者血清乳酸脱氢酶和维生素D水平与其预后的关系被引量：11
- 2017年
- 目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者血清乳酸脱氢酶(LDH)和维生素D水平与其预后的关系。方法选取成人初治ALL患者63例为ALL组,行大剂量甲氨蝶呤治疗并随访至少1年。并以同期健康查体志愿者30例为对照组。检测比较两组血清LDH和25-羟维生素D[25(OH)D]水平及同期急性生理和慢性健康评分(APACHEⅡ评分)。统计ALL组随访1年的生存预后。分析ALL患者血清LDH和25(OH)D水平与其APACHEⅡ评分及1年生存率的关系及其预测1年生存预后的价值。结果与对照组比较,ALL组治疗前血清LDH水平和APACHEⅡ评分升高而血清25(OH)D水平则降低(P<0.05)。与治疗前比较,ALL组治疗后3d和治疗后1个月的血清LDH水平和APACHEⅡ评分降低而血清25(OH)D水平则升高(P<0.05)。ALL组1年生存率为80.95%。与ALL组存活患者比较,ALL组死亡患者治疗前后的血清LDH水平和APACHEⅡ评分升高而血清25(OH)D水平则降低(P<0.05)。Spearman无条件相关分析结果显示,ALL患者血清LDH水平与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.868,P<0.05)而与1年生存率呈负相关(r=-0.892,P<0.05),其血清25(OH)D水平与APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.705,P<0.05)而与1年生存率呈正相关(r=0.826,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,ALL患者治疗前、治疗后3d和治疗后1个月的血清LDH和25(OH)D水平联合预测其1年生存预后的准确性分别为88.89%、95.24%和98.41%。结论 ALL患者血清LDH和25(OH)D水平与病情相关且联合预测患者预后的价值良好,可能作为ALL患者病情和预后评估的参考指标。
- 吴必嘉龚峻梅陈娟娟郭天剑方明黄斯勇
- 关键词：急性淋巴细胞白血病乳酸脱氢酶预后
- 双次自体造血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤疗效观察
- 目的：评价自体造血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤的临床疗效及安全性.方法：回顾性分析2001年3月至2011年12月唐都医院行APBSCT的非霍奇金淋巴瘤76例患者的资料,包括B细胞淋巴瘤48例,T细胞淋巴瘤28例,其中行...
- 梁英民刘利郝淼旺黄斯勇刘强陈任安
- 关键词：非霍奇金淋巴瘤
- 融合蛋白TRX-hJagged1原核表达载体的构建及其在BL21中的表达
- 2014年
- 本研究旨在构建原核表达载体并原核表达Notch配体Jagged1。构建不同长度但均包含DSL区的原核表达载体pET-hJagged1,将构建重组原核表达载体pET-hJagged1转化大肠杆菌BL21后,予以IPTG诱导,优化诱导条件,使目的蛋白TRX-hJagged1在上清中有较大量表达。诱导工程菌并以镍柱纯化对可溶性的目的蛋白进行纯化。结果表明,成功构建了原核表达载体pET-hJagged1(BglⅡ)、pET-hJagged1(HindⅠ)及pET-hJagged1(StuⅠ),但仅pET-hJagged1(StuⅠ)表达可溶性的TRX-hJagged1。通过镍柱纯化获得了较单一的TRX-Jagged1蛋白,Western Blot证实了其为目的蛋白。结论:成功地构建了原核表达载体pET-hJagged1,并在原核表达系统表达了TRX-Jagged1融合蛋白,为进一步研究Jagged1在淋巴造血系统中的作用奠定了基础。
- 李国辉范玉贞黄斯勇刘强尹郸丹刘利陈任安郝淼旺梁英民
- 关键词：NOTCHJAGGED1融合蛋白原核表达
- Notch信号途径对放疗后骨髓谱系造血重建的影响及其机制被引量：3
- 2018年
- 目的探讨Notch信号途径对放疗后骨髓谱系造血重建的影响及其机制。方法通过交配获得骨髓造血细胞特异性敲除Notch信号MxCre^+RBP-J^(flox/flox)的双转基因小鼠(敲除组)和未敲除MxCre^+RBP-J^(flox/+)对照小鼠(未敲除组),给予全身一次性^(60)Co-γ射线电离辐照,观察辐照后第7天两组生存状态、造血重建情况。C57/B6小鼠接受全身一次性^(60)Co-γ射线电离辐照,通过腹腔注射Notch配体重组蛋白D1R或PBS分别建立Notch信号激活小鼠(激活组)和未激活小鼠(未激活组),观察给药第7天重组蛋白D1R的体内活性、两组造血重建情况以及髓系前体细胞周期、增殖信号通路变化。另取C57/B6小鼠随机分为阴性对照组、D1R组、阳性对照组,D1R组和阳性对照组同时接受等剂量^(60)Co-γ射线电离辐照后腹腔注射D1R和PBS,阴性对照组不予处理,停药3个月,观察重组蛋白D1R长期毒性。结果与未敲除组比较,敲除组生存状态更差,骨髓造血干/祖细胞、骨髓和外周血有核细胞及髓系细胞形态正常,但数量明显减少(P均<0.05)。与未激活组比较,激活组骨髓造血细胞Notch信号活化片段ICN1的核表达增多,Notch信号激活,骨髓造血干/祖细胞、骨髓和外周血有核细胞及髓系细胞数均明显高于对照组(P均<0.05),骨髓髓系前体细胞G_0/G_1期比例减少,S期比例增多,PI3K蛋白表达增加(P均<0.01)。停药3个月,D1R组细胞形态、组织构架及造血谱系与阴性对照组无明显差别,但骨髓造血干/祖细胞、骨髓和外周血髓系细胞数明显高于阳性对照组(P均<0.05)。结论 Notch信号途径可正向调控放疗后造血重建,尤其髓系重塑,其机制可能与Notch信号激活髓系前体细胞PI3K增殖信号通路、加快细胞周期进程有关。
- 陈娟娟周思朗夏鸳鸯赵永星陈永乐黄斯勇吴必嘉
- 关键词：NOTCH信号途径磷脂酰肌醇3-激酶
