高梅
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- hClock-（35-47）_Bax-（55-77）融合蛋白的原核表达
- 目的:hClock-(35-47)为人类节律基因Clock的DNA结合结构域，对细胞膜和血脑屏障具有穿膜作用。Bcl-2和Bax分别是Bcl-2家族中最主要的抑制凋亡和促进凋亡蛋白。在多数肿瘤中，Bcl-2表达水平升高，...
- 高梅
- 关键词：原核表达融合蛋白节律基因基因工程抗癌药物
- 文献传递
- 蛋白质转导技术的应用及研究进展
- 2007年
- 生物膜的脂质双分子层对极性强的蛋白质、DNA及高分子复合物是一个有力的屏障,使用具有临床应用价值的蛋白质等都必须克服这个障碍。研究发现,一些蛋白质上具有蛋白质转导区(PTD)的小片段,能够有效地通过生物膜,几乎进入所有细胞。以PTD为载体,已成功地携带多种物质进入细胞或进入机体的组织器官。蛋白质转导在运送蛋白质、寡核苷酸、特异性杀伤肿瘤细胞、神经退行性疾病等方面具有巨大的潜力。
- 李治昊高梅叶珊赵京卉甘友清
- 关键词：蛋白质转导
- hClock-(35-47)的表达、纯化及其功能的检验被引量：2
- 2007年
- 目的构建hClock-(35-47)的表达质粒,进行诱导表达,纯化,在体外初步鉴定其跨膜功能。方法合成hClock-(35-47)全长DNA序列,重组入pET-32a表达载体中,测序鉴定后转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,构建好重组体的表达菌株。IPTG诱导并优化表达后,以NTA-Ni亲合层析进行分离纯化,及SDS-PAGE和Western bloting鉴定。纯化鉴定后的hClock-(35-47)用FITC标记,以一定的浓度孵育体外培养的血管内皮细胞(ECV-304),荧光显微镜下观察其穿膜活性。结果成功构建了hClock-(35-47)的表达载体,插入片断为51bp,表达产物相对分子质量约为21kD,经Western bloting鉴定,与抗His-Tag抗体有特异性反应,与培养的ECV-304孵化,显示具有穿膜功能。结论原核表达的hClock-(35-47)仍然保留其穿膜功能,为进一步研究提供基础。
- 高梅赵京卉冀治鸿刘延友肖静汪宇辉王正荣
- 关键词：纯化内皮细胞
- hClock-(35-47)_Bax-(55-77)的表达和纯化被引量：4
- 2007年
- 目的:构建hClock-(35-47)_Bax-(55-77)的表达质粒,进行诱导表达,纯化和鉴定。方法:合成hClock-(35-47)_Bax-(55-77)全长DNA序列,重组入pET-32a表达载体中,测序鉴定后转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,构建好重组体的表达菌株。IPTG诱导并优化表达后,以NTA-Ni亲合层析进行分离纯化,及SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果:成功构建了hClock-(35-47)_Bax-(55-77)的表达载体,插入片断为128bp,表达产物相对分子质量约为23kD,经Western blotting鉴定,与抗His-Tag抗体有特异性反应。结论:hClock-(35-47)_Bax-(55-77)融合蛋白可以用原核表达的方法大量获得,并通过亲和层析纯化达到较好的纯度,为下一步的研究提供基础。
- 高梅刘延友汪宇辉赵京卉叶珊肖静王正荣
- 关键词：BAX原核表达纯化
- 一种新型耐热基因TR1在水稻中的应用研究
- 杨毅李旭锋吴先军王健美彭旭东张珣刘志斌蒋彦刘绵学高梅熊方建徐培州刘峰廖泳祥张红宇
- 该项目由四川大学、四川贝安迪生物基因工程有限公司与四川农业大学共同完成。通过对TR1转基因水稻的耐热性研究，分析TR1基因对水稻耐热性和农艺性状的影响，获得了耐热性能明显高于野生型水稻的转基因水稻株系，完善和充实了在植物...
- 关键词：
- 关键词：水稻
- hPer1相互作用蛋白的筛选
- 2007年
- 目的应用酵母双杂交系统筛选血液中与人体生物钟蛋白Per1相互作用的新蛋白。方法以人Per1的basicHLH-PAS结构域为诱饵,在人血液cDNA文库中筛选与之相互作用的新蛋白。阳性克隆送测序后用生物信息学分析。结果酵母双杂交文库营养缺陷筛选得到114个阳性克隆,β-半乳糖苷酶检测报告基因获得46个蓝色克隆。通过测序和生物信息学分析,其中之一能与Per1相互作用的蛋白为LSMD1。结论通过酵母双杂交系统证明Per1能够与LSMD1发生相互作用。
- 冀治鸿江舟汪宇辉鲁芳刘延友高梅王正荣
- 关键词：近日节律酵母双杂交相互作用蛋白
