高志良
- 作品数：72 被引量：523H指数：12
- 供职机构：中山医科大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金美国中华医学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用聚合酶链反应快速检测痰液中结核杆菌
- 1995年
- 本研究以结核杆菌染色体中重复出现的长度为１２３个碱基对（ｂｐ）的ＤＮＡ片段作为聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增的模板，合成一对寡核苷酸引物。痰液标本先经三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ），乙二胺四乙酸二钠（ＥＤＴＡ－２Ｎａ）和三硝基甲苯（Ｔｒｉｔｏｎｘ－１００）加热、震荡处理，裂解结核杆菌，再作ＰＣＲ扩增和琼脂糖凝胶电泳。同时，与痰液直接涂片、抗酸染色镜检抗酸染色阳性杆菌作比较。用该ＰＣＲ检测的检出率为９１．４％（３２／３５），而涂片抗酸染色的检出率仅为３４．３％（１２／３５）。两者相比有非常显著性差异（ｘ２＝２４．４７６，Ｐ＜０．００１）。由于改进了ＰＣＲ前痰液标本的处理方法，使整个ＰＣＲ检测过程所需时间缩短至９ｈ。我们认为该ＰＣＲ检测结核杆菌是特异、敏感和快速的，可在临床实验室应用。
- 杨绍基凌小强吕凌高志良李刚姚集鲁
- 关键词：结核杆菌聚合酶链反应结核病
- 不同方法检测血清HBV DNA的比较研究被引量：3
- 2000年
- 采用夹心斑点杂交法、PCR—EB定性及Amp -lisensor定量法对HBsAg与抗—HBs 同时阳性、HBsAg阳性、抗—HBs 阳性和HBsAg与抗—HBs 均阴性的乙型肝炎病毒 (HBV)感染者检测血清HBVDNA。结果三种方法的阳性率分别为 2 9 1 %、4 7 7%和 80 2 % ;各组HBVDNA含量分别是 1 0 6.13± 1.86、1 0 6.0 8± 1.82 、1 0 4 .12± 1.4 0 和 1 0 5.0 7± 1.2 1(拷贝 /ml)。结论是Amplisensor法检测HBVDNA具有更高的敏感性 ;抗—HBs 阳性的HBV感染者血清中仍可检出HBVDNA。
- 尹华发陈青郭万里高志良
- 关键词：乙型肝炎病毒血清标志物HBVDNA
- TT病毒在谷丙转氨酶升高的体检者和肝病患者中检出的意义被引量：5
- 1999年
- 目的 通过研究ＴＴ病毒在谷丙转氨酶升高的体检人群和肝病患者中的意义，探讨其致病性。方法 收集１９ 例谷丙转氨酶升高体检者和４１ 例转氨酶正常的随机对照的血清，以及１８２ 例肝病患者的血清，采用ＰＣＲ 方法检测ＴＴ病毒的ＤＮＡ。聚合酶链反应（ＰＣＲ） 产物经限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ） 分析验证。同时检测甲、乙、丙、戊、庚型肝炎病毒（ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＥＶ和ＨＧＶ） 感染标志。结果 １９ 例转氨酶升高体检者中，ＴＴ病毒ＤＮＡ 检出率为１０－５３％ （２１９），对照组检出率为２－４４％ （１４１） ，两者差异无显著意义（ Ｐ＞０－０５）。转氨酶升高者中，９ 例为ＨＢＶ 现症感染，１ 例为丙型肝炎，１ 例为甲型肝炎。２ 例ＴＴ病毒ＤＮＡ 阳性者均重叠ＨＢＶ 现症感染。肝病患者中ＴＴＶＤＮＡ 检出比率为４－４％ 。１８ 例非甲～庚型肝炎中仅１ 例为ＴＴＶＤＮＡ阳性。结论 在本组健康体检人群中能检出一定水平的ＴＴ病毒感染，但引起体检者转氨酶升高的主要原因为ＨＢＶ感染。在肝病患者中也存在一定水平ＴＴ病毒感染，但不是非甲～庚型肝炎的主要病因。
- 彭晓谋高志良陈雪娟卢建溪姚集鲁
- 关键词：转氨酶TT病毒病原学
- 体检发现谷丙转氨酶升高人群中检出TT病毒被引量：8
- 1999年
- 目的：了解新型肝炎病毒—ＴＴ病毒在中国的流行情况，探讨其核酸变异性。方法：收集１９例健康体检发现谷丙转氨酶升高者的血清标本，采用ＰＣＲ方法检测ＴＴ病毒的ＤＮＡ。所得ＰＣＲ产物再采用限制性片段长度多态性分析和ＤＮＡ序列分析方法进行验证。最后将测序结果与ＧｅｎＢａｎｋ中的一些分离株进行比较，分析它们的同源性。结果：１９例转氨酶升高者中，２例ＰＣＲ检测呈阳性反应，其产物经限制性片段长度多态性分析证实为特异性产物。ＤＮＡ序列分析显示，２个阳性产物间的核酸同源性为９８７％，与Ｔａｋａｈａｓｈｉ等分离株和Ｏｋａｍｏｔｏ等分离株相比，同源性分别为９８７％和８９２％。两个ＴＴＶＤＮＡ片段中均存在精氨酸取代丝氨酸变异。结论：在中国广东人群中存在ＴＴ病毒感染，其核酸序列与Ｔａｋａｈａｓｈｉ等在日本得到的分离株高度同源。因而，设计ＰＣＲ引物时宜选择Ｔａｋａｈａｓｈｉ等分离株为标准。精氨酸取代丝氨酸变异的意义需进一步研究。
- 彭晓谋高志良陈雪娟卢建溪周元平黄仰苏姚集鲁
- 关键词：病毒性肝炎病因学TT病毒谷丙转氨酶
- 乙型肝炎病毒基因型研究现状被引量：30
- 2002年
- 黄晶高志良
- 关键词：乙型肝炎病毒基因型
- 慢性肝病肝血瘀阻与血清肝纤维化标志物关系的探讨被引量：4
- 1999年
- 目的：探讨慢性肝病肝血瘀阻与血清肝纤维化标志物之间的关系，认识肝纤维化的中医病因病机本质。方法：采用放射免疫法测定１５２ 例慢性肝病血瘀证和非血瘀证患者及３５ 例对照组的血清透明质酸（ＨＡ）、Ⅲ型前胶原（ｈＰＣⅢ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ－Ｃ）。结果：血瘀证和非血瘀证组血清ＨＡ、ｈＰＣⅢ、Ⅳ－Ｃ３项均显著高于对照组，其中血瘀证组血清ＨＡ、ｈＰＣⅢ两项显著高于非血瘀证组。进一步的相关分析表明，血瘀证程度与血清ＨＡ呈密切正相关。结论：肝血瘀阻的程度与肝纤维化密切相关，血清ＨＡ 可作为反映肝血瘀阻程度的良好指标。此外。
- 潘志恒张万岱高志良周元平郑荣琴
- 关键词：肝血瘀阻肝纤维化透明质酸
- 血清HBV DNA复制与慢性乙型肝炎肝脏损伤程度的研究被引量：21
- 2000年
- 目的 :探讨慢性乙型肝炎急性发作时 ,HBV复制水平与肝脏组织损伤程度之间的关系。方法 :对 44例自发性发作的慢性乙型肝炎患者进行肝组织活检 ,并采用荧光定量多聚酶链反应测定血清HBVDNA含量。结果 :血清HBVDNA含量与肝脏炎症程度 (G1～G4)及纤维化程度 (S1～S4)之间比较 ,无明显相关性 (P >0 .0 5 ) ;与血清丙氨酸转氨酶 (ALT)、门冬氨酸转氨酶 (AST)及总胆红素 (T -BILI)之间也无相关性。结论 :肝细胞损伤程度与不同个体中的HBV复制的绝对数值没有关系。提示HBV不直接致肝细胞病变 ,不同个体复杂的免疫反应决定了肝脏的损伤程度。
- 周小辉周元平姚春兰姚集鲁高志良
- 关键词：慢性乙型肝炎HBVDNA含量PCR肝细胞损伤
- 简化HBV-DNA抽提用于多聚酶链式基因扩增被引量：1
- 1993年
- 采用异硫氰酸胍、柠檬酸钠、2-巯基乙醇、十二烷基肌氨酸钠作为变性裂解剂,结合水饱和酚、氯仿、异戍醇等进行快速程序式抽提血清HBV-DNA模板用于多聚酶链式(PCR)基因扩增。该提取法比一般方法简单、稳定、不易污染,抽提过程可在lh内完成。PCR应用结果表明敏感性高于地高辛素标记探针斑点杂交法。经酶切及a-^(32)标记放射自显影鉴定PCR产物具有良好的特异性。
- 高志良姚集鲁吕凌黄仰苏郑锡澄
- 关键词：多聚酶基因扩增血清HBV-DNA斑点杂交法抽提肌氨酸钠
- α－干扰素治疗丙型肝炎疗效观察被引量：6
- 1994年
- α－干扰素治疗丙型肝炎疗效观察何有成，陆玮伦，姚集鲁，高志良，柯伟民，俞洪林，陈文思本文作者应用α－干扰素（ＩＦＮ）治疗２０例急、慢性丙型肝炎（丙肝）患者，以同期收治而未用ＩＦＮ治疗的病例作对照观察，考核了ＩＦＮ对丙肝的临床疗效和远期疗效。现报告如下...
- 何有成陆玮伦姚集鲁高志良柯伟民俞洪林陈文思
- 关键词：干扰素丙型肝炎药物疗法疗效
- TT病毒在健康人群和肝病患者中检出的意义
- 1998年
- 目的了解新型肝炎病毒-TT 病毒的致病性和在健康人群和肝病患者中的流行情况。方法收集180份健康体检患者血清和156份不同类型肝病患者血清.采用 PCR 方法检测 TT 病毒的 DNA。同时检测 HAV,HBV,HCV,HEV 和 HGV 感染标志,比较分析 TT 病毒在健康人群和不同类型肝病患者中流行情况及其致病性。结果健康体检人群和肝病患者中,TTV DNA 检出率分别为2.2%和4.5%,两组之间无显著性差异(P>0.05)。体检人群中,ALT 正常和升高者的检出率分别为1.7%和12.5%。急性肝炎,慢性肝炎和肝硬化者的检出率分别为4.8%,4.3%和4.7%,11例阳性患者中,3例 ALT 正常,8例 ALT 异常。在8例 ALT 异常患者中,6例为 HBV 现行感染,1例为 HCV 现行感染,仅1例为 NA-G 肝炎患者。结论在中国健康体检人群和肝病患者中能检出低水平的 TT 病毒现行感染。但似乎仅引起个别患者的转氨酶轻度升高。TT 病毒的致病性可能较弱或需要其他因素协同致病。
- 陈雪娟彭晓谋高志良卢建溪姚集鲁
- 关键词：TT病毒身体健康肝病病毒感染
