马开荣
- 作品数:70 被引量:266H指数:11
- 供职机构:浙江省血液中心更多>>
- 发文基金:浙江省医药卫生科学研究基金浙江省自然科学基金浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- ABH变异型个体血小板表面ABO抗原强度分析
- 许先国洪小珍刘瑛陈舒马开荣蓝小飞何吉朱发明吕杭军
- 一种人类红细胞血型系统ABO抗原的多重PCR-SBT基因分型方法及试剂
- 本发明属于基因分型检测方法技术领域,具体涉及一种用于人类红细胞血型系统ABO抗原的多重PCR‑SBT基因分型方法。本发明还涉及一种人类红细胞血型系统ABO抗原基因分型的多重PCR‑SBT试剂。本发明所提供的试剂和方法可作...
- 朱发明应燕玲洪小珍何吉许先国陈舒马开荣
- 文献传递
- 人ABO基因5’非翻译区的基因克隆和序列分析被引量:2
- 2011年
- 目的建立ABO基因5’非翻译区(5’untranslated region,5’-UTR)长片段的序列分析方法,研究5CUTR的基因多态性,为揭示AB0基因上游转录调控的分子机制提供基础。方法以血型血清学方法和分子生物学方法鉴定30名献血者的ABO表型和第6和7外显子基因型,采用PCR长片段扩增技术得到ABO基因5'-UTR约5kb产物,直接进行双向测序分析,并通过克隆对ABO基因5'-UTR存在杂合的样本进行单倍型分析。结果在表型和基因型相符合的样本中,直接测序法在5'-UTR共发现20个多态性位点,包括16个单核苷酸多态性位点、1个6bp重复序列插入/缺失多态性、1个8bp重复序列缺失多态性、1个36bp插入多态性、1个43bp重复序列多态性,其中11个为新发现的多态性位点。单倍型分析确定这些变异位点的顺/反式连锁关系,发现ABO基因5'-UTR的7种单倍型序列组合。结论人ABO基因5'-UTR具有序列多态性,启动子近端的序列相对保守。
- 刘瑛许先国马开荣兰小飞洪小珍朱发明吕杭军严力行
- 关键词:ABO血型基因型单倍型多态性
- 重组表达糖蛋白GPIIIa片段偶联荧光微球分析人血小板抗原-1系统同种抗体被引量:2
- 2015年
- 目的:应用偶联血小板GPIIIa重组表达片段的Luminex xMAP荧光微球,检测血小板抗HPA-1a和-1b抗体。方法:以倍比稀释成12个浓度(原液~1/2048)的抗HPA-1a WHO国际标准品,比较MAIPA和Luminex xMAP技术检测抗HPA-1a的灵敏度。以8份抗HPA-1a/b阴、阳性对照,36份WHO血小板抗体质控盲样,评估流式荧光微球技术检测抗HPA-1a和-1b的特异性。结果:MAIPA检测抗HPA-1a的灵敏度为滴度1/64(抗体浓度1.56 IU/ml),流式荧光微球检测的灵敏度远高于滴度1/2048(抗体浓度0.049 IU/ml)。微球分析法能特异性鉴别抗HPA-1a和-1b阴、阳性对照。36份盲样中,有1份样本,在高浓度对偶抗体的影响下,产生抗HPA-1b假阳性结果。其余样本的微球分析结果与预期结果相符,能准确检出抗HPA-1a和-1b抗体,而且与HLA和ABO抗体以及其它的血小板抗体(包括抗HPA-3b、-5b、-15b、-GPIb/IX和非HPA-1特异性的抗-GPIIb/IIIa)未发生交叉反应。结论:基于重组偶联血小板GPIIIa的流式荧光微球技术可灵敏、特异性检测血小板HPA-1系统抗体,适合于临床免疫性血小板减少症患者的抗体特异性鉴定。
- 许先国刘瑛陈舒洪小珍陶苏丹马开荣蓝小飞何吉朱发明吕杭军
- 关键词:人类血小板抗原同种抗体
- 流式荧光微球技术检测HPA-1同种抗体
- 许先国刘瑛陈舒洪小珍马开荣蓝小飞何吉朱发明吕杭军
- 血小板特异性抗体鉴定和基因测序分型技术的建立及其应用
- 许先国洪小珍刘瑛应燕玲马开荣蓝小飞徐芳何吉朱发明吕杭军严力行
- 1.项目建立了基于PCR-SBT技术的全套HPA基因分型方法(包括HPA-1到21w共21个系统),该方法是所有HPA基因分型方法中准确性最高、包含HPA位点最全的方法。2.建立了库容量为1045人份的浙江省献血者血小板...
- 关键词:
- 关键词:血小板基因分型
- α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因742C>T突变导致A2亚型被引量:10
- 2011年
- 本研究探讨2例ABO亚型A2B的分子机制。利用单克隆抗体检测先证者红细胞ABO血型抗原,用标准A、B、O细胞检测先证者血清中的ABO抗体,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增先证者ABO基因的第5至7外显子序列,其PCR产物经酶切后直接测序分析。同时,PCR产物经TOPO TA克隆到质粒载体中获得单链,对所得克隆进行ABO基因第6、7外显子双向测序分析。结果表明,先证者红细胞有A、B抗原,同时其血清中存在抗A1抗体。直接测序分析发现,第261位无缺失,第297位A/G、467C/T、526C/G、657C/T、703G/A、742C/T、796C/A、803G/C、930G/A杂合。克隆测序得到B101和1个新的A等位基因。与A102相比,新A等位基因仅在第742位C→T突变,导致第248位精氨酸变成色氨酸,新等位基因已被正式命名为A213。结论 :α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因第742位C→T突变导致产生A2表型,表型个体血清中可含有抗A1抗体。
- 洪小珍应燕玲许先国马开荣蓝小飞刘瑛朱发明吕杭军严力行
- 关键词:ABO基因
- 浙江汉族DEL表型基因分型方法的建立被引量:17
- 2006年
- 为了快速鉴定DEL表型,建立浙江汉族DEL表型的基因分型方法,根据RHD1227A等位基因序列设计等位基因特异性-聚合酶链反应(allele specific-polymerase chain reaction,AS-PCR),用于DEL表型的基因分型。用已知RHD1227A多态性的样本和已知DEL表型的样本评价基因分型方法的灵敏度和特异性。结果表明:在50例RHD1227A阳性和50例RHD1227A阴性的Rh阴性样本中基因分型方法的灵敏度和特异性都是100%;在33例DEL阳性样本和89例DEL阴性的样本中,基因分型方法的灵敏度为100%,有2例样本血清学结果为阴性而基因分型结果为阳性,重新用血清学方法和序列分析方法复核这2例样本,发现2例都是血清学漏检,因而基因分型方法的特异性是100%。结论:设计的基因分型方法可以有效地鉴定浙江汉族Rh阴性人群中的DEL表型。
- 吴俊杰洪小珍马开荣许先国傅启华严力行
- 关键词:DEL表型RHD基因分型
- 红细胞血型系统基因诊断新技术的综合研究
- 洪小珍朱发明应燕玲许先国陈舒马开荣蓝小飞
- 红细胞血型系统在输血医学、器官移植、临床疾病关联等方面具有重要意义,红细胞基因诊断技术的研究有助于提升血型分型准确性,减低输血不良反应。该项目综合研究了红细胞血型系统基因诊断方法、基因数字化配合技术、稀有表型分子机制、稀...
- 关键词:
- 关键词:红细胞血型系统基因诊断输血医学器官移植
- 中国人罕见的cisAB变异型分子机制分析被引量:41
- 2008年
- 为研究中国人群ABO血型系统中罕见的cisAB变异型的分子遗传背景,用血型血清学方法鉴定12例ABO血型疑难样本和116例随机无血缘关系样本,应用聚合酶链反应和DNA序列分析等方法对样本ABO基因酶活性编码区外显子6、7和侧翼内含子进行突变筛选和检测,并对不同基因型的扩增片段进行单倍体序列分析。血清学检测发现12个样本均为(A强B弱)或(A弱B强),PCR产物直接序列分析表明这些样本均为cisAB变异型,并存在4种基因型。通过单倍体序列分析,从中发现2种cisAB等位基因,其中cisAB01不仅存在外显子7的467C>T和803G>C变异,还在第6内含子存在未经报道的163T>C和179C>T变异;另一种等位基因是在B101基础上保留了A101的803G位点,编码一条176G、235S、266M和268G组合的多肽链。经检索,未发现该组合的ABO等位基因,该等位基因已被国际血型抗原基因突变数据库命名为cisAB05等位基因。文章系统研究了中国人群cisAB变异型分子机制,发现了一种新的cisAB05等位基因,同时根据内含子序列推测cisAB01等位基因可能是通过A101和B101等位基因间的同源交换而形成的。
- 许先国刘瑛洪小珍马开荣朱发明吕杭军严力行
- 关键词:分子机制ABO血型系统