吕杭军
- 作品数：227 被引量：536H指数：12
- 供职机构：浙江省血液中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术经济管理更多>>
- 一种HLA-DQB1基因分型的组特异性引物PCR-SBT方法及试剂
- 本发明提供一种用于HLA‑DQB1基因分型的组特异性引物PCR‑SBT试剂，它由用于扩增的6对组特异性引物和用于测序分析的4条寡核苷酸测序引物组成；本发明还提供应用上述试剂的HLA‑DQB1基因分型的组特异性引物PCR‑...
- 何吉朱发明和艳敏章伟吕杭军
- 文献传递
- 单采血小板采集全过程质量管理被引量：1
- 2008年
- 目的探索单采血小板采集全过程的关键控制点，以达到单采血小板采集全过程质量控制。方法找出单采血小板采集全过程中的关键控制点，并在单采血小板采集全过程中加以控制。结果单采血小板采集全过程质量得到控制，保证了单采血小板的采集质量和产品质量。结论实施单采血小板采集全过程的质量管理是献血服务质量体系在单采血小板采集全过程的规范实施，有利于血液安全。
- 徐健沈卓岚来海风盛琦俞丽殷国美吕杭军严力行
- 关键词：单采血小板质量管理关键控制点
- 应用磁性分选方法从人脐血中分离极小类胚胎干细胞
- 2013年
- 目的建立从人脐血中分离极小类胚胎干细胞的磁性分选方法。方法脐带血标本与0.9%生理盐水以1∶1充分混匀,形成单细胞悬液层加到比重为1.077 g/mL的淋巴细胞分离液上,经密度梯度离心收集单个核细胞层。应用Lineage Cell Depletion Kit、CD45 MicroBeads、CD133 MicroBead Kit和CD34 MicroBead Kit进行磁性分选。应用流式细胞术分别检测分选的细胞群的表面标志。利用兔抗人Oct4与Nanog单克隆抗体和鼠抗兔IgG二抗分别检测分选细胞核内Oct-4和Nanog表达。RT-PCR检测分选细胞的Oct-4和Nanog mRNA表达。通过与人正常红细胞比较分析细胞大小。结果磁性分选获得Lin-CD45-CD133+和Lin-CD45-CD34+这2群细胞。免疫荧光法检测显示这2群细胞中均表达Oct-4和Nanog。RQ-PCR结果显示2群细胞均表达Oct-4和Nanog转录子。瑞氏染色镜下可见Lin-CD45-CD133+和Lin-CD45-CD34+这2群细胞大小比正常红细胞小,且核质比高。结论应用磁性分选方法可获得表达Lin-CD45-CD133+和Lin-CD45-CD34+的极小类胚胎干细胞。
- 王芳刘晋辉何吉朱发明吕杭军
- 关键词：脐血
- 人类白细胞抗原HLA-A/C和HLA-B/DRB1座位基因重组分析被引量：3
- 2014年
- 目的探讨2个汉族家系人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-A/C和B/DRB1座位的重组情况。方法采集2个家系成员外周血标本抽提基因组DNA,应用聚合酶链反应-序列特异寡核苷酸探针技术(PCR-SSO)和聚合酶链反应-测序分型方法(PCR-SBT)检测HLA-A,-C,-B,-DRB1,-DQB1座位,家系遗传分析确定个体HLA单体型,通过检测短串联重复序列位点确定家系成员亲权关系。结果家系1:HLA单体型重组发生在HLA-A/C座位间,家系调查显示为母源HLA单体型交换后遗传给子代;家系2:HLA单体型重组发生在HLA-B/DRB1座位间,家系调查显示为父源HLA单体型发生交换后遗传给子代。短串联重复序列结果证实2个家系成员内具有高度的亲权关系。结论发现HLA-A/C和HLA-B/DRB1座位重组家系各1例,为深入研究HLA重组机制提供了基础。
- 陈男英王炜章伟何吉朱发明吕杭军
- 关键词：人类白细胞抗原
- 2011年杭州地区无偿献血者血液核酸筛查结果分析被引量：16
- 2014年
- 目的探讨核酸扩增检测2011年杭州地区无偿献血人群HBV、HCV、HIV-1感染的收益情况。方法采用PROCLEIX ULTRIO Assay和2种不同厂家ELISA试剂,对2011年杭州地区无偿献血者血液标本进行HBV、HCV、HIV-1感染性标志物的筛查。ULTRIO初次呈反应性标本进行复试和鉴别试验,并对部分初次反应性标本进行追踪。结果在检测的131 594例献血者标本中,585例ULTRIO初试呈反应性,反应性率为0.44%。585例ULTRIO初次检测反应性标本中,418例为核酸种类可鉴别、44例为核酸混合检测反应性、123例为NAT初试反应性而重复无反应。在核酸鉴别反应性标本中,HBV DNA反应性为370例(88.5%)、HCV RNA反应性为29例(6.9%)和HIV-1 RNA反应性为19例(4.6%)。整体标本中97例为HBV DNA反应性而HBsAg无反应性,核酸检测确认收益率(yield rate)为0.07%。追踪分析46例NAT初试反应性而重复无反应的献血者,结果显示6例标本ULTRIO结果呈反应性(其中2例鉴别为HBV DNA反应性)。结论应用核酸扩增检测能有效提高血液安全,降低输血传播性疾病风险;而献血人群中核酸检测收益标本主要为HBV DNA反应性而HBsAg无反应性。
- 吕蒙恩董杰吴亚玲祝宏朱发明吕杭军
- 关键词：无偿献血者核酸扩增检测收益率
- 人血小板膜糖蛋白ITGB3基因终止突变C．1476G〉A的体外表达研究
- 2016年
- 目的对ITGB3基因新的终止突变c．1476G〉A进行体外表达研究，以阐明其功能。方法应用体外定点诱变技术构建突变型ITGB3e．1476G〉AcDNA的真核表达载体，转化感受态细胞，提取质粒后测序验证。采用非脂质体介导重组质粒转染中国仓鼠卵巢癌细胞株（Chinesehamsterovariancancer，CHO）细胞，经G418筛选获取稳定表达细胞株。采用实时荧光定量PCR、Western印迹和流式细胞术分别检测CHO稳定表达株ITGB3基因的mRNA表达和血小板膜糖蛋白llIa（glycoproteinIIIa，GPⅢa）糖蛋白水平。结果成功构建野生型和突变型ITGB3cDNA的真核表达载体，转染筛选后分别获得了稳定表达的CHO细胞株。突变型细胞株中CD61抗原表达量仅为野生型的37％，而ITGB3mRNA转录水平为野生型的6％。Western印迹结果显示，野生型细胞株稳定表达完整的GPⅢa蛋白，而突变型CHO细胞株无完整的GPⅢa蛋白表达。结论ITGB3c．1476G〉A终止突变可导致ITGB3基因的转录水平降低，影响GPⅢa蛋白合成及CD61抗原的表达水平。
- 刘瑛许先国陈舒洪小珍陶苏丹何吉朱发明吕杭军
- 关键词：体外表达
- 参加ISBT第15届血小板免疫学研讨会质控项目结果分析
- 目的国际输血协会(ISBT)血小板免疫学研讨会通过发放血小板免疫血清学和基因分型样本,评价各国参与实验室在血小板免疫学和基因分型方面的研究检测能力。方法本届研讨会共发放4组血小板质控品:1)2份血浆,用于血小板GPⅡb/...
- 许先国刘瑛应燕玲洪小珍朱发明吕杭军严力行
- α-1,2岩藻糖基转移酶基因35C>T和682A>G突变点体外表达的研究
- 目的在体外研究α-1,2岩藻糖基转移酶基因(FUT1)35C>T和682A>G突变点对α-1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)活性的影响。方法 PCR扩增FUT1全长编码序列DNA片段,通过TOPOTA技术连接至表达载体pc...
- 和艳敏洪小珍马开荣兰小飞许先国朱发明吕杭军严力行
- HLA和KIR基因遗传多态性对HCV感染的影响
- 戴兵王芳陈男英吕杭军何吉朱发
- 全球丙型肝炎病毒(HCV)感染约占人口总数的3％，世界卫生组织已将其列入全球性健康问题。HCV病毒感染并引发肝脏损伤的机制尚未完全明确，项目针对HLA和KIR基因遗传多态性对HCV感染的影响进行了系列研究。
1.基于大...
- 关键词：
- 关键词：丙型肝炎病毒基因遗传
- KIR2DL1、2DL2、2DL3和配基HLA-C序列分型方法的研究及其应用
- 陶苏丹章伟和艳敏何俊俊陈男英韩浙东王炜朱发明吕杭军
- 该项目建立了一种可靠的KIR2DL1、2DL2、2DL3等位基因高分辨分型方法，并利用建立的测序分型方法检测分析了KIR2DL1、2DL2、2DL3与HLA-C在浙江汉族人群中的中的分布情况和匹配率，并分析了配基HLA-...
- 关键词：
- 关键词：等位基因造血干细胞移植
