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顾宏伟: 作品数：10 被引量：104H指数：5; 供职机构：南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

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中草药的免疫增强作用被引量：46: 2002年; 机体免疫力的高低直接决定动物体的抗病力和生产力。中草药具有独特的优越性 ,能够特异性或非特异性地增强机体的免疫力。文章阐述了中草药对细胞免疫。; 付秀花王恬顾宏伟; 关键词：中草药免疫增强作用特异性免疫非特异性免疫免疫器官

猪链球菌2型新的感染相关因子自溶素的鉴定与分析被引量：4: 2008年; 根据Sanger研究所公布的猪链球菌2型(SS2)P1/7株的自溶素序列,设计检测引物,取SS2我国2次流行株、其它临床分离株和参考株,及猪链球菌1型、1/2型、7型和9型,共33株,分别以其DNA为模板,PCR扩增。结果表明,SS2除无毒株T15阴性外,其他临床分离株27株(含人源2株)均阳性;其它猪链球菌为,SS7阳性,SS1、SS1/2和SS9均阴性。同时设计引物向两侧扩增,以四川流行株ZY05719和江苏流行株HA9801的DNA为模板,扩增自溶素ORF完整的编码基因,软件分析结果显示,该基因含有6个重复的"GBS_Bsp-like"域和1个"N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶"域,与SS2欧洲株有较高同源性(99.8%),但与SS2加拿大株差异较大。在DNASTAR分析所编码蛋白的抗原性的基础上,另设计引物,以ZY05719株DNA为模板,PCR扩增具有良好免疫原性的片段基因,并定向克隆至表达载体pET30a(+)中,进行重组表达,SDS-PAGE和Western blot表明,所获得重组自溶素具有良好反应原性。; 顾宏伟陆承平; 关键词：猪链球菌2型自溶素

猪链球菌2型感染相关因子筛选、鉴定及分子特性分析: 猪链球菌(Streptococcus suis)是一种革兰氏阳性菌,有35个血清型(1～34,1/2),其中猪链球菌2型(SS2)可引起猪的急性败血症及相关人员感染而急性死亡。2005年7月在四川再次暴发,倍受世界关注。...; 顾宏伟; 关键词：猪链球菌2型荧光定量RT-PCR 突变自溶素; 文献传递

兔多杀性巴氏杆菌铁调节外膜蛋白(IROMPs)抗原交叉性试验被引量：10: 2004年; 分别以含铁培养基和限铁培养基培养 4株兔多杀性巴氏杆菌JS、C5 1 2、C5 1 3及C5 1 17株 ,用刚果红结合试验初步分析铁调节外膜蛋白 (IROMPs)表达情况 ,同时破碎菌体 ,提取外膜蛋白 ,经SDS PAGE比较这 4株细菌在正常培养条件、富铁培养条件及限铁培养条件时外膜蛋白的表达差异 ,结果表明 :限铁培养时 ,细菌表现出对刚果红染料较强结合性 ,且这 4株巴氏杆菌均表达数种高分子量的IROMPs,主要有 14 7kD、135kD、99kD、94kD、82kD及 72kD蛋白带 ,4株之间存在一定的差异 ,而正常或富铁条件培养时均不表达上述条带。免疫印迹结果显示 ,正常条件培养的全菌 (C5 1 17株 )抗血清中不含有针对IROMPs的抗体 ,限铁培养的C5 1 17株IROMPs可诱导机体产生相应抗体 ,并且能与JS、C5 1 2及C5 1 3株的IROMPs发生抗原交叉性反应。同时用间接ELISA检测C5 1 17株 3种IROMP(99kD、94kD和 87 6kD)的交叉抗体效价 ,结果这 3种抗血清均与其它 3株的产生较高的交叉抗体滴度。; 顾宏伟陆承平; 关键词：兔多杀性巴氏杆菌

兔出血症病毒早期流行株NJ85衣壳蛋白基因测序、变异性分析及立体结构预测: 本研究克隆了具有良好免疫原性的RHDV中国早期流行毒株NJ85的VP60全基因,并进行了测序.在此基础上,利用GenBank数据库,分析了与其它18个世界各国17年间获得的RHDV和3个欧洲野兔综合征病毒毒株之间的遗传进...; 王永山陆承平周宗安顾宏伟薛家宾刘玉; 关键词：兔出血症病毒衣壳蛋白基因测序克隆免疫; 文献传递

兔多杀性巴氏杆菌铁调节外膜蛋白的小鼠免疫效果分析被引量：7: 2007年; 【目的】本试验以小鼠为动物模型,比较了兔多杀性巴氏杆菌铁调节外膜蛋白(IROMPs)的免疫原性及分析交叉免疫保护效果。【方法】分别以正常培养基和限铁培养基增殖兔多杀性巴氏杆菌C51-12和C51-3,采用Sarcosyl沉淀—超离法提取IROMPs和OMPs,并用SDS-PAGE比较两株之间的差异,同时用正常培养基增殖该菌制备灭活全菌抗原。免疫原性分析,将清洁级小鼠20只随机分成4组,5只/组,以C51-12株的全菌、IROMPs和OMPs作抗原分别免疫,采用间接ELISA检测免疫小鼠的相应抗体动态变化;免疫保护试验,分别采集经4次免疫后小鼠的抗血清,作1﹕10稀释腹腔注射小鼠,每组6只,18h后用C51-12和C51-3分别攻毒,比较上述抗血清所提供的交叉免疫保护力。【结果】前21d,抗体滴度以全菌免疫组抗体滴度较高,随后IROMPs免疫组反超。最终抗体滴度:IROMPs组>OMPs组>全菌组。被动免疫时全菌抗血清和OMPs抗血清能够抵抗C51-12株攻毒,但对C51-3株提供的保护力较差;C51-12株攻毒,IROMPs抗血清组能够全部保护,C51-3株攻毒,5/6获得保护。【结论】IROMPs在小鼠动物模型中具有一定的交叉保护力,为进一步研究交叉保护因子奠定基础。; 顾宏伟陆承平; 关键词：多杀性巴氏杆菌免疫原性

人源和猪源血清中囊虫循环抗原的免疫与理化性质比较被引量：1: 2007年; 刘玉顾宏伟王平王永山周宗安; 关键词：囊虫病循环抗原

体内表达新基因trag在猪链球菌的分布及其免疫反应性分析被引量：6: 2008年; 【目的】trag(transfer gene G)是利用IVIAT(in vivo induced antigen technology)通量筛选鉴定的猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)感染相关因子,研究该基因在猪链球菌(Streptococcus suis,SS)中的分布情况,研究康复血清与免疫血清在免疫印迹中的反应性有无,间接证明其在体内感染与体外培养时表达差异。【方法】鉴于我国分离株trag与GenBank公布的SS2北美株89/1591的trag序列有95.8%的同源性,据此设计和合成一对检测引物,对SS2我国江苏及四川流行株、其他临床分离株和参考株及SS1、SS1/2、SS9、SS7及C群猪源链球菌共43株进行PCR扩增。另设计一对引物,扩增5株SS代表菌株trag的完整阅读框,并对扩增产物进行测序。据软件分析后,选择TRAG(Transfer protein G)免疫原性良好的区域片段的核酸设计表达引物,PCR扩增后定向克隆至表达载体pET28a(+)构建表达质粒,表达蛋白转印到PVDF膜上,分别与SS2猪康复血清和猪高免血清反应。【结果】trag在SS2中94%(30/32)阳性,SS9中67%(4/6)阳性,SS7阳性,SS1、SS1/2及C群菌阴性。5株细菌TRAG的氨基酸序列与SS2中国株98HAH33、05ZYH33及北美株89/1591同源性>97%。所获得重组蛋白只能被康复血清识别。【结论】从SS致病株中检出感染相关基因trag,提示该基因可能与SS致病性有关,重组蛋白的免疫转印结果表明,TRAG可能与SS2体内感染相关。; 祝昊丹顾宏伟陆承平; 关键词：猪链球菌2型 PCR检测 TRANSFER PROTEIN

猪链球菌致病性研究及其公共卫生意义被引量：26: 2006年; 陆承平姚火春范红结华修国孙建和顾宏伟王楷赵冉濮俊义张炜; 关键词：猪链球菌2型公共卫生急性传染病血清型

兔多杀性巴氏杆菌铁调节外膜蛋白的免疫原性、表位及耐药性的分析: 兔巴氏杆菌病(Pasteurellosis)是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)感染引起的呼吸道疾病,为家兔的主要传染病之一.巴氏杆菌的长期存在性造成该病绵延不断,成为家兔养殖业的隐患,影响兔...; 顾宏伟; 关键词：多杀性巴氏杆菌随机肽库模拟肽; 文献传递

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