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卵巢癌相关成纤维细胞的培养及其对癌细胞侵袭力的影响被引量：5: 2008年; 目的探讨卵巢癌相关成纤维细胞(CAFs)对卵巢癌细胞株CAOV3侵袭力的影响。方法用组织块贴壁培养法获得原代卵巢CAFs和卵巢正常成纤维细胞(NFs);通过倒置相差显微镜观察细胞形态和多种蛋白的免疫组化染色,对卵巢CAFs进行鉴定,观察CAFs对CAOV3侵袭力的影响。结果获得纯化的卵巢CAFs,其波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白染色呈阳性,角蛋白呈阴性;CAFs可显著提高CAOV3的侵袭能力(P<0.01)。结论与NFs相比,CAFs在形态结构、蛋白表达等方面均有显著差异,卵巢CAFs可增强CAOV3侵袭作用。; 王晓翊卢实杨守华韩方唐慧娟王泽华; 关键词：卵巢肿瘤癌相关成纤维细胞细胞培养侵袭力

Toll样受体在妇产科领域的研究进展被引量：2: 2007年; 韩方吴超英; 关键词：TOLL样受体妇产科 HASHIMOTO 信号传导途径免疫炎症反应

Toll样受体4在人滋养细胞中的表达及免疫作用被引量：1: 2010年; 目的:探讨Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)在滋养细胞中的表达及其免疫作用。方法:采用RT-PCR分别检测原代培养滋养细胞和经1mg/LLPS刺激12h后的滋养细胞中TLR4 mRNA表达水平;流式细胞计数分别检测LPS刺激的滋养细胞中TLR4抗体封闭组、非TLR4抗体封闭组和空白对照组细胞凋亡发生率;ELISA法分别检测LPS刺激的滋养细胞中TLR4抗体封闭组、非TLR4抗体封闭组和空白对照组细胞TNF-α分泌水平。结果:RT-PCR结果显示,经LPS刺激的滋养细胞较正常滋养细胞TLR4mRNA表达水平明显增强;在LPS刺激的滋养细胞中,流式细胞计数结果显示,TLR4抗体封闭组和非TLR4抗体封闭组细胞凋亡率存在明显差异。ELISA结果显示,TLR4抗体封闭组和非TLR4抗体封闭组细胞TNF-α分泌水平也有显著差异。结论:TLR4信号途径在LPS引起的人滋养细胞凋亡及TNF-α分泌等炎性过程中发挥着重要作用。; 邓飞涛吴超英韩方; 关键词：LPS 滋养细胞 TNF-Α 细胞凋亡

RNA干扰沉默EZH2基因对人卵巢癌细胞增殖迁移的抑制作用被引量：2: 2010年; 目的:探讨RNA干扰沉默EZH2基因对人卵巢癌细胞系A2780增殖和迁移的影响。方法:真核表达载体介导靶向沉默EZH2 shRNA的重组质粒转染A2780细胞,Real-time RT-PCR检测EZH2基因的沉默效果,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell小室检测细胞迁移。结果:EZH2shRNA转染明显下调EZH2的表达(P<0.001)。重组质粒稳定转染至A2780细胞后,细胞增殖速度明显下降(P<0.05),G0/G1期细胞增加(P<0.01),体外迁移能力下降(P<0.01),差异均有统计学意义。结论:EZH2基因沉默能有效抑制卵巢癌细胞的增殖和迁移能力,为卵巢癌的表观遗传学治疗提供新靶点。; 于利利胡沙王静李智敏韩方黄在菊王泽华; 关键词：EZH2 细胞迁移卵巢癌

EZH2 shRNA真核表达载体的构建及其在卵巢癌A2780细胞系的稳定表达被引量：1: 2010年; 目的采用基因工程技术,构建EZH2 shRNA的真核表达载体,获得稳定表达干扰质粒的卵巢癌A2780细胞系。方法合成特异性干扰EZH2的shRNA片段并定向克隆插入Supersilencing shRNA质粒表达载体pGPU6/GFP/Neo,获得表达载体pGPU6/GFP/Neo-shEZH2。脂质体介导重组质粒转染A2780细胞,经G418加压筛选获得稳定转染细胞株,Real time RT-PCR和Western blot检测转染后细胞系EZH2的表达。结果测序结果证实重组载体构建成功,稳定转染shEZH2的A2780细胞EZH2的mRNA和蛋白水平下降(90.20±1.66)%和(73.80±5.49)%,P<0.01,差异有统计学意义。结论成功构建EZH2 shRNA表达载体,获得EZH2基因稳定沉默的A2780细胞系,为进一步研究以EZH2为靶点的卵巢癌治疗奠定实验基础。; 胡沙于利利李智敏韩方吴莉英黄在菊王泽华; 关键词：EZH2 卵巢癌 RNA干扰

卵巢癌相关成纤维细胞和正常卵巢成纤维细胞的基因表达差异被引量：2: 2011年; 目的:对卵巢癌相关成纤维细胞(Carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)及卵巢正常成纤维细胞(Normalfibroblasts,NFs)进行分离、培养、纯化,并分析两者多种基因表达的差异。方法:①用组织块贴壁培养法获得原代卵巢癌CAFs和卵巢NFs,通过胰酶消化法和反复传代法进行细胞的纯化;②观察细胞形态,多种基因的免疫细胞化学染色检测及相应mRNA的半定量分析,对CAFs和NFs进行初步鉴定;③应用RT-PCR的方法对CAFs和NFs中多种基因进行分析比较。结果:①获得了纯化的卵巢CAFs和NFs;②卵巢CAFs的细胞免疫化学染色α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)染色呈阳性,角蛋白呈阴性,卵巢NFs波形蛋白(Vimentin)阳性,而α-SMA和细胞角蛋白阴性;③卵巢CAFs与NFs中Vimentin与α-SMA的mRNA发现均有表达,但CAFs中表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);④与NFs相比,CAFs中多种mRNA的表达增加,其中包括生长因子,血管生成促进因子,细胞因子等。结论:与NFs相比,CAFs在mRNA、蛋白表达等方面均有统计学差异;卵巢癌中CAFs基因表达的检测表明,其基因表达有显著变化,提示这些成纤维细胞可能为卵巢癌细胞的生长提供了最适合的微环境。推测卵巢-宿主界面微环境在上皮性卵巢癌的发展中可能起重要作用。; 王晓翊韩方唐慧娟王泽华; 关键词：卵巢肿瘤癌相关成纤维细胞成纤维细胞活化蛋白

超声诊断女性生殖器畸形的临床价值被引量：5: 2013年; 二维超声可诊断较典型的子宫畸形。三维超声既能显示子宫外形,又能显示宫腔情况,还能量化畸形的程度,而且无创、费用低、可重复性高,相比二维超声、输卵管子宫造影准确性较高,已经被越来越多的应用于诊断复杂的子宫畸形。; 张璇韩方于利利; 关键词：子宫畸形三维超声

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