于利利
- 作品数：30 被引量：144H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Livin基因短发夹状RNA对子宫颈癌Siha细胞增殖迁移的影响被引量：7
- 2012年
- Livin基因作为近年来发现的一种人类凋亡抑制蛋白（inhibitorofapoptosisprotein，IAP），低表达于健康成人组织和胚胎组织中，而高表达于包括黑色素瘤、淋巴瘤、结肠癌、前列腺癌、宫颈癌、乳腺癌等^[1-3]多种类型的肿瘤组织中。
- 于利利吴莉英蔡晶黄在菊王泽华
- 关键词：LIVIN基因短发夹状RNASIHA迁移胚胎组织
- Livin异构体特异性shRNA对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:应用构建成功的Livin异构体(BIRC71,BIRC72)短发夹RNA(short hairpin HNA,shRNA)真核表达载体转染Hela细胞,探讨其对Livin基因的沉默效应及诱导Hela细胞凋亡的作用。方法:采用脂质体转染法转染Hela细胞,荧光实时定量PCR、Western blotting检测转染前后宫颈癌Hela细胞Livin基因拷贝数和蛋白表达的变化,将shRNA表达载体流式细胞术检测不同时间(24、48、72h)的细胞凋亡率。结果:真核表达载体的转染效率48 h较24、72 h高;转染pGenesil-1- BIRC71、pGenesil-1-BIRC72后Hela细胞中Livin拷贝数明显减少(P<0.05),蛋白质表达水平显著降低(P<0.05);流式细胞术检测24、48、72 h凋亡率,转染Livin shRNA组细胞的凋亡率显著高于对照组(P<0.05),随时间延长(24→72 h)凋亡率相应增加。结论:靶向Livin的shRNA真核表达载体可以有效特异地阻断Livin基因的表达。
- 于利利王泽华
- 关键词：LIVIN基因短发夹RNA宫颈癌
- 川芎煎剂对损毁大鼠下丘脑诱致的胃粘膜损伤之影响被引量：4
- 1989年
- 本实验首先观察了川芎煎剂(dLwF)对电解损毁后部下丘脑诱致的大鼠胃粘膜损伤之影响,并将其与甲氰咪胍、阿托品的作用进行了比较,然后观察了dLwF对损毁后部下丘脑后大鼠血液比粘度、血浆皮质醇水平和胃酸分泌的影响。结果显示,dLwF,甲氰咪胍,阿托品对这种消化道损伤有明显抑制作用;dLwF的抑制效果与阿品托相近,但优于甲氰咪胍,dLwF且能防止这种大鼠全血比粘度的上升和血浆皮质醇水平的下降,但对其血浆比粘度和胃酸分泌无明显影响。这表明,dLwF对这种大鼠胃粘膜有细胞保护作用及能改善胃粘膜的微循环。
- 吴佐泉马廉亭周银芳李玫珠于利利
- 关键词：下丘脑胃粘膜药理作用
- Bcl-xL和Caspase3在人卵巢癌细胞株凋亡过程中的调节作用被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨 Bcl- x L和 Caspase3基因在顺铂诱导人卵巢癌细胞株凋亡过程中的表达及其在肿瘤细胞凋亡中的作用。方法 应用流式细胞术 ,RT- PCR技术和原位杂交技术 ,分别对顺铂诱导人卵巢癌敏感细胞株 (COC1)及卵巢癌耐药细胞株 (COC1/ DDP)的细胞凋亡及其 Bcl- x L和 Caspase3表达进行研究。结果 1不同顺铂浓度 (3、 6、 9.9μg/m l)作用下 COC1和 COC1/ DDP细胞凋亡率不同 ,COC1/ DDP细胞明显低于 COC1(P<0 .0 5 )。 2 COC1和 COC1/ DDP细胞株中均有 Bcl- x L基因表达 ,但 COC1/ DDP表达明显强于 COC1。在 6μg/ m l顺铂作用下 COC1和 COC1/ DDP细胞株中 Bcl- x L基因表达下调 ,以 COC1下降更明显。3原位杂交结果 ,6μg/ m l顺铂作用后 COC1和 COC1/ DDP细胞 Cas-pase3呈阳性 ,可见到凋亡细胞特征性形态学变化。结论 凋亡抑制基因 Bcl- x L在人卵巢癌多药耐药细胞株 (COC1/DDP)中高表达 ,是导致其细胞凋亡受抑制和对药物敏感性降低的重要原因 ,Caspase3在顺铂诱导凋亡的过程中被激活 。
- 于利利王泽华
- 关键词：卵巢癌BCL-XL基因多药耐药细胞株
- EZH2基因沉默逆转卵巢上皮性癌细胞顺铂耐药性的实验研究被引量：2
- 2010年
- EZH2基因是果蝇zeste基因增强子的人同源物，作为一种转录抑制因子参与基因沉默，在细胞生长调控中发挥着重要作用。研究发现，EZH2基因可以抑制相关癌基因的活性，在前列腺癌、乳腺癌。和胰腺癌等多种恶性肿瘤组织中高表达，促进肿瘤生长、侵袭和转移。然而迄今为止，对EZH2基因参与卵巢上皮性癌（卵巢癌）化疗耐药及其机制的研究鲜见报道。本研究应用真核质粒载体介导的RNA干扰技术抑制EZH2基因的表达，探讨EZH2基因沉默后逆转卵巢癌耐药细胞株A2780／DDP对顺铂耐药的可能作用机制，为EZH2基因在卵巢癌耐药的基因治疗提供实验基础。
- 胡沙李智敏王静唐慧娟于利利王泽华
- 关键词：EZH2基因卵巢上皮性癌顺铂耐药性基因沉默癌细胞逆转卵巢癌耐药
- 凋亡抑制基因在人卵巢癌细胞敏感株及耐药株中的表达
- 2007年
- 目的探讨凋亡抑制基因Bcl-2和Bcl-XL在人卵巢癌细胞敏感株(A2780)及耐药株(AD6)中的表达及其在卵巢癌多药耐药发生中的分子机制。方法采用DNA电泳、流式细胞技术及半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,检测不同浓度(3.0、6.0、9.9μg/ml)顺铂诱导的人卵巢癌细胞敏感株A2780及耐药株AD6的细胞凋亡及其Bcl-2和Bcl-XL基因的表达水平。结果①DNA凝胶电泳显示,不同浓度的顺铂均能诱导A2780和AD6细胞产生凋亡,呈现典型的凋亡梯度(DNA Ladder)。②流式细胞仪分析结果显示,不同顺铂浓度作用下A2780和AD6细胞凋亡率不同,AD6明显低于A2780(P<0.05)。③RT-PCR结果显示,A2780和AD6细胞均表达Bcl-2、Bcl-XL,但在AD6细胞株中2基因的表达明显强于A2780。在6.0μg/ml顺铂作用下A2780和AD6细胞株中2基因表达下调,但仍以在AD6的表达强于A2780。结论顺铂可诱导卵巢癌细胞凋亡,凋亡抑制基因Bcl-2和Bcl-XL在人卵巢癌多药耐药细胞株中高表达,是导致其细胞凋亡受抑制和对药物敏感性降低的重要原因。
- 于利利王泽华
- 关键词：卵巢癌多药耐药基因BCL-2顺铂
- 抗凋亡机制与卵巢癌耐药的研究进展被引量：1
- 2002年
- 化疗在卵巢恶性肿瘤治疗中占重要地位,但抗肿瘤药物的疗效常因肿瘤细胞耐药而受限,耐药机理除传统耐药机制外还包括细胞对药物摄取与转运的改变,非特异的胞浆防卫系统及DNA分子修复系统改变等。实验已证实,抗凋亡机制在肿瘤细胞耐药中起更重要作用。综述近年文献中抗凋亡机制与卵巢癌耐药关系的研究。
- 于利利
- 关键词：抗凋亡机制卵巢癌耐药机制细胞凋亡
- EZH2 shRNA真核表达载体的构建及其在卵巢癌A2780细胞系的稳定表达被引量：1
- 2010年
- 目的采用基因工程技术,构建EZH2 shRNA的真核表达载体,获得稳定表达干扰质粒的卵巢癌A2780细胞系。方法合成特异性干扰EZH2的shRNA片段并定向克隆插入Supersilencing shRNA质粒表达载体pGPU6/GFP/Neo,获得表达载体pGPU6/GFP/Neo-shEZH2。脂质体介导重组质粒转染A2780细胞,经G418加压筛选获得稳定转染细胞株,Real time RT-PCR和Western blot检测转染后细胞系EZH2的表达。结果测序结果证实重组载体构建成功,稳定转染shEZH2的A2780细胞EZH2的mRNA和蛋白水平下降(90.20±1.66)%和(73.80±5.49)%,P<0.01,差异有统计学意义。结论成功构建EZH2 shRNA表达载体,获得EZH2基因稳定沉默的A2780细胞系,为进一步研究以EZH2为靶点的卵巢癌治疗奠定实验基础。
- 胡沙于利利李智敏韩方吴莉英黄在菊王泽华
- 关键词：EZH2卵巢癌RNA干扰
- 靶向livin基因的短发夹状RNA联合顺铂对子宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响
- 2008年
- 宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，传统的治疗模式给患者带来了很大的痛苦，且宫颈癌对化疗药物存在耐药，其5年生存率仅为30％～50％，因此迫切需要研究出一种抗肿瘤效果好、副反应少的治疗方法。RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术是近年发展起来的新技术，与化疗药物联合应用后，具有既可避免肿瘤细胞早期出现耐药又可减少化疗药物的用量及副反应的优点。livin基因是凋亡抑制基因家族的新成员，与肿瘤细胞的抗凋亡效应及耐药密切相关。
- 于利利王泽华
- 关键词：LIVIN基因HELA细胞凋亡短发夹状RNA顺铂靶向
- Livin shRNA表达载体的构建及其稳定转染宫颈癌siha细胞系的建立被引量：2
- 2009年
- 目的构建Livin shRNA真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的宫颈癌siha细胞系。方法合成Livin基因干扰序列并定向插入到RNA干扰(RNAi)真核表达载体pGenesil-1质粒,通过测序进行鉴定。干扰质粒经脂质体Lipofectamine 2000介导转染siha细胞,经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系。RT-PCR检测所筛选克隆Livin mRNA的转录水平。结果测序证明Livin干扰序列及读码框完全正确,干扰质粒稳定转染的siha细胞在倒置荧光显微镜下呈明亮绿色荧光。RT-PCR结果显示Livin shRNA序列对Livin mRNA有较好的抑制效果。结论成功构建了Livin shRNA真核表达载体,Livin shRNA质粒稳定转染的siha细胞系的建立为进一步研究Livin在宫颈癌细胞中的作用奠定了基础。
- 于利利王泽华
- 关键词：LIVIN基因RNA干扰转染SIHA细胞
