陈莹
- 作品数:8 被引量:54H指数:3
- 供职机构:石河子大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金:兵团博士基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 简易经济的肝星状细胞的分离培养方法被引量:1
- 2006年
- 为建立一种简易、经济的肝星状细胞(hepatic Stellate Cell,HSC)分离方法,为肝纤维化研究提供一种细胞模型.采用胶原酶、链霉蛋白酶灌注肝脏,单层密度梯度离心方法分离HSC.Desmin免疫组化染色鉴定.HSC的得率为1×10^ 7~3×10 ^7,纯度为90%以上.该方法简化了HSC的分离过程,简单、经济,适合广泛开展.
- 褚云香郑勇黄延红王明远裴学莲陈莹
- 关键词:肝星状细胞
- 大鼠反义转化生长因子βRII/PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒的构建及鉴定被引量:2
- 2006年
- 构建大鼠反义转化生长因子βRⅡ/PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒。查阅文献,采用两对套式引物,运用逆转录巢式PCR技术扩增TGFβRⅡ片段并经测序鉴定,双酶切纯化PCR产物及PCDNA3.1(+),再将TGFβRⅡ反向插入PCDNA3.1(+)线性质粒,即构建成TGFβRⅡ/PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒。将反义质粒转染感受态细胞JM-109,筛选阳性克隆行双酶切鉴定及DNA测序分析证实反义TGFβRⅡ/PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒构建成功。从而为下一步抗肝纤维化基因治疗研究奠定基础。
- 陈莹郑勇周婷徐丽红
- 关键词:反义肝纤维化
- 反义TβRI对实验性大鼠肝纤维化的影响被引量:2
- 2007年
- 目的:观察反义转化生长因子βI型受体真核表达质粒对实验性大鼠肝纤维化的影响。方法:构建大鼠反义真核细胞表达质粒,导入大鼠肝纤维化模型体内,通过Ⅰ型胶原的免疫组化以及VG染色观察两种反义质粒联合作用对大鼠肝纤维化的影响。结果:反义TβRI表达质粒可减少受损肝脏中Ⅰ型胶原的沉积(P<0.05),并可使受损肝脏的病理形态有一定改善(P<0.05)。结论:反义TβRI真核表达质粒对肝纤维化的发展有一定的干预作用。
- 徐丽红郑勇周婷李睿孙侃常向云陈卫刚陈莹
- 关键词:反义肝纤维化
- 诱导型血红素氧合酶在腹泻型肠易激综合征患者中的表达被引量:3
- 2005年
- 本研究旨在通过灌注导管测压仪和免疫组化技术,检测24例腹泻型肠易激综合征患者(diarrhea predominantirritable bowel syndrome,D-IBS)及15例对照组的直肠压力、直肠对容量刺激的感觉阈值和结肠粘膜中诱导型血红素氧合酶(inducible heme oxygenase,HO-1)表达,以探讨HO-1在D-IBS发病机制中的作用。肠道测压结果显示腹泻型IBS患者的静息压、最大自主收缩压和排便压与对照组比较差异无显著性(P>0.05),但初始感觉阈值、排便阈值和最大耐受阈值明显低于对照组(P<0.01);HO-1在腹泻组IBS患者结肠粘膜中的表达也明显强于对照组(P<0.01)。因此HO-1在腹泻型IBS患者结肠粘膜中的表达异常,表明一氧化碳(carbon monoxide,CO)在腹泻型IBS的发病机制中可能起重要作用。
- 朱曙光郑勇孔维陈莹
- 关键词:肠易激综合征血红素氧合酶-1胃肠动力
- 糖尿病便秘患者肛门直肠动力学的研究被引量:40
- 2006年
- 目的研究糖尿病性便秘患者的肛门直肠动力学改变。方法2005年3月至2005年9月,石河子大学医学院附属第一医院消化内分泌科采用直肠测压法测定20例糖尿病便秘患者和15例健康志愿者的肛门直肠压力、直肠对容量刺激的感觉阈值。结果糖尿病便秘患者的静息压、最大自主收缩压和排便压与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但初始感觉阈值、排便阈值和最大耐受阈值明显高于对照组(P<0.05)。结论糖尿病便秘患者发病可能与结肠慢传输及直肠的低敏感、高耐受感觉有关。
- 孔维孙侃朱曙光陈莹沈耿
- 关键词:糖尿病便秘肛门直肠动力学
- 鼠反义转化生长因子βⅠ型受体真核表达质粒的构建与鉴定被引量:3
- 2006年
- 目的:构建鼠反义转化生长因子βⅠ型受体(TβRⅠ)基因pcDNA3.1(+)真核表达质粒,为进一步研究通过TβRⅠ干预肝纤维化的发生发展提供实验基础.方法:将取冰冻保存的大鼠肝组织,应用TRIzol法提取总RNA,琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性,并用紫外分光核酸蛋白分析仪测定RNA浓度和纯度.使用一步法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂盒获得目的基因TβRⅠcDNA片段,采用巢式PCR扩增TβRⅠ基因片断.用CaCl2法诱导感受态细胞.将真核表达载体pcDNA3.1(+)在多克隆位点处用EcoRⅠ、XholⅠ双酶切线性化,切胶纯化回收;TβRⅠ基因片断双酶切后切胶纯化回收;将纯化回收的pcDNA3.1(+)线性化载体和TβRⅠ基因片段定向及反向连接,构建以pcDNA3.1(+)为载体的反义TβRⅠ基因真核表达质粒.转化JM109大肠杆菌.酶切证实的阳性克隆行测序分析.结果:琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性,见28S,18S条带完整,而且28S条带亮度为18S的1倍左右,认为RNA完整性良好;并用紫外分光核酸蛋白分析仪测定RNA纯度A260/A280=1.9150,认为RNA纯度良好;RNA浓度为770mg/L.阳性克隆质粒经双酶切后行10g/L琼脂糖凝胶电泳在DNAMarker430bp和线性化纯化后pcDNA3.1(+),5.3kb附近可见两条明显条带,与所需目的片段大小相符,证实为阳性克隆,重组质粒构建成功.DNA测序结果与预期目的片段序列一致.结论:鼠反义TβRⅠ/pcDNA3.1(+)真核表达重组质粒构建成功.
- 徐丽红郑勇周婷李睿陈莹
- 关键词:反义质粒
- 反义真核细胞转化生长因子βⅠ型受体与反义基质金属蛋白酶组织抑制因子-1联合作用对大鼠肝纤维化的影响被引量:4
- 2007年
- 目的观察反义转化生长因子βⅠ型受体(TβRI真核表达质粒与反义基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)真核表达质粒联合作用对实验性大鼠肝纤维化的影响。方法构建大鼠反义真核细胞表达质粒,导入大鼠肝纤维化模型体内,通过I型胶原的免疫组织化学以及苦味酸-酸性品红染色观察两种反义质粒联合作用对大鼠肝纤维化的影响,用目标积分吸光度(A)值表示各实验组动物肝组织中蛋白的表达量。结果反义TβRI疗组、反义TβRI反义TIMP-1治疗组、反义TIMP-1治疗组、pcDNA3.1(+)空质粒对照组、模型对照组、正常对照组TβRI白的A值分别为:(2.11±0.88)×10^5、(1.06±0.57)×10^5、(3.46±1.14)×10^5、(5.66±2.54)×10^5、(5.19±1.22)×10^5和(0.38±0.27)×10^5;TIMP-1蛋白的A值分别为:(1.10±0.22)×10^5、(0.30±0.12)×10^5、(0.65±0.15)×10^5、(2.05±0.36)×10^5、(1.97±0.28)×10^5和(0.10±0.12)×10^5;I型胶原的蛋白表达的A值分别为:(4.37±1.30)×10,、(0.90±0.32)×10^5、(3.40±0.91)×10^5、(6.90±1.61)×10^5、(7.34±1.68)×10^5和(0.41±0.21)×10s。反义TIMP-1治疗组TIMP-1蛋白表达量显著降低(P〈0.05),反义TβRI疗组TβRI白表达量显著降低(P〈0.05),两种反义质粒可有效抑制相应蛋白的表达;反义TIMP-1表达质粒与反义TβRI达质粒均可减少受损肝脏中I型胶原的沉积(P〈0.05),联合应用可进一步减少受损肝脏中I型胶原的沉积(P〈0.01)。在病理形态学方面的观察,反义TIMP-1表达质粒与反义TβRI达质粒均可使受损肝脏的病理形态有一定改善,联合应用可使受损肝脏的病理形态得到进一步的改善。结论反义TIMP-1表达质粒与反义TβRI达质粒对肝纤维化的发展均有一定的干预作用,联合作用可产生更有�
- 郑勇徐丽红李睿周婷孙侃常向云陈卫刚陈莹
- 关键词:反义表皮生长因子金属蛋白酶组织抑制因子-1
- 转化生长因子β_1与肝纤维化的基因治疗
- 2005年
- 陈莹郑勇
- 关键词:转化生长因子Β1肝纤维化基因治疗