金铭
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同剂量重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体注射液人体单次给药的安全性被引量：4
- 2013年
- 目的观察不同剂量重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体(recombinated human rabies immunoglobin,rhRIG)注射液人体单次给药的安全性。方法采用随机、单盲、安慰剂平行对照的方法,对成功筛选的48名健康受试者按照随机数字表进行分组,共分低、中、高3个rhRIG单次给药组(10、20、40 IU/kg),每组12人,每个剂量组均按3∶1设1个安慰剂(rhRIG的赋形剂)平行对照组,每组4人,依次经上臂三角肌(≤2 ml)、臀大肌(≤10 ml)和大腿外侧肌肉(剩余药液)进行肌肉注射。分别在筛选期(入组用药前14 d内)、用药后7、14和42 d记录不良事件(adverseevent,AE)、严重不良事件(serious adverse events,SAE)、局部反应、全身反应的发生情况,并进行生命体征、实验室(血常规、尿常规、血生化)、心电图、胸片、腹部B超检查。结果不同剂量rhRIG组中共发生7例次AE,分别为谷氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶和谷氨酰转肽酶升高、血白细胞下降、上呼吸道感染、宫外孕,其中宫外孕判断为SAE。上述AE均判断与试验药物无关或可能无关。对照组未发生任何AE/SAE。所有受试者用药后生命体征均未见异常改变。结论受试者单次肌肉注射10～40 IU/kg rhRIG后耐受性良好。
- 王美霞贾敏金铭韩靖段瑾王立清金荣华李宁姚家琳李玉凤张静魏敬双赵伟
- 关键词：狂犬病狂犬病病毒药物耐受性
- 系统进化树分析慢性丙型肝炎患者HCV基因分型被引量：2
- 2012年
- 目的了解浙江省慢性丙型肝炎患者HCV基因型分布情况。方法参考Ohno的分型方法,采用巢式RT-PCR法扩增抗HCV抗体阳性患者的血清样品HCV核心(core)基因部分区段(-12nt～+343nt),克隆并测序[1];以Clustalw软件对所克隆片段进行系统进化树分析并分型。结果在60份HCV抗体阳性血清中,HCV检出率为55%(33例);系统进化树分析提示共有1b、2a、3a、3b、6a 5个不同的基因型,以1b、3b和2a基因型为主,其中1b阳性率为52%(17例)。结论浙江省慢性HCV感染者中HCV基因型呈现出以1b、3b和2a为主、多基因型存在的特点。
- 王美霞徐斌段瑾金铭
- 关键词：肝炎病毒丙型基因型系统进化树
- La、hVAP-33、eIF2Bγ和HCV IRES特异性小干扰RNA抑制HCV的复制和表达
- 2012年
- 目的证实La自身抗原、33kD人类囊相关膜蛋白（hVAP-33）和真核细胞翻译起始因子第3亚单位（eIF2B7）是HCV在细胞内的协同感染因子，通过抑制Huh7细胞内这些因子的表达可抑制HCV复制和表达。方法分别设计合成3条HCV内部核糖体进入位点（IRES）的小干扰RNA（siRNAs），转染HuhT-HCV细胞后筛选出其中沉默效率最高的1条。以HCV假病毒感染Huh7细胞后48h，分别以上述HCVIRKSsiRNA和之前试验中已经筛选出的La、hVAP-33和eIF2BY特异性siRNAs单独或者不同组合转染Huh7-HCV细胞，利用荧光定量PCR方法检测HCV核心基因并计算△ACT值（相对定量法），比较不同siRNAs及组合对目的基因沉默的效率; 同时以Westemblot观察HCV核心蛋白表达量的差异。结果La自身抗原与IRKS特异性siRNA共转染对HCV表达的抑制效率最高，使HCV核心蛋白基因相对表达量下降了约41％；4种基因特异性siRNAs对HCV在Huh7细胞中的复制和表达均有不同程度的抑制作用，La、hVAP-33和eIF2B7特异性siRNAs分别与IRES siRNA联合均较其单独转染对目的基因的抑制效率高。结论可以认为La自身抗原、hVAP-33和eIF2BY是HCV在宿主细胞内的协同感染因子，通过对Huh7细胞内协同感染因子及HCVIRES基因沉默后可以显著减少HCV的表达。
- 王美霞徐斌段瑾傅晓晴金铭
- 关键词：内部核糖体进入位点
- HCV协同感染因子La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白和真核细胞翻译起始因子第三亚单位特异性siRNAs的筛选
- 2012年
- 目的筛选Huh7细胞内La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白(hVAP-33)和真核细胞翻译起始因子第三亚单位(eIF2Bgamma)的特异性siRNAs。方法根据Genebank中的序列设计3种基因的特异性引物,在Huh7细胞中通过荧光定量PCR方法检测上述3种分子;根据siRNA设计原则针对每种基因设计合成3条siRNAs;分别将不同序列siRNA转染Huh7细胞,利用荧光定量PCR方法并计算ΔΔCT值筛选出针对每种基因抑制效率最高的一条siRNA。结果荧光定量PCR方法检测到了上述3种分子的存在;每种基因的3条不同siRNA对相应基因具有不同程度的沉默作用,通过ΔΔCT值的计算找出其中效率最高的一条。结论 Huh7细胞内可以检测到La自身抗原、hVAP-33和eIF2Bgamma基因,其特异性siRNAs可以沉默相应基因表达。
- 王美霞金铭段瑾傅晓晴徐斌
