郑乐
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：浙江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 念珠藻Fe-SOD基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2006年
- 根据低等物种Fe-SOD核酸序列设计简并引物,以念珠藻基因组为模板,扩增获得了念珠藻Fe-SOD基因.将此基因重组至原核表达载体pET22b(+),构建成工程菌pET-SOD,并转化至大肠杆菌宿主.异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得Fe-SOD蛋白分子量约为28 kD,占全菌蛋白的78%,并以包涵体形式表达.经Ni2+亲和层析柱纯化后,目的蛋白的SOD比活力达1 100 U/mg,在紫外可见光谱中表现出金属Fe的特征峰.肿瘤细胞共培养试验表明,此Fe-SOD具有一定的抗SPC-A-1肺腺癌细胞增殖的能力.
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- 关键词：念珠藻超氧化物歧化酶(SOD)抗肿瘤活性
- 肺腺癌靶向性超氧化物歧化酶的构建及功能分析被引量：2
- 2006年
- 临床上,超氧化物歧化酶(SOD)的低肿瘤细胞定位能力限制了其在抗肿瘤领域的广泛应用,这一直是国内外学者们试图解决的难点.研究中,以基因工程方法连接念珠藻Fe-SOD(iron-superoxidedismutase)基因和抗SPC-A-1肺腺癌LC-1ScFv(singlechainFv)基因,并融合表达获得了SOD-ScFv融合蛋白.纯化后SOD-ScFv表现出SOD和ScFv的双重活性.SPC-A-1肺腺癌细胞中,融合蛋白的异硫氰酸荧光素(FITC)染色追踪和自由基含量分析表明,SOD-ScFv具备识别SPC-A-1肺腺癌细胞、透膜并清除胞内自由基的功能,最终达到抑制肿瘤细胞生长的目的.研究提出的靶向抗肿瘤机制将克服临床上SOD无目标趋向性和难于进入实体瘤的两大应用局限性,并提供了一种利用LC-1ScFv来靶向投递抗肿瘤药物的思路.
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- 关键词：FE-SOD靶向治疗
