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人乙醛脱氢酶2基因在毕赤酵母SMD1168中的表达研究被引量：6: 2010年; 目的得到一株产人乙醛脱氢酶2(acetaldehyde dehydrogenase-2,ALDH2)的重组毕赤酵母菌株,优化其发酵条件以满足生产和科研需求。方法将ALDH2基因整合到质粒pPIC9K,构建重组表达载体pPIC9K-ALDH2,将重组表达质粒pPIC9K-ALDH2经电转化到毕赤酵母SMD1168中,转化子经MD平板筛选后,用G418筛选多拷贝重组子,测序鉴定。通过改变诱导温度、pH、初始OD值、甲醇浓度等诱导条件,对SMD1168(pPIC9K-ALDH2)发酵的条件进行优化。结果ALDH2cDNA整合到毕赤酵母基因组中,得到SMD1168(pPIC9K-ALDH2);获得最佳的诱导表达优化条件:在28℃、pH=7.0、诱导初始OD600=12、每隔24h添加1.5%甲醇、转速为300r/min,发酵所产生的人ALDH2酶活可达到0.115U/ml,相对较高。结论以蛋白酶缺陷型毕赤酵母SMD1168为宿主,分泌表达质粒pPIC9K为载体,能够成功构建重组子SMD1168(pPIC9K-ALDH2)。; 黄锟赵玉凤赵锦雷明科林宏楠王存文吴元欣; 关键词：毕赤酵母醛脱氢酶乙醛基因

按毕赤酵母偏爱密码子设计人乙醛脱氢酶2序列: 本发明涉及一种基因序列。按毕赤酵母偏爱密码子设计人乙醛脱氢酶2序列，其特征在于：按照毕赤酵母偏好性设计的DNA分子，该分子编码具有与人乙醛脱氢酶2基因gene ID 217编码的蛋白在氨基酸水平相同的核苷酸序列。所述的按...; 赵玉凤吴元欣雷明科邓凡池汝安黄锟赵锦; 文献传递

人乙醛脱氢酶2基因在毕赤酵母中的高效表达: 乙醛脱氢酶（Aldehyde dehydrogenase，ALDH）是人体乙醇代谢的关键酶之一，人体内乙醇由乙醇脱氢酶（Alcohol dehydrogenase，ADH）氧化为乙醛，乙醛在ALDH的作用下氧化为乙酸，并...; 赵锦; 关键词：乙醛脱氢酶毕赤酵母摇瓶发酵高密度发酵; 文献传递

一株重组毕赤酵母菌株的应用: 本发明涉及一种基因工程重组微生物的应用。一株重组毕赤酵母菌株的应用，其特征在于为一株巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115－07ALDH2菌株应用于解酒、保肝。本发明具有解酒、保肝效果好的特点。; 吴元欣赵玉凤雷明科邓凡黄锟赵锦王红波王存文; 文献传递

人乙醛脱氢酶2基因在毕赤酵母中的高效表达被引量：7: 2010年; 去除自行构建的质粒pPIC9K-07ALDH2的信号肽(α-Factor)得到质粒pPIC9K-ALDH2-delsign,采用电转化方法将该质粒转化到Pichia pastorisSMD1168中构建得到能在胞内高效表达人乙醛脱氢酶2(ALDH2)的基因工程菌株Pichia pastorisSMD1168(pPIC9K-ALDH2-delsign)。利用该重组毕赤酵母摇瓶发酵得到的发酵液的人ALDH2的酶活为0.315 U.mL-1,明显高于胞外表达时人ALDH2的酶活;经过亲和色谱分离纯化后的人ALDH2酶液的酶活为0.944 U.mL-1。; 赵锦赵玉凤黄锟雷明科吴元欣刘洋; 关键词：毕赤酵母乙醛脱氢酶

一株重组毕赤酵母菌株及其筛选方法: 本发明涉及一种基因工程重组微生物及其筛选方法。一株重组毕赤酵母菌株，其特征在于为一株巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115-07ALDH2 CCTCC NO：M208266。本发明具有解酒、保肝效果好...; 赵玉凤吴元欣雷明科邓凡王存文黄锟赵锦; 文献传递

按毕赤酵母偏爱密码子设计人乙醛脱氢酶2序列的方法: 本发明涉及一种设计基因序列的方法。按毕赤酵母偏爱密码子设计人乙醛脱氢酶2序列的方法，其特征在于：按照毕赤酵母偏好性设计的DNA分子，该分子编码具有与人乙醛脱氢酶2基因gene ID 217编码的蛋白在氨基酸水平相同的核苷...; 赵玉凤吴元欣雷明科邓凡池汝安黄锟赵锦; 文献传递

一株重组毕赤酵母菌株的应用: 本发明涉及一种基因工程重组微生物的应用。一株重组毕赤酵母菌株的应用，其特征在于为一株巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115-07ALDH2菌株应用于解酒、保肝。本发明具有解酒、保肝效果好的特点。; 吴元欣赵玉凤雷明科邓凡黄锟赵锦王红波王存文; 文献传递

一株重组毕赤酵母菌株及其筛选方法: 本发明涉及一种基因工程重组微生物及其筛选方法。一株重组毕赤酵母菌株，其特征在于为一株巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115－07ALDH2CCTCC No：M208266。本发明具有解酒、保肝效果好的...; 赵玉凤吴元欣雷明科邓凡王存文黄锟赵锦; 文献传递

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赵锦