许华林
- 作品数：9 被引量：33H指数：3
- 供职机构：北京世纪坛医院更多>>
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- 膀胱癌移行细胞系双向电泳技术的建立
- 背景与目的:膀胱癌是泌尿系统中最常见的肿瘤,多数为移行上皮细胞癌,具有增长迅速、早期转移等特点.目前公开的数据库中尚未见到膀胱移行上皮癌双向电泳参考图谱及其蛋白表达谱.
目的:是建立高分辨率的移行上皮癌细胞PU...
- 靳胜许华林张敏张曼
- 关键词：双向电泳膀胱移行上皮癌蛋白质组
- 文献传递
- 膀胱移行上皮癌细胞系双向电泳技术的建立
- 2005年
- 目的建立高分辨率的移行上皮癌细胞PUMC双向凝胶电泳图谱,并初步分析其蛋白质表达情况。方法用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离膀胱移行上皮癌细胞PUMC细胞总蛋白,凝胶考马斯亮蓝染色,然后利用GS-800 Calibrated Densitometer凝胶成像系统获取图像,用 PDQuest2D分析软件对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性进行系统分析。结果获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱。结论建立膀胱癌移行上皮癌细胞PUMC的双向电泳参考图谱,为进一步构建其蛋白质表达数据库提供了基础。
- 靳胜许华林张敏张曼
- 关键词：双向电泳膀胱移行上皮癌蛋白质组
- 以双向电泳为基础的肺癌组织差异蛋白分析策略被引量：1
- 2009年
- 目的优化肺鳞癌组织双向电泳方法,进行蛋白图谱差异分析。方法收集癌组织以及癌外周组织标本,通过优化参数和方法,应用双向电泳技术分离组织总蛋白,比较差异蛋白。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质指纹图谱(PMF),并进一步检索数据库。结果获得了分辨率高、重复性好的双向电泳图谱,得到了若干与细胞增生、分化、周期调控或肿瘤发生有关的蛋白。结论建立了肺鳞状细胞癌组织的双向电泳方法。
- 靳胜张曼张秀敏许华林张敏郝林
- 关键词：双向电泳蛋白质组
- 双向电泳技术在筛选膀胱癌特异标志蛋白中的应用被引量：3
- 2006年
- 目的建立高分辨率的膀胱移行上皮癌不同时期的双向凝胶电泳图谱,并初步分析其蛋白质表达情况,寻找其差异表达蛋白,为寻找癌变相关蛋白奠定实验基础。方法用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离膀胱移行上皮癌不同分期的组织,凝胶考马斯亮蓝染色,然后利用GS-800Calibrated Densitometer凝胶成像系统获取图像,用PDQuest2D分析软件对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性的系统分析,寻找差异表达蛋白。在此基础上应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)得到相应的肽质指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质。结果获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱,三块胶的平均蛋白质匹配率达76%,蛋白质点在位置上有较好的重复性,不同胶间的蛋白质点在等电聚焦IEF方向偏差是(0·98±0·26)mm,SDS-PAGE方向偏差是(1·23±0·22)mm,并且得到了若干与细胞增生、分化、周期调控信号转导或肿瘤发生有关的蛋白质,例如SFN,热休克蛋白-27等。结论为进一步探讨癌变机理及筛选其特异性分子标志物打下方法学基础。
- 靳胜张曼张秀敏许华林张敏郝林
- 关键词：膀胱肿瘤蛋白质组
- 高糖刺激血管平滑肌细胞血管内皮生长因子的表达被引量：3
- 2002年
- 张曼许华林张敏安成周爱儒
- 关键词：高糖刺激血管平滑肌细胞血管内皮生长因子病理
- 应用cdc6基因早期无创快速检查膀胱肿瘤
- 张曼安成张秀敏张敏郝林许华林靳胜白焱
- 细胞的有丝分裂是从DNA复制开始， CDC6(cell divide cycle 6)是DNA复制的关键启动蛋白，肿瘤细胞中由于DNA的无限复制导致细胞增殖的不可控性 。因此推测CDC6基因及其蛋白的变化可能直接反应了细...
- 关键词：
- 关键词：膀胱癌
- 姜黄素逆转HL60/ADR及MCF-7/ADR的多药耐药研究被引量：13
- 2010年
- 目的观察姜黄素对HL60/ADR以及MCF-7/ADR多药耐药(MDR)的逆转。方法用MTT法观察细胞的生长抑制效应,流式细胞仪检测凋亡以及细胞内阿霉素浓度,RT-PCR以及Western Blot检测Mdr1、MRP基因和Bcl-2蛋白表达。结果加入姜黄素后耐药细胞系逆转指数分别为4.18(HL60/ADR)和3.39(MCF-7/ADR),与单纯应用阿霉素相比差异有统计学意义;流式细胞仪检测显示有明显的促凋亡作用,耐药细胞系内的ADR浓度明显升高;RT-PCR以及Western Blot检测发现姜黄素对上述耐药细胞系的MRP以及Bcl-2表达有抑制作用。结论姜黄素可能作为多药耐药的逆转剂应用于MDR逆转。
- 靳胜陈书恩张曼张敏张秀敏郝林许华林
- 关键词：姜黄素肿瘤多药耐药MDR1基因MRP基因
- 细胞分裂周期蛋白基因6半定量检测方法的条件建立
- 目的: 以beta-actin为内参基因,细胞分裂周期蛋白基因6(CDC6)为检测基因,探索半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)体系在检测CDC6基因时的条件建立.
方法:以EJ膀胱癌细胞株为标本,提取总R...
- 张曼安成郝林许华林张敏张秀敏
- 关键词：逆转录聚合酶链反应半定量检测膀胱癌
- 文献传递
- 细胞分裂周期蛋白基因6半定量检测方法的条件建立被引量：13
- 2003年
- 目的 以beta actin为内参基因 ,细胞分裂周期蛋白基因 6 (CDC6 )为检测基因 ,探索半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)体系在检测CDC6基因时的条件建立。方法 以膀胱癌细胞株为标本 ,提取总RNA ,合成cDNA ,优化PCR反应条件 ,建立针对CDC6的半定量PCR反应体系。结果 通过对实验参数的优化 ,确定适宜的反应体系 :退火温度 5 8℃、Mg2 + 浓度 2 0mmol/L、循环次数 37次 ;批内、批间变异系数分别为 8 0 1%和 14 5 3% ,最小检测限为总RNA 0 0 5ng。通过重复性试验、敏感性试验和准确性实验分析 ,该方法具有良好的重复性、准确性和敏感性。结论 将内参基因与CDC6目的基因共同扩增 ,选择适当条件 ,可直接获得目的基因CDC6的mRNA的相对表达量。
- 张曼安成郝林许华林张敏张秀敏
- 关键词：逆转录聚合酶链反应肿瘤
