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前列腺增生的尿液蛋白质组学分析被引量：8: 2009年; 目的在临床前列腺特异性抗原(prostate-specific antigen,PSA)升高的情况下,特别是前列腺特异性抗原在4μg/L至10μg/L时,前列腺增生和前列腺癌的鉴别诊断很难,本实验对前列腺增生患者、前列腺癌患者和健康对照的尿液蛋白质双向凝胶电泳图谱进行对比分析,旨在较全面的分析其成分,为临床鉴别诊断提供依据。方法用丙酮沉淀蛋白的方法对前列腺增生患者、前列腺癌患者和健康对照尿液中的蛋白质进行浓缩,再用双向凝胶电泳技术分离蛋白质样品,CANON G9照相获取图像,PDQuest2D分析软件对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性的系统分析,寻找差异表达蛋白质。在此基础上用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALIDI-TOF)进行肽指纹图谱鉴定,并进行生物信息学分析。结果通过前列腺增生、前列腺癌和健康对照尿液双向凝胶电泳图的对比分析,获得前列腺增生差异蛋白质点,选取其中20个做质谱和生物信息学分析,最终分离鉴定出血清白蛋白、视黄醇结合蛋白前体等17种有效蛋白。结论通过实验条件的优化,应用蛋白质组学方法分析前列腺增生患者尿液蛋白质的组成成分是可行的,为研究前列腺增生患者尿液检测特异标志物提供了基础资料,为今后鉴别前列腺增生和前列腺癌提供了有益的依据,同时也为解决临床误诊难题提供了思路。; 赵旭宏田野靳胜王文营张曼; 关键词：双向凝胶电泳蛋白质组学肽指纹图谱前列腺增生

膀胱癌多药耐药细胞株Pumc-91/ADM的建立及其生物学特性评价被引量：5: 2009年; 目的多药耐药(multidrug-resistance,MDR)是肿瘤治疗的主要障碍。为探讨体外肿瘤MDR的方法,本研究建立膀胱移行上皮癌多药耐药细胞株Pumc-91/ADM,并研究其生物学特性。方法以人膀胱移行上皮癌细胞株Pumc-91为研究对象,应用阿霉素(ADM)浓度梯度递增法体外诱导建立人膀胱移行上皮细胞癌Pumc-91细胞的多药耐药细胞株Pumc-91/ADM。观察细胞的生长规律,用MTT法检测多药耐药性,流式细胞仪检测其生长周期及细胞内药物ADM荧光强度,反转录RT-PCR半定量检测耐药相关基因的mRNA表达量。结果Pumc-91/ADM与亲本细胞Pumc-91相比其生长速度减慢,倍增期延长,细胞异型性明显,巨细胞增多。MTT法检测显示Pumc-91/ADM较Pumc-91细胞对ADM的耐受度提高了10倍,且对氨甲蝶呤、顺铂、表阿霉素、长春新碱均有不同程度的交叉耐药性。流式细胞术检测细胞内荧光强度Pumc-91/ADM较Pumc-91细胞明显降低,细胞周期中S期细胞减少,G1、G2期细胞增多。RT/PCR检测耐药相关基因结果显示耐药细胞株谷胱甘肽-S-转移酶基因表达明显高于亲本细胞。结论耐药株Pumc-91/ADM具有典型的多药耐药特点,可以为膀胱癌的多药耐药研究提供一个较好的体外研究模型。; 张敏靳胜张曼; 关键词：膀胱肿瘤细胞株阿霉素多药耐药

膀胱癌移行细胞系双向电泳技术的建立: 背景与目的:膀胱癌是泌尿系统中最常见的肿瘤,多数为移行上皮细胞癌,具有增长迅速、早期转移等特点.目前公开的数据库中尚未见到膀胱移行上皮癌双向电泳参考图谱及其蛋白表达谱. 目的:是建立高分辨率的移行上皮癌细胞PU...; 靳胜许华林张敏张曼; 关键词：双向电泳膀胱移行上皮癌蛋白质组; 文献传递

膀胱移行上皮癌细胞系双向电泳技术的建立: 2005年; 目的建立高分辨率的移行上皮癌细胞PUMC双向凝胶电泳图谱,并初步分析其蛋白质表达情况。方法用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离膀胱移行上皮癌细胞PUMC细胞总蛋白,凝胶考马斯亮蓝染色,然后利用GS-800 Calibrated Densitometer凝胶成像系统获取图像,用 PDQuest2D分析软件对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性进行系统分析。结果获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱。结论建立膀胱癌移行上皮癌细胞PUMC的双向电泳参考图谱,为进一步构建其蛋白质表达数据库提供了基础。; 靳胜许华林张敏张曼; 关键词：双向电泳膀胱移行上皮癌蛋白质组

利用蛋白质组学筛选新的肿瘤标志物: 对蛋白质的研究是人类生物研究的重要内容,近年来蛋白质组学及其相关技术发展迅速,日益成为研究热点。寻找新的肿瘤标志物是攻克癌症过程的一项重要工作,利用蛋白质组学进行差异研究,比较正常个体与病理个体之间蛋白表达差异从而寻找新...; 靳胜张曼; 文献传递

以双向电泳为基础的肺癌组织差异蛋白分析策略被引量：1: 2009年; 目的优化肺鳞癌组织双向电泳方法,进行蛋白图谱差异分析。方法收集癌组织以及癌外周组织标本,通过优化参数和方法,应用双向电泳技术分离组织总蛋白,比较差异蛋白。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质指纹图谱(PMF),并进一步检索数据库。结果获得了分辨率高、重复性好的双向电泳图谱,得到了若干与细胞增生、分化、周期调控或肿瘤发生有关的蛋白。结论建立了肺鳞状细胞癌组织的双向电泳方法。; 靳胜张曼张秀敏许华林张敏郝林; 关键词：双向电泳蛋白质组

膀胱癌患者尿液相关蛋白的筛选及TTR验证: 目的膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一。90%的膀胱肿瘤为移行细胞癌,治疗后5至15年内的复发率高达60%-85%。目前膀胱癌的主要诊断方法是膀胱镜检及尿细胞学检查,前者有创、费用昂贵、技术要求高,后者敏感性35%左右...; 雷婷赵旭宏靳胜张曼; 文献传递

双向电泳技术在筛选膀胱癌特异标志蛋白中的应用被引量：3: 2006年; 目的建立高分辨率的膀胱移行上皮癌不同时期的双向凝胶电泳图谱,并初步分析其蛋白质表达情况,寻找其差异表达蛋白,为寻找癌变相关蛋白奠定实验基础。方法用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离膀胱移行上皮癌不同分期的组织,凝胶考马斯亮蓝染色,然后利用GS-800Calibrated Densitometer凝胶成像系统获取图像,用PDQuest2D分析软件对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性的系统分析,寻找差异表达蛋白。在此基础上应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)得到相应的肽质指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质。结果获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱,三块胶的平均蛋白质匹配率达76%,蛋白质点在位置上有较好的重复性,不同胶间的蛋白质点在等电聚焦IEF方向偏差是(0·98±0·26)mm,SDS-PAGE方向偏差是(1·23±0·22)mm,并且得到了若干与细胞增生、分化、周期调控信号转导或肿瘤发生有关的蛋白质,例如SFN,热休克蛋白-27等。结论为进一步探讨癌变机理及筛选其特异性分子标志物打下方法学基础。; 靳胜张曼张秀敏许华林张敏郝林; 关键词：膀胱肿瘤蛋白质组

鼻内翻性乳头状瘤与鼻息肉和对照组鼻黏膜组织差异蛋白分析被引量：1: 2010年; 目的应用蛋白质组学技术，分析比较鼻内翻性乳头状瘤（nasalinvertedpapilloma，NIP）与鼻息肉、对照组鼻黏膜组织的差异蛋白质，筛选具有特异性表达的蛋白。方法分别采集3例NIP组织、3例鼻息肉组织以及3例单纯鼻中隔偏曲患者（对照组）的中鼻甲黏膜组织标本，应用双向凝胶电泳（two—dimensionalgelelectrophoresis，2-DE）技术分离各组织的总蛋白质，利用GS一800CalibratedDensitometer凝胶成像系统获取图像，识别差异表达蛋白质点，查询数据库，鉴定差异表达蛋白质。结果鉴定了6个NIP与鼻息肉组织有明显差异表达的蛋白质点，分别是半乳糖凝集素1、锰-超氧化物歧化酶、半乳糖凝集素7、曲古抑菌素A、抑制素、转铁蛋白。这6个蛋白质点在NIP中的表达均明显增强。结论应用蛋白质组学研究方法可以对鼻黏膜组织进行差异蛋白分析，鉴定出6个差异表达蛋白质可能与NIP的发病相关。; 孟庆书靳胜张秋航张曼; 关键词：鼻肿瘤乳头状瘤内翻鼻息肉鼻黏膜

大肠癌患者血清中sIL-2R、IL-8水平变化及其意义被引量：5: 2008年; 目的:探讨sIL-2R、IL-8在大肠癌患者术前术后血清中表达及临床意义.方法:双抗体夹心ELISA法检测28例大肠癌患者的sIL-2R、IL-8血清水平;并同时检测大肠息肉患者17例和健康人25例作为对照组.结果:大肠癌患者血清中sIL-2R、IL-8含量明显高于对照组以及大肠息肉组(180.1±83.22 vs 61.3±12.12,52.3±11.21;3.09±0.21 vs 2.49±0.19,2.33±0.18,均P<0.001),手术后显著下降,其中根治组下降显著(80.2±40.31vs114.1±72.3,2.53±0.15 vs 2.81±0.17,均P<0.01),姑息组亦有所下降(242.1±60.3 vs 319.8±67.3,2.77±0.20 vs 3.67±0.19;均P<0.05).大肠癌患者血清sIL-2R、IL-8变化与分化程度呈正相关.结论:动态监测sIL-2R、IL-8的血清表达量有助于临床进行疗效评价,判断大肠癌患者的预后.; 靳胜赵有翼; 关键词：大肠癌可溶性白介素-2受体白介素-8 酶联免疫吸附法

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