蔡琴 作品数:11 被引量:25 H指数:3 供职机构: 上海大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市浦东新区卫生系统优秀青年医学人才培养计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 医药卫生 化学工程 文化科学 更多>>
含扩增内标的花生过敏原PCR检测方法 被引量:6 2013年 基于花生主要过敏原Ara h 1的基因序列设计引物,采用复合引物技术构建竞争性扩增内标,以157copies/PCR为内标添加量,建立含扩增内标的花生过敏原PCR检测方法。结果表明,该方法的检测灵敏度为0.1ng DNA,特异性良好;将该方法应用于9种食品的花生过敏原成分检测,结果与标签标识一致,表明该方法具有一定的应用价值。 蔡琴 张文举 陈沁关键词:花生 PCR 扩增内标 花生过敏原Ara h2.02原核表达方法条件的研究 被引量:3 2015年 将重组质粒pET-32a(+)-Arah2.02转化表达宿主菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达,SDS—PAGE电泳分析,结果显示表达的蛋白大小约为38kDa。进一步用通用His标签抗体进行Western Blotting检测,结果表明成功克隆表达了花生过敏原Arah2.02。为获得较多的重组蛋白Arah2.02,分别对IPTG浓度、摇床转速、诱导温度和时间等条件进行选择,确定最佳条件为:IPTG浓度0.3mmol/L,摇床转速220r/min,诱导温度37℃,诱导时间2h。 蔡琴 张文举 陈沁关键词:花生 重组蛋白 ARA H 原核表达 花生内源过敏原蛋白Arah2的分离纯化及鉴定 被引量:5 2015年 Arah2蛋白是花生的主要过敏原蛋白之一,为获得高纯度的花生Arah2蛋白,以新鲜花生为原料,通过蛋白浸提、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析,十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)回收等方法分离得到目的蛋白,并运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI—TOF/MS)对其进行鉴定。结果表明:该方法可得到纯度较高的纯化蛋白;经质谱鉴定后确定该蛋白为Arah2蛋白,两个同种异型物分子量分别为18.5 kD(Arah2.01)和20.1kD(Arah2.02);层析柱分离和SDS—PAGE电泳回收的得率分别为31.4%和18.6%。 朱青青 张文举 蔡琴 陈沁关键词:花生 纯化 质谱 检测花生过敏原用扩增内标、其构建方法及其应用 本发明涉及一种检测花生过敏原用扩增内标、其构建方法及其应用。该扩增内标基因的序列为SEQIDNO.1所示的碱基序列。这预示了在DNA水平检测已深加工食品中所含的过敏原物质是可能的。采用本发明的扩增内标进行花生过敏原的PC... 蔡琴 陈沁 张文举 关潇 邓志瑞文献传递 充分发挥导师在理工科研究生实践育人中的主导作用 被引量:1 2013年 导师在指导理工科研究生实践育人中起着非常关键的作用。论文针对当前理工科研究生对自身实践能力培养不重视现象,通过将导师"请进来",提高导师对于研究生社会实践的重要性的思想认识、建立健全社会实践培养机制、优化社会实践培养方法,充分发挥导师在理工科研究生社会实践中的主导作用,提高理工科研究生的综合素质。 苏洁 蔡琴 高雅关键词:导师 理工科研究生 社会实践 德育 含扩增内标的花生过敏原PCR和Real-time PCR检测方法 基于花生主要过敏原Ara h 1的基因序列设计引物.采用复合引物技术构建竞争性扩增内标.以314 copies/PCR为内标添加量,建立了含扩增内标的花生过敏原PCR和Real-time PcR检测方法。结果表明,PCR... 蔡琴 关潇 张文举 陈沁关键词:花生 PCR 扩增内标 文献传递 COMT基因多态性与肠易激综合征发病的关系 被引量:1 2015年 肠易激综合征(IBS)是一种常见的功能性肠病,以腹痛或腹部不适为主要症状,排便后可改善,常伴有排便习惯改变,缺乏可解释症状的形态学和生物化学异常,无论是在发达国家还是发展中国家,IBS都是常见疾病,占用医疗资源多,临床缺乏明确有效的治疗方法,因此有必要探索其发病原因。 魏双琴 施建平 钟良 金怒云 蔡琴 张文举 陈沁关键词:肠易激综合征 基因多态性 COMT 排便习惯 功能性肠病 腹部不适 花生IAC-Q-PCR检测方法的建立及热处理对花生过敏原Ara h2的影响 张文举 朱青青 蔡琴 陈沁基于α-乳白蛋白基因序列的牛奶过敏原PCR检测 被引量:11 2013年 采用收集牛奶中脱落体细胞的方法提取牛奶DNA,针对牛奶过敏原蛋白α-乳白蛋白基因序列设计引物α-La-F/R,筛选适宜的实验条件,建立了检测牛奶过敏原的PCR方法。结果表明:PCR反应的最佳退火温度为56.5℃,引物浓度0.15μmol/L,循环数35,进一步实验表明该方法特异性良好,检测灵敏度可达到0.04ng DNA。将建立的PCR方法应用于10种食品的牛奶过敏原检测,实验结果与商品标示一致,表明该方法具有较高的准确性和可靠性,适用于实际商品中牛奶过敏原的检测。 关潇 蔡琴 陈沁关键词:Α-乳白蛋白 PCR 花生过敏蛋白Ara h2.02的原核表达 提取花生总RNA,用特异性引物,RT-PCR 扩增得到Ara h 2.02基因序列,将该序列克隆至pMD19-T Simple Vector中,构建重组质粒pMD19-T-Ara h 2.02,重组质粒进行双酶切鉴定并测... 蔡琴 关潇 朱青青 陈沁