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董金杰: 作品数：14 被引量：40H指数：4; 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划甘肃省科技支撑计划甘肃省中青年科技研究基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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稳定表达T_7RNA聚合酶的猪睾丸细胞系的建立被引量：2: 2012年; 根据GenBank中登录的T7RNA聚合酶基因参考序列,设计合成了1对特异性引物扩增对T7RNA聚合酶基因进行扩增,将测序正确的T7RNA聚合酶基因和真核表达载体pIRES2-EGFP双酶切后进行连接构建pIRES2-EGFP-T7RNA RNA质粒。再将构建正确的pIRES2-EGFP-T7RNA质粒经用脂质体法转染猪睾丸细胞,通过G418筛选和单细胞克隆化,同时构建pET-32a-RED原核表达质粒载体,用其检测T7启动子控制下的红色荧光蛋白的表达。结果表明,建立的ST/T7RNA细胞系经20次传代仍然能稳定表达T7RNA聚合酶。结果显示,成功建立能稳定表达T7RNA聚合酶的猪睾丸细胞系,为猪瘟病毒反向遗传操作平台奠定了基础。; 祁光宇刘萍刘斌王凡武发菊杜平董金杰黄银君牟克斌刘学荣

O型口蹄疫mRNA疫苗的研制: 口蹄疫是当今国际上最重要的动物传染病之一,能够侵染所有的偶蹄动物。疫苗免疫仍是防控口蹄疫的首要选择。由于口蹄疫病毒血清型多且容易发生变异,致使流行毒株和疫苗株之间抗原匹配性不高,影响疫苗免疫效力和疫病预防效果。mRNA疫...; 董金杰; 关键词：口蹄疫病毒免疫原性

用蔗糖密度梯度离心法检测与定量口蹄疫病毒抗原: 胞培养得到的O型口蹄疫抗原超滤浓缩，用蔗糖密度梯度离心法纯化，采用紫外检测方法检测各梯度区带抗原并收集各吸收峰。通过琼脂扩散沉淀试验做初步鉴定后，进一步用透射电子显微镜确定病毒抗原。结果表明，口蹄疫病毒146S抗原存在于...; 董金杰刘力宽牟克斌黄银君祁光宇刘学荣乔莉萍安芳兰董文教武发菊陈苗苗常艳燕; 文献传递

FMDV vp1基因在烟草中表达及转基因烟草的免疫效果被引量：1: 2005年; 通过三亲杂交法,构建克隆有阿克苏(Akesu/58) O 型口蹄疫病毒vp1 基因的双元表达载体pBin FMDVVP1。采用农杆菌介导法转化NC89烟草叶盘,经卡那霉素筛选,共获得49株抗性植株。对抗性植株总DNA进行目的基因的PCR检测,有40株阳性植株。对阳性植株总RNA进行目的基因的RT PCR检测,有21株阳性植株。将7株ELISA和Western blot检测阳性植株叶片提取物分别与弗氏佐剂乳化,在0、15、30 和45d 腹膜腔接种Balb/C小白鼠,于第4次免疫后第9d进行血清抗体检测;第12d用104SM50 LD的同源强毒进行攻击;攻毒后24h采血,通过乳鼠病毒血症试验判定攻击Balb/C小白鼠的发病和保护情况。结果表明:双元表达载体pBin FMDVVP1构建正确;vp1基因转入NC89烟草并获得表达;7组中有2组Balb/C小白鼠血清抗体呈阳性,攻毒保护率分别为100%和63%。证明2株转基因烟草表达的VP1蛋白具有较好的免疫原性,所免疫的2 组Balb/C小白鼠对同源强毒攻击有一定的抵抗能力。; 王宝琴张永光王小龙王永录潘丽王文秀董金杰吕建亮; 关键词：口蹄疫病毒烟草免疫

新型猪瘟疫苗的研究进展: 2010年; 文章对新型猪瘟疫苗的研究现状进行了概述,为进一步研制和开发猪瘟疫苗提供参考。; 董金杰刘学荣董文教刘萍安芳兰武发菊刘力宽牟克斌黄银君黄银君; 关键词：猪瘟病毒新型疫苗

口蹄疫疫苗抗原质量监测和成品效力检测研究进展被引量：2: 2017年; 口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染动物疫病,目前防治该病的主要手段仍是接种疫苗,因此疫苗质量是防治该病成功与否的关键。为防止不合格产品进入市场,需采取有效的质量监控方法对抗原质量和成品效力进行监测,本文就疫苗中间品和成品检测方法做一简述。; 董金杰陈苗苗王凡智晓莹牟克斌黄银君王超英张云德刘萍; 关键词：口蹄疫

亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其免疫活性初探: 本实验拟将口蹄疫病毒主要免疫原基因VP1和能非特异性增强免疫应答能力的白细胞介素-18(IL-18)基因,同时插入到真核表达载体,为口蹄疫新型分子疫苗研究探索新的思路.结果表明,疫苗pcDNAVI可引发机体产生体液免疫,...; 董金杰; 关键词：口蹄疫病毒真核表达载体分子疫苗核酸疫苗基因免疫; 文献传递

塞内卡病毒研究进展: 塞内卡病毒（Senecavirus A,SVA）作为猪水疱性疾病的新发病原体,已经在不同国家和地区迅速传播。它能引起与口蹄疫相似的临床症状,并导致严重的经济损失。近两年来,中国,巴西美国和报告的SVA病例不断增加。然而,...; 王会宝董金杰王超英吕宏亮; 关键词：免疫应答; 文献传递

口蹄疫灭活疫苗146S含量检测方法概述被引量：4: 2017年; 口蹄疫（Food and Mouth Disease,FMD）是由口蹄疫病毒（Food and Mouth Disease Virus,FMDV）引起的偶蹄类动物的急性、热性、接触性、烈性传染病。世界范围内预防口蹄疫发生的有效方法是疫苗免疫,疫苗生产过程中,各环节过程控制至关重要,其中准确定量完整的口蹄疫病毒粒子（146S）尤为关键,因为146S抗原的含量直接决定了口蹄疫灭活疫苗的质量,所以准确,快速,; 董金杰董金杰陈苗苗牟克斌王超英牟克斌; 关键词：口蹄疫病毒灭活疫苗 VIRUS 偶蹄类动物烈性传染病疫苗免疫

亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其免疫活性的初步分析被引量：1: 2005年; 提取亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒总RNA,用特异性引物通过RTPCR反应获得了约750bp的核酸片段,将其与pGEMTEasy载体连接,并转化大肠埃希氏菌JM109。重组质粒经PCR、酶切鉴定及测序,证明所克隆的片段含有完整的VP1基因;将重组质粒与表达载体pcDNA3.1(+)分别用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后连接,构建成重组表达质粒,转化宿主菌DH5α,筛选阳性克隆。测序结果证明,目的基因正确插入到表达载体中,命名为pcDNAV;用同样方法将IL18基因插入pcDNAV中,命名为pcDNAVI。用pcDNAVI免疫豚鼠,2周后加强免疫1次,每周用ELISA检测豚鼠血清中的抗体水平。结果表明,pcDNAVI可引发机体产生体液免疫。; 董金杰王永录张永光伏小平潘丽方玉珍蒋守田王宝琴王文秀; 关键词：VP1基因真核表达载体免疫活性体液免疫核酸疫苗