祖宝利
- 作品数：8 被引量：1H指数：1
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- 梗阻性黄疸患者血清对人肺微血管内皮细胞肌样分化的影响
- 2016年
- 目的评价梗阻性黄疸患者血清对人肺微血管内皮细胞（PMVECs）肌样分化的影响。
方法分离人PMVECs，并传代培养，将培养的人PMVECs分别采用梗阻性黄疸患者血清和健康志愿者血清孵育，于孵育24、48和72 h（T1～3）时在倒置显微镜下观察原代PMVECs形态，采用Western blot法检测PMVECs肌性蛋白（α-SMA、SM-MHC、capolnin）的表达。
结果健康志愿者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA蛋白表达阴性，出现少量SM-MHC表达，梗阻性黄疸患者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达阳性。与健康志愿者血清比较，梗阻性患者黄疸血清孵育PMVECs SM-MHC表达上调（P〈0.05）；与T1时比较，T2，3时梗阻性黄疸血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达上调（P〈0.05）；与T2时比较，T3时梗阻性黄疸患者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达上调（P〈0.05）。
结论梗阻性黄疸患者血清促进PMVECs肌样分化，可能是肺微血管扩张机制之一。
- 陈啟炜杨勇陈兵陈杨李胜王桂兰吴玉龙陈崇会祖宝利易斌鲁开智廖林
- 关键词：血清细胞分化
- PASMCs表型相关蛋白在HPS大鼠肺组织中的表达变化
- 目的:评价肝肺综合征(HPS)大鼠肺组织中肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)表型相关蛋白表达的变化。方法:健康SD大鼠40只,雌雄不拘,体重20020g,3月龄。采用随机数字表法,将其分为3组:对照组(C组,n=10)、假...
- 陈杨易斌陈兵杨勇祖宝利鲁开智
- 关键词：肝肺综合征肺动脉平滑肌细胞
- 文献传递
- 大鼠肺毛细血管周细胞的培养
- 2013年
- 目的 建立可靠、简便的肺毛细血管周细胞的培养方法.方法 选择健康雄性SD大鼠6只,6～7周龄,体重200 ～ 220 g,采用Ⅰ型胶原酶消化法和微孔过滤法分离肺毛细血管片段,用含10％胎牛血清和0.5％青霉素链霉素混合液的高糖DMEM/F12 1∶1培养基选择性培养肺毛细血管周细胞.倒置相差显微镜下观察细胞形态和生长状态,采用免疫荧光法计数α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结蛋白、神经元-胶质抗原2（NG2）、分化抗原31（CD31）的阳性细胞,计算阳性细胞百分比.结果 镜下细胞呈梭型或星芒状,单核,偶见双核,核卵圆形,细胞浆丰富,漩涡或栅栏状生长,无接触性抑制.免疫荧光测定α-SMA阳性细胞百分比为（99.0±1.2）％,结蛋白阳性细胞百分比为（96.0±2.1）％,NG2阳性细胞百分比为（99.0±0.7）％,CD31阳性细胞百分比为0.结论 成功建立了一种可靠、简便的大鼠肺毛细血管周细胞的培养方法.
- 陈兵易斌杨勇王芝陈杨祖宝利鲁开智
- 关键词：周细胞细胞培养技术微脉管
- 肝肺综合症大鼠血清诱导肺微血管周细胞增殖
- ＜正＞目的:评价肝肺综合症（HPS）大鼠血清对肺微血管周细胞（PCs）增殖的影响。方法:动物模型分为2组:假手术组（sham）、胆总管结扎组（CBDL）,sham组大鼠只分离胆总管不结扎,CBDL组大鼠结扎胆总管上段,第...
- 陈兵易斌王芝杨勇陈杨祖宝利鲁开智
- 关键词：肝肺综合症周细胞血清细胞增殖
- 文献传递
- 胆红素对大鼠肺微血管内皮细胞增殖的影响
- 2014年
- 目的 评价胆红素对大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）增殖的影响.方法 健康雄性SD大鼠10只,体重120 ～ 150 g,2～3月龄,原代培养、纯化及鉴定PMVECs.PMVECs接种于低糖DMEM培养基或96孔培养板,采用随机数字表法将其分为5组：对照组（C组）和不同浓度胆红素组（B1-4组）,每组30孔或48瓶.C组加入低糖DMEM培养基1ml,B11-4组分别加入5、10、20和50 μmol/L胆红素1ml.于孵育24、48和72 h时采用CCK-8法和3 H-TdR掺入法检测PMVECs增殖水平,采用RT-PCR法测定Akt1 mRNA和Smad3 mRNA的表达水平,采用Westen blot法测定磷酸化Akt1 （p-Akt1）蛋白和Smad3蛋白的表达水平.结果 与C组比较,B1组和B2组孵育各时点PMVECs增殖水平、Akt1mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）,B3组孵育48 h时PMVECs增殖减弱,Akt1 mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达下调,B4组孵育48和72 h时PMVECs增殖减弱,Akt1 mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达下调（P＜0.05）;与B3组比较,B4组孵育72 h时PMVECs增殖减弱,Akt1 mRNA和p-Akt1蛋白表达、Smad3 mRNA及其蛋白表达下调（P＜0.05）.结论 高浓度胆红素可抑制PMVECs的增殖,其机制与下调Akt1和Smad3蛋白的表达有关.
- 祖宝利陈兵陈杨杨勇易斌鲁开智
- 关键词：胆红素细胞增殖内皮细胞
- 转化生长因子—β1/Smad7信号通路在胆总管结扎大鼠肺组织中的表达和作用
- 目的通过检测胆总管结扎大鼠肺组织转化生长因子—β1（TGF-β1）和Smad7的表达,探讨TGF-β1/Smad7信号通路在在HPS肺微血管扩张中的作用。方法健康SD大鼠56只,随机分为对照组（C组）、假手术组（OC组）...
- 祖宝利陈杨杨勇陈兵易斌鲁开智
- 关键词：肝肺综合征SMAD7
- 文献传递
- 肝肺综合征大鼠肺组织膜联蛋白A2表达的变化被引量：1
- 2013年
- 目的评价肝肺综合征（HPS）大鼠肺组织膜联蛋白A2（ANXA2）表达的变化。方法健康sD大鼠40只，雌雄不拘，3～4月龄，体重220～250g。采用随机数字表法，将其分为3组：对照组（c组，n=10）、假手术组（s组，n=10）和肝肺综合征组（HPS组，n=20）。HPS组采用胆总管结扎法建立肝肺综合征模型；c组不做任何处理；S组仅开腹暴露胆总管，但不结扎。术后5周时，处死大鼠，取肺组织，采用RT—PCR法检测ANXA2和平滑肌肌动蛋白α（SM-α-actin）的mRNA表达，采用Westernblot法检测ANXA2和SM—α—actin的蛋白表达。结果与C组比较，S组肺组织ANXA2和SM—α—actin的mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）；与s组比较，HPS组肺组织ANXA2和SM—α-ctin的mRNA及其蛋白表达上调（P〈0．05）。结论大鼠肝肺综合征时肺组织ANXA2表达上调。
- 陈杨易斌陈兵杨勇祖宝利鲁开智
- 关键词：肝肺综合征膜联蛋白A2
- 梗阻性黄疸患者血清对人PASMCs增殖、迁移及表型转换的影响
- 2014年
- 目的 探讨梗阻性黄疸患者血清对人肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）迁移、增殖及表型转换的影响.方法 分离人PASMCs,并传代培养,将培养的人PASMCs分别用梗阻性黄疸患者血清和健康志愿者血清孵育,于孵育24、48和72 h时采用CCK-8法和细胞划痕实验分别检测细胞增殖能力和迁移能力,采用Western blot法检测平滑肌-α-肌动蛋白（SM-α-actin）和钙调蛋白表达水平.结果 与健康志愿者血清孵育的人PASMCs比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育的PASMCs增殖能力和迁移能力增强,孵育24h时钙调蛋白表达上调,孵育48、72 h时SM-α-actin和钙调蛋白表达下调（P＜0.05）;与孵育24 h时比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育48 h时人PASMCs增殖能力和迁移能力增强,SM-α-actin表达上调,钙调蛋白表达下调（P＜0.05）;与孵育48 h时比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育72 h时人PASMCs迁移能力增强（P＜0.05）,增殖能力、SM-α-actin和钙调蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 梗阻性黄疸患者血清可增强人PASMCs增殖和迁移能力,并促进其向合成表型的转换.
- 杨勇陈兵陈杨祖宝利易斌鲁开智
- 关键词：细胞增殖细胞运动细胞分化
