毛舒燕
- 作品数：4 被引量：28H指数：3
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家高技术研究发展计划内蒙古自治区高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- IGF-1毛囊特异表达载体的构建以及转染绒山羊胎儿成纤维细胞的研究被引量：18
- 2009年
- 本研究旨在构建绵羊胰岛素样生长因子l(IGF-1)毛囊特异表达载体pCDsR-KI,并转染绒山羊胎儿成纤维细胞,最终获得稳定表达红色荧光并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过RT-PCR方法获得IGF-1 cDNA,其与KAP6-1基因启动子片段以及红色荧光蛋白表达元件连接构成IGF-1毛囊特异表达载体pCDsR-KI(大小7.4 kb)。以组织块贴附法分离和培养绒山羊胎儿成纤维细胞,外源性表达载体以lipofectamineTM2000介导转染所培养的第2代成纤维细胞,在DMEM/F12+10%FBS、37℃、5%CO2中培养,并添加G418筛选,获得了表达红色荧光蛋白的细胞克隆。经PCR法鉴定证实外源基因已经整合在细胞基因组中。通过分析转基因体细胞的生长曲线和染色体核型证明转基因细胞的生长状态良好、各项参数趋于正常。为下一步通过体细胞核移植技术获得转基因克隆绒山羊准备了核供体细胞。
- 郭旭东尹俊杨东山毛舒燕宝明涛旭日干
- 关键词：绒山羊红色荧光蛋白胎儿成纤维细胞
- 绵羊角蛋白关联蛋白KAP6-1基因5′端调控区的分子克隆及测序结果比较被引量：11
- 2007年
- 根据绵羊毛囊角蛋白关联蛋白(KAP 6-1)基因已知DNA序列设计合成了两个特异性引物,以绵羊基因组DNA为模板,PCR扩增出1 042 bp的特异性片段,连接到pM D 19T载体中获得该片段克隆.经过快速提质粒法筛选、限制性内切酶分析表明该克隆包含所需的目的片段.DNA测序结果也证明该克隆片段与原基因5′端调控区序列相比具有很高的一致性.研究结果为今后制备转基因克隆动物,在毛囊细胞中特异性表达绒毛生长调控基因奠定了基础.
- 郭旭东毛舒燕宝明涛尹俊旭日干
- 小鼠超高硫角蛋白基因启动子的分子克隆及序列分析被引量：2
- 2007年
- 根据小鼠超高硫角蛋白(UHS)基因已知DNA序列设计合成了两个特异性引物,以小鼠全血提取的总DNA为模板,PCR扩增出688bp的特异性片段,连接到pMD19T载体中获得该片段克隆p19TU。经过快速提取质粒法筛选、限制性内切酶分析证明该克隆就是UHS基因5'端的调控区序列。序列分析结果也表明该克隆片段与原基因调控序列相比具有很高的一致性。研究结果为今后制备转基因克隆动物、在毛囊细胞中特异性表达绒毛生长调控基因奠定了基础。
- 郭旭东侯冬霞毛舒燕旭日干
- 关键词：调控区PCR
- 一种快速提取质粒DNA用于鉴别重组克隆的方法被引量：4
- 2007年
- 介绍了一种利用过夜培养的菌液瞬时提取质粒DNA，并用于电泳鉴别含有插入子克隆的方法。事先无需准备许多繁琐的相关试剂，提取质粒的全过程只需3～5min就可完成，非常适合于做重组克隆的快速鉴别。
- 郭旭东毛舒燕侯冬霞旭日干
- 关键词：质粒DNA重组克隆
