杨懿铭
- 作品数：55 被引量：31H指数：3
- 供职机构：上海市血液中心更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市卫生局青年科研基金上海市公共卫生重点学科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程一般工业技术更多>>
- 抗氧化酶交联的多聚血红蛋白及其制备
- 本发明涉及血液代用品，公开了一种抗氧化酶交联的多聚血红蛋白，是与超氧化物歧化酶和过氧化氢酶化学交联的多聚血红蛋白。本发明的抗氧化酶交联的多聚血红蛋白具有更低的自氧化速率和更强的抗氧化性，可抗外源性氧化剂，在应用时无需交叉...
- 范华骅杨懿铭王永彬杨洁任亚娜谢如锋
- 文献传递
- 无关第三方耐受型树突细胞对小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病的预防作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨无关第三方耐受型树突细胞（tDC）的生物学特性及其对急性移植物抗宿主病（aGVHD）的预防作用。方法用GM—CSF、IL-10和TGF—B1诱导培养D1小鼠骨髓源tDC，用流式细胞术检测细胞表型，用RT—PCR方法检测细胞因子基因表达情况。采用混合淋巴细胞反应法检测其体外对异基因小鼠CD4＋T细胞增殖的影响；将D1小鼠骨髓源tDC按不同剂量分组输注给aGVHD小鼠模型（B6--D2），观察受鼠一般状况、生存率、临床GVHD评分、血清中Thl／Th2细胞因子水平的变化，并以单纯aGVHD模型为对照组进行比较。结果流式细胞术检测结果表明tDC表达低水平的MHCⅡ分子（I—A／I—E）和共刺激分子（CD80、CD86、CD40）。RT—PCR结果表明，tDC低水平表达炎性细胞因子IL-12p40，但高水平表达免疫抑制性因子IL-10、TGF—β、FasL、IDO和精氨酸酶。无关第三方tDC在体外能够有效抑制异基因CD4＋T细胞的增殖，并且这种抑制效应与tDC的剂量有关；小鼠体内实验显示，aGVHD对照组小鼠在移植后18d内全部死亡；而接受无关第三方tDC输注组小鼠aGVHD症状均有所改善，其中输注10。tDC的受鼠有60％能存活至60d以上，无明显的GVHD症状。而输注10^3 tDC的小鼠仅有20％能存活至移植后第60天，输注10^5 tDC的小鼠则在移植后37d内全部死亡。移植21d时，输注10^3、10^4、10^5无关第三方tDC的小鼠血清内IL-10水平分别为（114．23±7．78）、（646．18±212．02）、（121．97±10．47）ng／L，10^4 tDC组显著高于其他组（P〈0．05）。结论经IL—10和TGF-β1诱导的无关第三方tDC在体外能够抑制CD4＋T细胞的增殖，对aGVHD有显著的预防作用，这种作用与tDC剂量和IL-10的高表达有关。过继性输注一定量的无关第三方tDC能显著延长aGVHD小鼠的生存期，有效预防异基因骨髓移植小鼠aGVHD的发生。
- 李贵苹杨洁郝俊杨懿铭任亚娜谢如锋范华骅钱开诚
- 关键词：移植物抗宿主病
- CD8+FOXP3+Treg细胞来源外泌体输注胶原诱导关节炎小鼠模型中的治疗作用及其机制
- 目的初步探讨CD8+FOXP3+Treg细胞来源外泌体在自身免疫动物模型中的作用及其机制。方法采用超速离心的方法对CD8+Treg细胞培养上清进行分离获得外泌体成分。分别采用NTA、Western Blotting和透射...
- 杨懿铭杨洁谢如锋高跞孙娟蒋雪玉
- 黄芩苷通过调节Treg/Th17比例抑制红细胞输注小鼠模型中的IgG的生成
- 目的自1970年代起,我国便广泛应用茵陈汤于预防母胎Rh和ABO血型不合引起的新生儿溶血病。开展这项研究是为了评估茵陈汤中的1种主要成分黄芩苷能否抑制红细胞免疫并阐明其潜在的机制。方法我们将人类红细胞与佐剂脂多糖(LPS...
- 蒋雪玉刘李栋孙娟杨洁向东杨懿铭高跞谢如锋
- 同种异基因耐受型树突状细胞能有效的抑制自身免疫性关节炎的发生
- 杨洁杨懿铭范华骅
- 同种异基因抗原特异性调节性T细胞的体外扩增被引量：1
- 2012年
- 目的建立用人B淋巴细胞体外获得大量的同种异基因抗原特异性调节性T(Treg)细胞的方法,以此检测扩增细胞的表型及其免疫无能性和免疫抑制性。方法第1轮扩增将免疫磁珠分选的人CD4+CD25+T细胞和人B淋巴细胞按1∶4体外混合培养,并加入外源白介素-2(IL-2)和抗-CD28;将第1轮扩增得到的Treg细胞用抗-CD3/CD28包被的免疫磁珠和IL-2刺激,做第2轮扩增以获得更多数量的抗原特异性Treg细胞,分为添加和或未添加免疫抑制剂雷帕霉素(RAPA)2组(n=3)。结果经过2轮的扩增后,在第2轮扩增中未添加RAPA组扩增1×103倍,纯度>80%;添加RAPA组扩增0.8×103倍,纯度>90%。添加RAPA组得到的Treg细胞的Foxp3、CT-LA4、CD39表达水平高于未添加RAPA组,但是HLA-DR变化不大;未添加RAPA组扩增得到的Treg细胞分泌低水平的IL-2、IL-17、IL-4和IFN-γ,而添加RAPA组得到的Treg细胞几乎不分泌上述各种细胞因子,前者表现出部分免疫反应无能性,后者表现出完全的免疫反应无能性,两者都表现出免疫抑制性功能特征。人B淋巴细胞扩增得到的抗原特异性Treg细胞能够极大地抑制同源抗原引起的免疫反应,而对多克隆刺激的免疫反应抑制能力较弱。结论用人B细胞体外扩增抗原特异性Treg细胞,再通过抗-CD3/CD28包被的免疫磁珠进一步刺激可以体外获得大量的抗原特异性的Treg细胞,加入RAPA后可有效地提高Treg细胞的纯度和免疫抑制力且呈现抗原特异性。
- 曹国番郝俊李振华杨燕杨懿铭杨洁任亚娜谢如峰范华骅钱开诚
- 关键词：TREG细胞抗原特异性体外扩增免疫磁珠
- 一种脐带血调节性T细胞体外扩增及低温保存方法
- 本发明涉及一种脐带血调节性T细胞体外扩增及低温保存方法，所述的方法包括以下步骤：从脐带血中分离富含调节性T细胞的CD4+CD25+T细胞群；扩增所述富集后的CD4+CD25+T细胞群获得高纯度的调节性T细胞；将所述扩增后...
- 范华骅杨洁杨懿铭任亚娜谢如锋
- 雷帕霉素处理后的树突状细胞对感染后输血相关急性肺损伤保护作用
- 2022年
- 目的 探讨雷帕霉素处理后的树突状细胞(dendritic cells, DC)干预感染后输血相关急性肺损伤(transfusion-related acute lung injury, TRALI)策略的可行性。方法 1)通过细菌脂多糖(LPS)联合抗-H2Kd诱导小鼠TRALI的发病,并测定小鼠肺脏,肾脏,脾脏和脑组织等器官湿干比及肛温,建立TRALI小鼠模型;2)体外诱导小鼠骨髓来源的DC细胞,并经雷帕霉素(10nM)处理24 h;3)小鼠经尾静脉注射或不注射雷帕霉素或雷帕霉素处理后的DC,1 h后腹腔注射LPS,24 h后注射抗-H2Kd诱导TRALI发病,观察并记录小鼠死亡情况,并通过小鼠体温、肺脏湿干比、胸腔积液重量以及肺组织病理切片分析小鼠TRALI发病后情况。结果 通过对不同浓度和不同容量的抗-H2Kd溶液诱导效果的比较,本研究选择0.1 mg/kg LPS联合4.5 mg/kg抗-H2Kd(输注体积100μL)诱导的小鼠模型为TRALI小鼠模型。该模型小鼠TRALI发病后,能显著增加了肺脏湿干比,体温显著降低。使用雷帕霉素处理后DC对TRALI发病小鼠进行干预后,死亡率显著降低,小鼠肺组织病变显著改善,且效果优于雷帕霉素处理组;与TRALI发病组相比,干预组胸腔积液重量呈现显著减少(P<0.05),但肺脏湿干比和体温差异无统计学意义。结论 通过LPS联合抗体能有效诱导稳定且典型的TRALI小鼠模型,可见先后存在感染性炎症和输血相关炎性物质是TRALI发病的决定性因素。同时,雷帕霉素处理后DC对感染后TRALI具有保护作用,有望成为干预TRALI恶化的潜在的细胞治疗策略。
- 高跞杨懿铭谢如锋龚裕春孙娟蒋雪玉杨洁
- 关键词：树突状细胞
- 血红蛋白衍生物类红细胞代用品研究进展被引量：6
- 2006年
- 本文简要介绍了血红蛋白衍生物类红细胞代用品的研究进展、开发现状和临床应用前景。
- 范华骅杨懿铭钱开诚
- 关键词：血液代用品血红蛋白类
- 可作为细胞治疗制品的CD8调节性T细胞的体外诱导扩增方法
- 2018年
- 目的建立1种可用于细胞治疗制品的CD8调性T细胞（CD8＋Reularory T cell,Treg）的体外诱导扩增方法,并检测所获Treg细胞性质及功能的稳定性。方法通过免疫磁珠从人外周血PBMC中分选出CD8＋T细胞,在抗人-CD3/CD28磁珠与外源性IL-2激活下,联合使用不同组合的诱导因子：转化生长因子1（TGF-β1）、雷帕霉素（Rapamycin,RAPA）和全反式维甲酸（All-trans retinoic acid,ATRA）,多克隆诱导扩增出CD8＋Treg细胞,比较不同诱导组CD8＋Treg细胞扩增能力、表型、细胞内因子分泌、抑制功能等情况,筛选出最合适的诱导组细胞,进行体外多轮重刺激扩增并检测其功能及性质的稳定性。结果对不同组CD8＋Treg细胞扩增数量、表型、细胞内因子分泌情况分析得出：TGF-β1和雷帕霉素联合诱导组细胞高表达Foxp3和CD103,扩增能力强,对同种异基因CD4效应T细胞抑制功能可达90%以上、炎性因子IL-2和IFN-γ分泌细胞比例低、在炎性条件下不分泌IL17A和分泌很低量的IFN-γ。体外进行四轮重刺激,扩增倍数最低可达10000倍,且扩增所获Treg细胞活性高,Foxp3表达稳定,各轮抑制功能无显著差别。对Treg抑制作用机制研究发现,Treg通过竞争性消耗内源性IL-2起到部分抑制功能。结论 CD8＋Treg细胞体外扩增诱导方法的建立将填补了目前CD8＋Treg培养方法上的空白。体外大量扩增的CD8＋Treg细胞具有治疗自身免疫病、GVHD等疾病的应用潜力,可作为1种细胞治疗制品运用于临床。同时,通过利用原本在输血中废弃的PBMC,诱导出功能稳定的CD8＋Treg细胞,在一定程度上提高了血液的利用效率和促进了成份输血的进程。
- 孙娟霍小娜杨懿铭杨懿铭蒋雪玉李振华李振华谢如锋高跞刘李栋范华骅朱永明
- 关键词：成份输血
