杨子平
- 作品数：15 被引量：18H指数：3
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目更多>>
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- 巴西橡胶树乳管中与14-3-3蛋白相互作用的蛋白的分离与鉴定
- 天然橡胶是在橡胶树的乳管内合成，以胶乳(乳管细胞的细胞质)的形式贮存，是一种重要的次生代谢产物。天然橡胶的基本化学单元是顺1，4-聚异戊二烯，是通过甲烃戊酸(mevalonate，MVA)途径产生前体异戊烯基二磷酸(is...
- 杨子平
- 关键词：巴西橡胶树酵母双杂交蛋白鉴定
- 巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析被引量：2
- 2013年
- 提取巴西橡胶树胶乳总RNA,并纯化mRNA.采用特异引物（oligo-dT）反转出第一链DNA,经LDPCR合成第二链DNA.将ds cDNA和经Sma Ⅰ线性化的pGADT7-Rec质粒共转化Y187酵母菌,构建酵母双杂交cDNA表达文库.结果表明,转化单菌落个数为2.8 ×107;文库滴度为4.92×107·mL-1;插入片段大小主要分布于500 ～2 000 bp间;重组率为96％.实验数据表明该文库能满足后续的杂交筛选.
- 杨子平李辉亮郭冬彭世清
- 关键词：橡胶树酵母双杂交CDNA文库
- 巴西橡胶树乳管细胞中与HbRZF相互作用蛋白的初步筛选与分析被引量：2
- 2013年
- 为深入研究巴西橡胶树乳管细胞中C3HC4型环锌指蛋白HbRZF的生物学功能,构建了pGBKT7-HbRZF诱饵表达载体,利用酵母双杂交技术从巴西橡胶树胶乳cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白。通过阳性克隆的表型确定、PCR测序和生物信息学分析,初步获得了16个与诱饵蛋白相互作用的靶蛋白。获得乳管细胞中与HbRZF相互作用蛋白,为进一步研究HbRZF锌指蛋白在巴西橡胶树乳管细胞中的未知生物学功能奠定了重要基础。
- 杨子平李辉亮郭冬彭世清
- 关键词：橡胶树酵母双杂交相互作用
- 橡胶树自根幼态无性系高产的分子机制及应用
- 李辉亮郭冬彭世清王颖朱家红杨子平陈雄庭鲁惠中兰芳银唐潇
- 所属科学技术领域：农业生物技术。主要内容：橡胶树是热区一种重要的经济作物，其生产的天然橡胶是一种工业原料和战略物资。橡胶树自根幼态无性系是经组织培养获得的有自己根系的幼态再生植株。该项目针对幼态无性系高产橡胶树的早期分子...
- 关键词：
- 关键词：橡胶树经济作物
- 巴西橡胶树HbMET的克隆与表达分析
- 2015年
- 通过同源克隆和RACE方法获得了巴西橡胶树DNA甲基转移酶(DNA Methyltransferase,MET)基因(Hb MET)。Hb MET长4 896 bp,含有4 635 bp的阅读框架,编码1 545个氨基酸。蛋白分子量174.36 ku,等电点为6.36。氨基酸序列与可可、毛果杨、黄瓜、拟南芥、碧桃、葡萄和烟草等物种的MET家族成员的同源性分别为73%、77%、74%、56%、72%和68%。进化树分析表明,Hb MET氨基酸序列与毛果杨的MET亲缘关系最近。Hb MET在巴西橡胶树的根、树皮、叶、胶乳中均有表达,其中在胶乳中表达量最低;Hb MET在橡胶树自根幼态无性系的胶乳中表达比老态无性系胶乳中的表达低。
- 李辉亮郭冬汪晗杨子平彭世清
- 关键词：巴西橡胶树DNA甲基转移酶DNA甲基化
- 调控橡胶树法尼基焦磷酸合酶基因转录因子的初步筛选被引量：1
- 2014年
- 为研究橡胶树中法尼基焦磷酸合酶基因(Hb FPS)的表达调控机制,采用酵母单杂交技术筛选了胶乳中与Hb FPS启动子结合的蛋白因子。将Hb FPS启动子与报告质粒p HIS2.1连接构建诱饵质粒p His-FPS,经筛选确定抑制背景表达的3-氨基三唑(3-aminotriazole,3-AT)浓度为10 mmol/L。同时以橡胶树胶乳m RNA为模板合成双链c DNA,并将双链c DNA、线性化的p GADT7Rec2载体和诱饵质粒p His-FPS共同转化酵母菌株Y187,两载体共转化效率为1.7×106 cfu/μg。筛选共得到阳性克隆36个,获得31条序列。对获得的c DNA序列进行生物信息学分析,得到2个转录因子序列,分别为类乙烯响应转录因子ERF003和Hb LMYC2。结果为进一步研究Hb FPS表达调控机制奠定基础。
- 郭冬李辉亮杨子平彭世清
- 关键词：橡胶树转录因子
- 橡胶树14-3-3蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活和毒性检测被引量：4
- 2011年
- 以克隆到的3个编码橡胶树14-3-3蛋白的基因HbGF14a、HbGF14b、HbGF14c为基础,构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-HbGF14a、pGBKT7-HbGF14b、pGBKT7-HbGF14c,并对其进行自激活和毒性实验鉴定。自激活实验结果表明,3个诱饵载体没有自激活性;毒性实验结果表明,pGBKT7-HbGF14a、pGBKT7-HbGF14b、pGBKT7-HbGF14c表达的蛋白对酵母菌无毒性,酵母生长良好,结果表明,构建好的诱饵载体均可用于下一步的酵母双杂交实验。这为进一步的诱饵载体与橡胶树胶乳cDNA酵母表达文库的杂交做好了前期准备。
- 杨子平李辉亮郭冬彭世清
- 关键词：橡胶树酵母双杂交诱饵载体
- 巴西橡胶树HbMADS4的克隆及原核表达分析被引量：4
- 2015年
- 为了探讨巴西橡胶树自根幼态无性系高产的分子机制,通过抑制缩减杂交获得了在巴西橡胶树自根幼态无性系和老态无性系胶乳中差异表达的基因片段。为进一步鉴定差异表达基因的功能,对相关基因进行克隆。通过RACE方法克隆一个新的橡胶树MADS-box转录因子基因(命名为Hb MADS4),Hb MADS4全长984 bp,含有633 bp的阅读框,编码230个氨基酸。推测Hb MADS4蛋白分子量为23.71 ku,等电点为7.61,在N端含有典型的MADS-box结构域。构建Hb MADS4原核表达载体p Hb MADS4,将其转化E.coli,经优化条件后,在20℃,0.1 mmol/L IPTG诱导4 h的条件下,获得Hb MADS4融合蛋白。Hb MADS4的克隆和Hb MADS4融合蛋白的获得为深入研究Hb MADS4的功能奠定基础。
- 魏利然李辉亮郭冬杨子平彭世清
- 关键词：巴西橡胶树原核表达蛋白纯化
- 巴西橡胶树HbDRM的克隆与表达分析被引量：1
- 2014年
- 运用PCR和RACE技术从巴西橡胶树中克隆出了一个域重排甲基转移酶(Domains rearranged methyltransferase,DRM)基因(HbDRM)。HbDRM全长为2 245 bp,含有1 917 bp的阅读框,145 bp的5′-UTR和176 bp 3′-UTR,编码638个氨基酸,分子量为71.39 ku,等电点为4.90。HbDRM的氨基酸序列与可可、葡萄、黄瓜、鹰嘴豆、番茄、拟南芥DRM家族成员的同源性分别为77%、74%、72%、67%、64%和52%。定量RT-PCR分析表明HbDRM在巴西橡胶树的根、树皮、叶、花、胶乳、胚和愈伤组织中均有表达,其中在花和愈伤组织中表达量较高,在胶乳中表达量最低,此外HbDRM在橡胶树自根幼态无性系的胶乳中表达比其供体胶乳中的表达低。HbDRM的克隆和表达分析为下一步研究HbDRM在巴西橡胶树自根幼态无性系高产中的作用打下基础。
- 汪晗李辉亮杨子平郭冬彭世清
- 关键词：巴西橡胶树DNA甲基化
- 表观遗传与巴西橡胶树自根幼态无性系高产的分子机制研究
- 彭世清李辉亮朱家红王颖杨子平刘陈唐潇
- 该成果对橡胶树体细胞胚发生过程中基因组DNA的甲基化、胞嘧啶甲基转移酶基因在自根幼态无性系和老态无性系中的表达、DNA甲基化调节橡胶树产胶和排胶相关基因的表达等分析了橡胶树自根幼态无性系高产的原因进行了研究。 研究证明了...
- 关键词：
- 关键词：巴西橡胶树基因表达表观遗传
