李辉亮
- 作品数：68 被引量：153H指数：7
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家天然橡胶产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 橡胶树自根幼态无性系高产的分子机制及应用
- 李辉亮郭冬彭世清王颖朱家红杨子平陈雄庭鲁惠中兰芳银唐潇
- 所属科学技术领域：农业生物技术。主要内容：橡胶树是热区一种重要的经济作物，其生产的天然橡胶是一种工业原料和战略物资。橡胶树自根幼态无性系是经组织培养获得的有自己根系的幼态再生植株。该项目针对幼态无性系高产橡胶树的早期分子...
- 关键词：
- 关键词：橡胶树经济作物
- 巴西橡胶树14-3-3蛋白基因的克隆及表达分析
- 根据一个在巴西橡胶树幼态无性系与老态无性系胶乳之间差异表达的SSH片段的序列信息设计引物，通过RACE技术获得了2个编码14-3-3蛋白的cDNA，命名为Hb14-3-3a和Hb14-3-3b。序列分析表明，Hb14-3...
- 李辉亮郭冬彭世清
- 关键词：巴西橡胶树基因克隆蛋白表达
- 文献传递
- 巴西橡胶树HbMADS5的克隆及表达分析被引量：2
- 2017年
- 在前期巴西橡胶树胶乳转录组测序的基础上,通过PCR克隆了1个编码巴西橡胶树MADS-box转录因子的基因,命名为Hb MADS5。Hb MADS5全长1 077 bp,编码358个氨基酸,推测Hb MADS5蛋白分子量为40.75 k D,等电点为6.38。氨基酸序列比对分析表明,Hb MADS5具有MADS-box家族典型的MADS-box保守结构域,与蓖麻、葡萄、麻风树、甜橙、木本棉、蒺藜状苜蓿等物种的MADS-box家族成员具有较高的同源性,分别为79%、74%、72%、70%、65%和59%。Hb MADS5与麻风树中的1个MADS-box成员亲缘关系最近。Hb MADS5在巴西橡胶树根、茎、叶、花和胶乳等中都有表达,其中在胶乳中表达量最高,在根中表达量最低;茉莉酸甲酯和乙烯能诱导Hb MADS5的表达,茉莉酸甲酯处理12 h后Hb MADS5表达量提高了10倍,乙烯处理48 h后Hb MADS5表达量提高了2倍。本研究将为进一步研究Hb MADS5在巴西橡胶树中的功能提供了帮助。
- 詹地丰王颖李辉亮郭冬朱家红黄华孙李维国陈雄庭彭世清
- 关键词：巴西橡胶树茉莉酸甲酯乙烯
- 巴西橡胶HbWRKY55启动子的克隆及功能初步分析
- 2018年
- 为深入研究巴西橡胶树HbWRKY55调控天然橡胶生物合成机制,本研究根据已克隆的巴西橡胶树HbWRKY55的序列和橡胶树基因组序列信息设计引物,通过PCR技术获得了HbWRKY55起始密码子ATG上游1 587 bp的序列,利用Plant CARE数据库对该序列的调控元件进行分析。分析结果表明该启动子序列除具有多个典型的真核生物启动子基本元件如增强子元件CAAT-box、启动子核心序列TATA-box等外,还存在赤霉素反应元件GARE-motif、P-box以及水杨酸响应元件TCA-element等参与激素调控的应答元件,同时光应答元件BoxⅠ、Gap-box、Ⅰ-box、L-box、GAG-motif和GT1-motif,胚乳表达的调控元件GCN4-motif、Skn-1_motif和厌氧诱导元件ARE等顺式作用元件也包含其中。构建了该序列的4个5'端缺失片段和荧光素酶基因融合的表达载体,瞬时表达结果表明赤霉素(GA)、水杨酸(SA)可以抑制HbWRKY55启动子的活性,脱落酸(ABA)、茉莉酸甲脂(MeJA)可以加强HbWRKY55启动子的活性。在HbWRKY55启动子的-641^-455和-237^+1可能存在抑制ABA的元件;HbWRKY55启动子的-454^-238和-66^+1存在JA应答增强元件。本研究为深入了解HbWRKY55的调控机理提供帮助。
- 曲龙张建平李辉亮郭冬罗丽娟彭世清
- 关键词：橡胶树顺式调控元件
- 巴西橡胶树HbWRKY1基因5′调控序列的克隆及功能初步鉴定被引量：2
- 2013年
- 为深入研究巴西橡胶树HbWRKY1基因的表达调控机制,采用染色体步移法克隆了HbWRKY1基因的5′调控区序列。结果表明,该序列具有预测的核心启动子区域位于-6^-57 bp,转录起始位点位于翻译起始位点上游41 bp处;该序列具有TATA-box,CAAT-box和GATA-box等多个典型的真核生物启动子基本的顺式作用元件,同时还具有低温响应元件LTR,赤霉素反应元件GARE-motif,生长素响应元件TGA-element和脱落酸响应元件ABRE等参与激素调控元件,此外还有与MYB结合的MBS元件,热胁迫反应的HSE,厌氧诱导元件ARE和增强诱发厌氧反应的GC-motif等顺式作用元件。构建了不同长度的HbWRKY1启动子片段的植物表达载体并转化本生烟草,通过潮霉素抗性和PCR鉴定,获得了转基因植株。对获得的转HbWRKY1不同长度启动子片段的转基因T1植株GUS染色发现,植株的茎、叶柄、主叶脉和根中均可呈现蓝色,表明HbWRKY1基因的5′调控区可以启动GUS基因的表达,具有启动子的活性。
- 唐潇李辉亮郭冬彭世清
- 关键词：橡胶树顺式调控元件
- 白木香查尔酮合成酶基因(AsCHS1)启动子克隆及激素应答元件功能的初步鉴定被引量：6
- 2014年
- 利用染色体步移法克隆了白木香查尔酮合成酶基因（As CHS1）ATG上游1 082 bp的启动子序列,该启动子序列中AT含量高达69.03%,符合真核生物启动子的序列特征。通过启动子预测软件分析可知,该序列的转录起始位点位于翻译起始位点-65 bp处,并且其上游-25-30 bp区域存在TATA-box等典型的真核生物启动子核心元件,同时含有一些顺式作用元件如赤霉素应答元件GARE-motif、茉莉酸甲酯应答元件CGTCA-motif、水杨酸应答元件TCA-element等激素调控元件,光应答元件BoxⅠ、G-Box、ACE,厌氧诱导元件ARE等。通过构建p C-1 082pro As CHS1植物表达载体,借助农杆菌将重组载体转化到烟草叶片中。蛋白定量结果表明,该序列可以驱动GUS的表达,具有启动子活性;脱落酸显著增强该启动子的活性,乙烯则显著抑制该启动子的活性。
- 曹天骏戴好富李辉亮郭冬梅文莉彭世清
- 关键词：白木香查尔酮合酶启动子染色体步移GUS
- 用血管生成抑制因子治疗血管瘤的研究
- 张爱联符策奕罗进贤张添元彭世清李辉亮朱家红官文俊马超
- 根据血管生成抑制因子Angiostatin、Calreticulin-N58、Canstatin-N和Tumstatin在血管内皮细胞上的作用靶点不同，一方面，研究它们对于血管瘤细胞和血管瘤模型的药效，另一方面研究它们的...
- 关键词：
- 关键词：血管瘤血管生成抑制因子
- 巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析被引量：2
- 2013年
- 提取巴西橡胶树胶乳总RNA,并纯化mRNA.采用特异引物（oligo-dT）反转出第一链DNA,经LDPCR合成第二链DNA.将ds cDNA和经Sma Ⅰ线性化的pGADT7-Rec质粒共转化Y187酵母菌,构建酵母双杂交cDNA表达文库.结果表明,转化单菌落个数为2.8 ×107;文库滴度为4.92×107·mL-1;插入片段大小主要分布于500 ～2 000 bp间;重组率为96％.实验数据表明该文库能满足后续的杂交筛选.
- 杨子平李辉亮郭冬彭世清
- 关键词：橡胶树酵母双杂交CDNA文库
- 巴西橡胶树HbTCTP基因的克隆及表达被引量：19
- 2009年
- 在先前的研究中通过抑制缩减杂交获得了一个在巴西橡胶幼态无性系与老态无性系胶乳中差异表达的片段(HbSSH12),BlastX分析表明,由该片段编码的氨基酸与麻疯树(Jatropha curcasL.)翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)的同源性达到92%。本研究根据HbSSH12的序列信息设计引物,通过3'-RACE的方法获得了一个长832bp的cDNA(命名为Hb TCTP),序列分析表明Hb TCTP含有507bp的阅读框,68bp的5'-UTR和255bp的3'UTR,编码168个氨基酸,该氨基酸序列与麻疯树、油棕、花生、南瓜、番茄和拟南芥的TCTP同源性分别达到93.45%、90.48%、89.29%、85.12%、82.74%和79.76%。RT-PCR表明,Hb TCTP在巴西橡胶叶片、胶乳及树皮中都有表达,乙烯利处理可诱导Hb TCTP的表达,割胶抑制Hb TCTP的表达,表明Hb TCTP可能参与伤信号或乙烯信号传导。Hb TCTP的表达分析有助于解析橡胶树幼态无性系高产的分子机制。
- 梁小莲李辉亮彭世清
- 关键词：乙烯巴西橡胶树
- 巴西橡胶树乳管细胞中与HbRZF相互作用蛋白的初步筛选与分析被引量：2
- 2013年
- 为深入研究巴西橡胶树乳管细胞中C3HC4型环锌指蛋白HbRZF的生物学功能,构建了pGBKT7-HbRZF诱饵表达载体,利用酵母双杂交技术从巴西橡胶树胶乳cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白。通过阳性克隆的表型确定、PCR测序和生物信息学分析,初步获得了16个与诱饵蛋白相互作用的靶蛋白。获得乳管细胞中与HbRZF相互作用蛋白,为进一步研究HbRZF锌指蛋白在巴西橡胶树乳管细胞中的未知生物学功能奠定了重要基础。
- 杨子平李辉亮郭冬彭世清
- 关键词：橡胶树酵母双杂交相互作用
