李童
- 作品数：7 被引量：1H指数：1
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- 不同细胞因子对水牛原始生殖细胞传代培养的影响
- 2007年
- 为探讨不同细胞因子对水牛原始生殖细胞（PGCs）传代培养的影响，将PGCs分别采用A、B、C、D、E、F和G共7种培养基进行培养，即A组：基础液＋10ng／mL白血病抑制因子（LIF）＋10ng／mL碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）；B组：基础液＋20ng／mL LIF＋20ng／mL bFGF；C组：基础液＋20ng／mL LIF＋10ng／mL bFGF；D组：基础液＋20ng／mL LIF；E组：基础液＋20ng／mL LIF＋20ng／mL bFGF＋20ng／mL干细胞因子（SCF）；F组：基础液＋20ng／mL LIF＋40ng／mL bFGF＋40ng／mL SCF；G组（对照组）：基础液。将机械法分离的PGCs小集落接种到水牛胎儿成纤维细胞（BEF）饲养层上进行传代培养。结果，原代时，A、B、C、D、E和F组的克隆数目都显著高于对照组（P％0．05），其中E和F组的克隆数目显著高于A组（P〈0．05），而与B、C、D组差异均不显著（P〉0．05）；1～8代时，B、C、D、E、F组的克隆数目显著高于A组（P〈0．05）；对照组传代数仅为2代，A组为5代，而B、C、D、E和F组均为8代以上。结果表明，在传代过程中，LIF起主要作用，20ng／mL的LIF浓度可以满足水牛PGCs传代培养的需要。
- 黄奔李童王志强王晓丽杨素芳农微汪博石德顺
- 关键词：原始生殖细胞传代培养白血病抑制因子干细胞因子碱性成纤维细胞生长因子水牛
- 水牛原始生殖细胞(PGCs)的分离培养及生物学特性的研究
- 本文以水牛胎儿为材料,从生殖腺中分离培养出牛原始生殖细胞,并对水牛原始生殖细胞的分离与克隆的影响因素进行了探讨.结果发现:(1)分离培养出的原生殖细胞(PGCs)呈集落状生长,细胞堆积密集,细胞之间界限不清,细胞与周围的...
- 李童黄奔杨素芳石德顺
- 关键词：原始生殖细胞生物学特性生殖腺
- 文献传递
- 水牛胚胎干细胞的制备方法
- 一种水牛胚胎干细胞的制备方法，其工艺步骤为：经体外受精获得的水牛囊胚和孵化囊胚，去掉透明带及滋养层细胞，获得内细胞团细胞；用丝裂霉素处理的水牛胎儿成纤维细胞作为饲养层细胞，DMEM添加胎牛血清、非必需氨基酸、β－巯基乙醇...
- 石德顺黄奔李童崔奎青
- 文献传递
- 水牛原生殖细胞核移植的研究
- 2008年
- 以水牛原生殖细胞(PGCs)为核供体,成熟水牛卵母细胞为受体,采用电融合法和胞质内直接注核法对水牛PGCs的核移植进行了研究。从水牛胎儿的生殖嵴或生殖腺分离得到PGCs,在胎儿成纤维细胞饲养层上传代培养后,进行核移植。结果显示,当采用电融合法时,PGCs核移植的融合率、分裂率、囊胚率和总囊胚率均显著高于胎儿成纤维细胞(P<0.05);当采用直接注核法进行核移植时,PGCs的核移植囊胚率显著高于胎儿成纤维细胞(P<0.05),但分裂率差异不显著(P>0.05)。结果表明,水牛PGCs细胞是理想的核移植供体细胞。
- 李童黄奔杨娟石德顺
- 关键词：水牛原生殖细胞核移植融合率
- 牛诱导多能干细胞的研究
- 体细胞诱导为多能干细胞(induced pluripotent stem cells，iPSCs)技术的出现引起了全球广泛的关注，其在体细胞重编程机理和再生医学应用等方面的研究中具有不可比拟的价值和优越性，并且避免了因使...
- 李童
- 关键词：多能干细胞生物学特性基因表达细胞增殖
- 文献传递
- 水牛原始生殖细胞(PGCs)的分离培养及生物学特性的研究
- 2006年
- 以水牛胎儿为材料，从生殖腺中分离培养出牛原始生殖细胞，并对水牛原始生殖细胞的分离与克隆的影响因素进行了探讨。结果发现：（1）分离培养出的原生殖细胞（PGCs）呈集落状生长．细胞堆积密集，细胞之间界限不清．细胞与周围的成纤维细胞界限明显；未分化的细胞表达碱性磷酸酶（AKP）以及Oct-4转录因子；（2）收集妊娠29～100d牛胎3L28例，从生殖嵴（腺）或类似物中分离克隆水牛PGCs，23例出现PGCs细胞集落。其中胎龄小于45d（〈3．0cm）和45～55d（3．0～5．ocm）各7例，全部出现PGCs细胞集落；55～70d（5．0～9．0cm）9例，有7例出现PGCs细胞集落，大于70d的5例，有2例出现出现PGCs细胞集落。结果表明，水牛原生殖细胞具有多能性特性，胎龄小于55d的水牛胎儿易于分离培养形成PGCs集落。
- 李童黄奔杨素芳石德顺
- 关键词：水牛原始生殖细胞生物学特性
- 不同影响因素对水牛原始生殖细胞分离培养的影响被引量：1
- 2008年
- 探讨了不同影响因素（性别、胎龄、分离方法）对水牛原始生殖细胞（PGCs）分离培养的影响。结果显示：PGCs多层堆积生长形成克隆,该克隆具有明显的边界与饲养层区分;PGCs表达AKP和OCT-4;公胎牛组的克隆总数和克隆直径都显著高于母胎牛组,（179和32,（227.76±83.84）μm和（102.34±40.59）μm）,P〈0.05;在原代克隆数目上,80～90 d组只有16个克隆,显著低于其他各组（P〈0.05）,在克隆直径上,80～90 d组为（190.63±65.11）μm,也显著低于除70～80 d组外的其他各组（P〈0.05）,并且在最高传代数上,80～90 d组仅为3代,而其他各组都达到或超过了6代;机械分离组在克隆总数和直径上都显著高于胰酶消化组,（186和30,（216.95±77.41）μm和（140±38.76）μm）,P〈0.05,并且机械分离组的最高传代数为8代,而酶消化组仅为3代。结果表明,本试验分离培养出的水牛PGCs具有与已经分离培养出来的其他物种PGCs相似的生物学特性;公胎牛、胎龄小于80 d以及使用机械分离方法更利于水牛PGCs的分离培养。
- 黄奔李童石德顺王晓丽杨素芳农微汪博
- 关键词：原生殖细胞性别胎龄水牛
