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牛催乳素基因在乳腺组织中特异性表达的研究: 曹新曾溢滔颜景斌奚鹰郭曙欣; 1、通过Long PCR克隆得到了牛催乳素基因的全序列（9389bp），已在GenBank登录（登录号为AF426315）。　　2、将获得的含有牛催乳素基因组全序列的表达载体转染真核细胞COS-7后通过RT-PCR技术获...; 关键词：; 关键词：乳腺组织特异性表达

牛催乳素基因组及其cDNA全长序列的分子克隆和分析被引量：47: 2002年; 通过LongPCR等技术首次克隆得到全长 9388bp的牛催乳素 (bPRL)基因组序列 (GenBank登录号AF4 2 6 315 ) ,其中包括bPRL基因全部 5个外显子和 4个内含子 ,5′端 85 4bp的上游调控区以及 3′端 6 9bp的UTR。AF4 2 6 315基因编码的蛋白质在GenBank中的序号为AAL2 80 75 ,由 2 2 9个氨基酸残基组成 ,1～ 30位氨基酸残基为信号肽序列 ,成熟的多肽含有 199个氨基酸残基。将bPRL基因组DNA真核表达载体转染COS 7细胞后通过RT PCR得到长度为80 4bp的bPRLcDNA序列 ,该序列涵盖了bPRL基因的全部ORF区 ,证明本研究所获得的bPRL基因组DNA具有转录的生物学功能。Blast搜索结果显示 ,GenBank数据库中收集有多条bPRL基因的mRNA和EST序列 ,各序列间存在多个SNP位点 ,主要分布于下游编码区和 3′端的UTR ,这些位点均未改变相应的氨基酸残基的性质 ,此外。; 曹新王强颜景斌阳飞昆黄淑帧曾溢滔; 关键词：分子克隆 CDNA

山羊β-酪蛋白基因启动子指导人血清白蛋白基因在小鼠组织中的特异性表达被引量：9: 2001年; 对本所构建的pcDNA3.1- β6 .7hALBm表达载体行尾静脉注射直接转染哺乳期母鼠的活体组织。通过RT-PCR检测hALBm基因在小鼠几种组织中的表达来研究该构建体的组织特异性。结果 :构建体在受试鼠组织中的表达显示了较好的乳腺组织特异性。说明构建具有较长 5′端上游乳蛋白调控区的乳腺特异性表达载体对组织特异性表达是必需的。; 曹新曾溢滔; 关键词：启动子特异性表达人血清白蛋白

牛催乳素基因组全序列的克隆及在真核细胞中的表达被引量：4: 2003年; 目的:构建牛催乳素(bPRL)为目的基因转基因动物-乳腺生物反应器。方法:采用长距离PCR技术,首次从正常牛外周血细胞中克隆到全长9 388 bp的bPRL基因组序列,利用亚克隆的方法将bPRL基因组DNA克隆到真核表达载体pcD-NA3.1(+)上,构建出pcDNA3.1(+)/bPRL的重组表达载体,通过脂质体转染至非洲绿毛猴肾细胞株(COS-7),逆转录-PCR得到长度为804 bp扩增片段。结果:序列测定bPRL基因包括全部5个外显子和4个内含子,5’端854 bp的上游调控区以及3’端69 bp的非翻译区(UTR)。bPRL cDNA包含信号肽在内的全长序列。结论:克隆的bPRL基因组DNA序列在转录水平上具有生物学功能,在体外培养的真核细胞中能够进行正常表达,为进一步建立转基因动物-乳腺生物反应器奠定了坚实的基础。; 曹新曾溢滔; 关键词：催乳素真核细胞克隆

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曹新