戴大鹏
- 作品数：46 被引量：110H指数：6
- 供职机构：北京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 心房颤动始动因素及华法林抗凝治疗药物基因组学研究
- 杨杰孚蔡剑平王华施海峰邹彤戴大鹏
- 该成果属于心血管病学领域。成果组围绕房颤的病因学、病理生理学及治疗学三个方面开展研究，创新点包括：提出了“基因特异性房颤节律控制策略”的新概念；发现房颤患者存在内皮功能障碍、血小板和凝血系统激活及炎性反应；β受体阻断剂可...
- 关键词：
- 关键词：心房颤动抗凝治疗基因组学
- 评价一种新CYP2C9突变型对药物代谢的影响
- 2019年
- 目的在体外表达细胞色素P2C9(32T> C),构建酶促反应体系,检测其对甲苯磺丁脲(tolbutamide)的代谢活性.方法利用定向诱变技术,以细胞色素P2C9野生型的互补DNA为反义链,获得细胞色素P2C9*3以及细胞色素P2C9(32T>C)的complementary DNA,利用杆状病毒穿梭载体bacmid抽提试剂盒获得bacmid,转染伪黏虫卵巢细胞,充分表达后提取微粒体蛋白质,并用免疫印迹法检测其表达量.在体外条件下,测定各型细胞色素P2C9催化甲苯磺丁脲代谢的最大反应速率Vm和米氏常数Km,评价新突变体的催化功能.结果利用昆虫表达系统表达获得细胞色素P2C9 * 1、细胞色素P2C9*3和细胞色素P2C9(32T> C)3种微粒体蛋白质.免疫印迹结果显示,新变异型蛋白表达水平接近于野生型.体外代谢实验结果显示,细胞色素P2C9(32T> C)针对甲苯磺丁脲的体外清除率(Vm/Km)明显低于野生型,体外酶学活性为野生型的12.40%.结论在体外条件下,细胞色素P2C9(32T> C)对甲苯磺丁脲的代谢活性明显下降,提示携带有该基因型的患者服用细胞色素P2 C9的底物药时,体内代谢速率可能会有不同程度的降低,用药前需考虑调整剂量.
- 亢奋恒张博文戴大鹏李传宝蔡剑平
- 关键词：体外研究
- 包括1400T>C突变的CYP2C9基因片段、所编码的蛋白质片段及其应用
- 本发明属于生物学领域，涉及单碱基突变。更具体地，本发明涉及CYP2C9基因对应于SEQ ID NO.2的第1400位的突变位点，所述位点由野生型的T突变为C，包含该突变位点的核酸片段、其编码的蛋白质片段及其应用。本发明还...
- 蔡剑平戴大鹏胡国新李传保王双虎耿培武
- 文献传递
- 药物基因学引导下的汉族老年人华法林稳态剂量模型研究,被引量：6
- 2020年
- 目的:验证国际华法林药物基因学联盟(IWPC)模型的准确性,明确基因多态性和临床因素对汉族75岁及以上老年人华法林稳态剂量的影响,并建立药物基因学指导下的汉族75岁及以上老年人华法林剂量预测模型。方法:将服用华法林抗凝治疗的汉族心房颤动患者分为75岁及以上(164例)和75岁以下(380例)两组,将整体人群和两个年龄组人群数据分别代入IWPC预测模型进行准确性验证。记录164例75岁及以上老年人的人口统计学和临床特征,采用聚合酶链反应等方法检测并扩增CYP2C9和VKORC1-G1639A基因型,通过逐步多元线性回归方法得到新的汉族75岁及以上老年人药物遗传学华法林稳态剂量模型,并与IWPC模型进行准确性比较。结果:IWPC华法林稳态剂量预测模型在全部人群中验证准确度为35.47%,75岁以下的准确率为33.75%,而75岁及以上的预测准确率仅28.70%。在164例75岁及以上老年患者中,CYP2C9基因多态性共检测到*1/*1、*1/*3、*1/*2这3种基因型,其中CYP2C9*1/*1基因型最常见,基因型频率87.80%(144/164),其次为CYP2C9*1/*3型11.59%(19/164)。VKORC1基因多态性检测到GG、GA、AA 3种基因型,其中AA基因型最常见占82.32%(135/164),GG基因型仅占1.83%(3/164)。基因型为CYP2C9*1/*1的患者华法林稳态剂量明显高于突变型*1/*3和*1/*2[(3.18±0.86)mg/d比(2.27±0.51)mg/d],而VKORC1 AA纯合突变基因型患者所需的华法林稳态剂量明显低于基因型GA和GG患者[(2.96±0.66)mg/d比(3.59±1.43)mg/d](t=5.637、-2.092,均P<0.05)。携带CYP2C9(*1*2、*1*3)与VKORC1(GA、GG)基因型组合的患者华法林稳态剂量(2.00±0.63)mg/d,明显低于携带其他基因型组合的患者(P<0.05)。通过多元线性回归分析,我们建立了一个新的包含身高、肌酐、联用胺碘酮、CYP2C9及VKORC1基因型的汉族75岁及以上老年人华法林用药模型,预测准确度为56.0%,该模型可以解释56.0%的个体变异,高于IWPC模型的45.8%准确�
- 任怡荣杨晨光陈浩戴大鹏王艳朱火兰汪芳
- 关键词：心房颤动单核苷酸华法林抗凝治疗
- 细胞色素P450 2C9新突变1400T＞C的发现及体外酶活性研究被引量：2
- 2013年
- 目的 明确1例华法林高敏感患者细胞色素P450 2C9酶（CYP2 C9）的新突变及其生物学功能.方法 提取患者基因组DNA,PCR产物利用直接测序法对CYP2C9、维生素K环氧化物还原酶复合物1（VKORC1）及细胞色素P450 4F2酶（CYP4F2）基因进行序列测定,与国际数据库比对分析确定是否存在碱基突变.通过定点诱变方法获得3种典型缺陷型CYP2C9＊2、＊ 3、＊13及新突变型CYP2C9的cDNA,利用Bac-to-Bac Baculovirus Expression System试剂盒,获得高表达各型CYP2C9变异体的昆虫微粒体.Western印迹法进行CYP2C9蛋白定量,以甲苯磺丁脲为探针底物药,体外测定不同药物浓度下各型CYP2C9变异体的最大反应速率（Vmax）和米氏常数（Km）,评价新突变类型对CYP2C9体外代谢活性的影响.结果 患者CYP2C9基因中发现全新的突变类型：1400T＞C,可导致CYP2C9第467位氨基酸发生变异（L467P）,VKORC1及CYP4F2基因无碱基突变.体外代谢实验结果显示,突变体CYP2C9＊2、＊3、＊13和L467P的体外酶学活性分别为野生型的91.58％、13.55％、0.11％和1.59％.结论 1400T＞C突变可大大降低CYP2C9的体外酶学活性,提示携带此突变型的患者在使用经CYP2C9代谢的药物时,药物代谢速度会明显减慢,容易造成体内药物蓄积,发生潜在的药物不良反应.
- 戴大鹏李传保王双虎耿培武胡国新蔡剑平
- 关键词：细胞色素P450酶系统突变酶活性研究
- 肌细胞增强因子2A CAG重复序列的改变与其细胞学定位功能的相关性研究
- 2009年
- 目的构建肌细胞增强因子2A(MEF2A)/绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,检测其在Hela和293T细胞中的表达,探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其细胞学定位功能的相关性。方法用PCR法扩增野生型MEF2A基因全长cDNA序列,以及其他含4～15个CAG三联核苷酸重复序列的变异型MEF2A全长cDNA序列;将上述12种MEF2A全长cDNA序列分别克隆入带有GFP报告基因的真核表达载体pEGFP-Cl,构建MEF2A野生型融合表达质粒pEGFP-MEF2A、变异型融合表达质粒pEGFP-MEF2A-CAGr;通过脂质体介导的方法将以上质粒转染到Hela和293T细胞,荧光显微镜检测GFP蛋白的表达。结果构建成功与GFP融合的野生型及变异型MEF2A蛋白表达质粒共12种用于细胞学定位功能研究,体外实验结果显示,上述12种MEF2A蛋白均定位于细胞核内。结论 MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变不会影响其细胞内的定位功能。
- 戴大鹏周晓阳郑君德张铁梅蔡剑平
- 关键词：肌细胞细胞学转染绿色荧光蛋白质类
- MEF2A基因21碱基特异性缺失突变的检测及其临床意义的探讨
- 2006年
- 本研究旨在检测中国汉族人群MEF（myocyte enhance factor）2A基因第11号外显子区21-bp的特异性缺失突变，并分析其临床意义。
- 周晓阳何青戴大鹏肖尧王群张志欣许锋孙福成季福绥钱贻简蔡剑平
- 关键词：缺失突变A基因碱基中国汉族人群
- 北京市汉族人群MEF2A基因第7号外显子突变的检测及其意义被引量：5
- 2006年
- 目的检测我国汉族人群中MEF2A基因第7号外显子的突变,探讨这一突变的临床意义。方法用PCR-单链构象多态性(SSCP)和(或)PCR产物直接测序法对500例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者、157例经冠状动脉造影证实无冠状动脉堵塞者为非冠心病组及242例健康体检者的MEF2A基因第7号外显子进行基因突变的检测。结果对参与研究的899例受试者MEF2A基因第7号外显子基因突变的检测结果表明,在MEF2A第7号外显子中未发现任何类型的基因突变。结论MEF2A第7号外显子的突变可能不是我国汉族人群冠状动脉粥样硬化性心脏病的遗传易感因素。与国外研究比较,在MEF2A第7号外显子突变的临床意义上,我国汉族人群与白种人群间存在明显的地域和种族差异。
- 周晓阳何青戴大鹏肖尧王群张志欣季福绥孙福成许锋钱贻简蔡剑平
- 关键词：冠状动脉疾病基因外显子
- 我国汉族人群MEF2A基因多态性位点的检测及其与冠状动脉粥样硬化性心脏病相关性的研究被引量：4
- 2006年
- 目的检测我国汉族人群中MEF2A基因存在的多态性位点，调查这些多态性位点与冠状动脉粥样硬化性心脏病发生的相关性。方法用单链构象多态性和（或）聚合酶链反应产物直接测序法对257例冠状动脉粥样硬化性心脏病阳性病例、157例冠状动脉粥样硬化性心脏病阴性对照及242名健康体检者MEF2A基因的编码区和5′非翻译区进行全基因扫描、发现多态性位点，明确多态性各位点的等位基因频率和基因型频率，研究不同基因型与冠状动脉粥样硬化性心脏病发生的相关性。结果在MEF2A基因的编码区中共筛查到4处基因多态性位点，其中3处为单核苷酸多态性位点（891C／T，1305G／A，1353G／T），1处为三联核苷酸缺失多态性位点（1294～1296CCG／-）。经病例一对照研究显示，891C／T位点TT基因型频率在病例组和对照组分别为8．2％和3．9％，经统计学检验差异无统计学意义（P=0．088）。其余3个位点的等位基因频率和基因型频率在病例组和对照组之间分布相近，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MEF2A基因的4个多态性位点（891C／T，1305G／A，1353G／T，1294-1296CCG／-）与我国汉族人群中冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生无显著相关性。
- 肖尧何青戴大鹏周晓阳张志欣季福绥孙福成许锋钱贻简蔡剑平
- 关键词：冠状动脉疾病肌细胞增强因子2A基因
- 包括1009C>A突变的CYP2C9基因片段、所编码的蛋白质片段及其应用
- 本发明属于生物学领域，涉及单碱基突变。更具体地，本发明涉及CYP2C9基因对应于SEQ？ID？NO.2的第1009位的突变位点，所述位点由野生型的C突变为A，包含该突变位点的核酸片段、其编码的蛋白质片段及其应用。本发明还...
- 蔡剑平戴大鹏胡国新李传保王双虎耿培武
- 文献传递
