徐雅静
- 作品数:7 被引量:17H指数:3
- 供职机构:中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 急性髓系白血病患者造血干/祖细胞特异性微小RNA的筛选及表达研究被引量:1
- 2012年
- 目的筛选和分析急性髓系白血病(AML)患者骨髓造血干/祖细胞(HSPC)特异性微小RNA(miRNA,miR)的表达及其水平。方法分选AML患者骨髓及造血干细胞移植供者(正常对照)外周血CD34+细胞,提取细胞总RNA,通过与miRNA芯片杂交后筛选差异表达的miRNA,随后采用实时定量PCR技术对差异表达的miR-10a和miR-220c进行定量验证,并进行DNA序列分析。结果miRNA芯片杂交结果显示,AML患者骨髓与正常对照CD34+细胞之间,表达差异达1倍以上的miRNA有191个。差异有统计学意义的有94个,其中44个表达增高,50个表达降低。实时定量PCR结果显示,AML患者骨髓CD34+细胞miR-10a和miR-220c表达水平是正常对照的19.6%和19.0%,PCR产物克隆DNA测序以及DNA序列同源检索证实确为miR-10a和miR-220c。结论AML患者与正常人HSPC存在多种差异表达的miRNA,miR-10a和miR-220c表达明显下调。
- 王光平张书芹朱平彭敏源谭三勤银辉徐雅静陈炎陈方平
- 关键词:微小RNA
- 急性髓系白血病细胞单链DNA适体的体外筛选
- 2012年
- 目的:筛选识别急性髓系白血病M2型(acute myeloblastic leukemia M2 subtype,AML-M2)CD33+/CD34-细胞的核酸适体(aptamers)。方法:以AML-M2型白血病CD33+/CD34-细胞为靶细胞,正常人CD33+/CD34-细胞为反筛选细胞,采用细胞-指数富集配体系统进化(cell-systematic evolution of ligands by exponential enrichment,C-SELEX)技术,体外反复筛选单链DNA(single strand deoxyribonucleic acid,ssDNA)文库的适体,经聚合酶链式反应(polymerasechain reaction,PCR)扩增产生次级文库。然后将最终轮次的次级ssDNA文库克隆、测序并分析各适体的一级和二级结构。结果:琼脂糖凝胶电泳结果显示:每轮筛选出来的次级ssDNA文库PCR扩增产物均可见到清晰的DNA条带。经过13轮的反复筛选,次级ssDNA文库与细胞结合的荧光强度从2.14%上升到51.12%,至第13轮趋于稳定状态。对30个克隆子序列测定结果显示:22个适体一级结构分别含有AAGTA,TATCT,AGATG和AAATT 4个保守序列,另8个适体无此保守序列。二级结构模拟结果显示:30个适体含有4种不同的茎环、凸环模拟结构。结论:C-SELEX技术可用于急性髓系白血病原代细胞适体的筛选,筛选到的AML-M2型白血病CD33+/CD34-细胞适体有望用于白血病的诊断与治疗。
- 朱平王光平张书芹徐雅静彭敏源银辉陈焱谭三勤陈方平
- 关键词:适体
- 丹参联合Lipo-PGE1预防外周血造血干细胞移植中肝静脉闭塞病临床观察被引量:5
- 2005年
- 本文探讨造血干细胞移植术后以丹参联合前列腺素E1脂质微球预防肝静脉闭塞病,结果8例患者均未发生肝静脉闭塞病,也无其他副作用,认为丹参联合前列腺素E1脂质微球预防肝静脉闭塞病是安全可行的。
- 何群陈方平徐雅静赵谢兰
- 关键词:肝静脉闭塞病造血干细胞移植
- 异基因外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病被引量:6
- 2002年
- 目的 :探讨异基因外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病的疗效。方法 :用异基因外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病 4例 ,预处理方案用TBI 8- 9Gy(分 2d) +CTX 12 0mg/kg。预防移植物抗缩主病 (GVHD)用CSA +短程MTX。结果 :全部患者移植后重建造血 ,DNA序列分析表明 1个月内移植物植入 ,4例患者均出现不同程度的GVHD ,1例出现Ⅳ度aGVHD ,移植后 2个月死于颅内出血 ,其余 3例仍完全缓解 (CR) ,最长者达 16个月。结论 :ALLO -PBSCT是目前治疗恶性血液病最有效的方法之一 ,防治GVHD仍然是临床移植中的一个重要问题。
- 钟美佐陈方平舒毅刚徐雅静欧阳红兵
- 关键词:恶性血液病造血干细胞移植异基因疗效
- 急性髓系白血病CD33^+/CD34^+细胞表面核酸适配体的筛选及结构分析被引量:5
- 2011年
- 目前,对急性白血病细胞表面特异性分子标记物所知甚少,因而白血病的诊断尚缺乏白血病细胞的特异性方法。为此,本研究采用细胞-指数富集配体系统进化(cell-systematic evolution of ligands by exponentialenrichment,cSELEX)技术,筛选与急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)M2型(AML-M2)患者CD33+/CD34+细胞结合的核酸适配体(aptamer),为寻找AML-M2白血病细胞表面特异性分子标记物提供基础。首先,通过免疫磁珠方法分选出AML-M2患者骨髓CD33+/CD34+细胞并将其作为靶细胞,正常人CD33+/CD34+细胞为反筛选细胞,采用cSELEX技术,从单链DNA(single strand deoxyribonucleic acid,ssDNA)文库中筛选与AML-M2CD33+/CD34+细胞结合的适配体。随后,通过克隆和测序分析各适配体的结构。结果显示,经过13轮次的反复筛选,ssDNA文库的适配体与AML-M2患者CD33+/CD34+细胞的富集度从0.7%增加到52.9%,至第13轮时趋于稳定。对所获得的30个适配体序列分析表明,大多数适配体含有CCCCT、CTCTC和CTCAC保守序列中的一种。二级结构分析显示,30个适配体中含有3种不同类型的模拟二级结构。结论 :本研究成功筛选到AML-M2型白血病CD33+/CD34+细胞的适配体,这为进一步寻找AML-M2白血病细胞表面特异性分子标记物以及AML-M2型白血病的分子诊断创造了基础。
- 张书芹王光平朱平梁嘉佳徐雅静彭敏源陈炎谭三勤陈方平
- 关键词:急性髓系白血病适配体
- FISH检测慢性淋巴细胞白血病P53、D13S25、ATM基因缺失及其预后价值
- 2013年
- 目的:研究慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者分子遗传学异常情况及其预后价值。方法:采用P53、D13S25、ATM基因序列特异性DNA探针,应用荧光原位杂交(FISH)技术和常规细胞遗传学(CC)方法对75例初治CLL患者进行检测,并分析P53、D13S25、ATM基因缺失与临床指标及FC(氟达拉滨加环磷酰胺)方案化疗疗效之间的相关性。结果:CC结果显示12.8%患者有核型异常,5例未见核分裂相;FISH结果发现58.7%患者有基因异常,其中21.3%伴有P53基因缺失,29.3%伴有D13S25基因缺失,16%伴有ATM基因缺失,8.0%为复杂基因组异常。32例患者接受FC方案化疗,P53基因阴性组与阳性组完全缓解(CR)率分别为48.0%和0(P=0.029);D13S25基因阴性组与阳性组CR率分别为39.1%和33.3%(P=1.000);ATM基因阴性组与阳性组CR率分别为50%和0(P=0.014)。ATM基因缺失与患者血红蛋白水平具有相关性(P=0.019),且易出现广泛淋巴结肿大(P=0.010);而P53、D13S25、ATM基因缺失与其他临床指标如性别、年龄、骨髓及外周血淋巴细胞计数、乳酸脱氢酶(LDH)、β-微球蛋白(β-MG)及Binet分期无明显相关性。结论:FISH较CC更能有效检出CLL患者的分子遗传学异常;FC方案对伴有P53、ATM基因缺失的患者疗效差,而对D13S25缺失患者疗效较好;但FISH检测的分子遗传学异常对CLL患者的预后意义尚需进一步扩大样本数及长期随访观察。
- 高银方鹏张国平曹鹏飞徐雅静赵谢兰李晓林陈方平
- 关键词:荧光原位杂交慢性淋巴细胞白血病P53基因ATM基因
- 艾滋病合并播散型组织胞浆菌病1例
- 2004年
- 李晓林徐雅静
- 关键词:播散型组织胞浆菌病艾滋病发病淋巴结肿大播散性组织胞浆菌病