张豪 作品数:7 被引量:32 H指数:3 供职机构: 广东药学院生命科学与生物制药学院 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
肝素对慢性肾病大鼠骨骼的影响 目的普通肝素在慢性肾病病人血液透析过程中有广泛的应用。在此之前,已有研究证明肝素引起正常骨的骨量丢失,而肝素常用于尿毒症的血液透析,它如何影响慢性肾病骨代谢目前未见文献报道。本文探究肝素对慢性肾病大鼠骨骼的影响。方法40... 张豪 孟彦 李英彬 陈珺 金小冬 左力 李青南关键词:普通肝素 骨代谢 慢性肾病 肾性骨营养不良 文献传递 高磷联合腺嘌呤饮食诱导大鼠高转化型肾性骨病模型的建立与分析 被引量:4 2014年 目的探讨高磷联合腺嘌呤制作大鼠慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)模型诱导的骨矿代谢异常。方法雄性3月龄SD大鼠30只,随机分成三组:基础组(Basal)、对照组(Control)、慢性肾病组(CKD),实验持续6周。所有大鼠先饲养两周以适应环境,Basal在实验开始时处死;Control组给予高磷(1.03%)饮食;CKD组前四周给予腺嘌呤(0.75%)和高磷(1.03%)饮食,后两周给予不含腺嘌呤的高磷(1.03%)饮食。所有动物在处死前进行体内双荧光标记。实验结束时,取左侧胫骨上段(proximal tibia metaphometry,PTM)不脱钙包埋,并采用骨组织形态计量学方法分析。结果与Basal组相比:6周高磷饮食的Control组大鼠骨组织未出现静态参数、生长板参数的变化;而动态参数显示矿化沉积率(MAR)、类骨质体积百分数(%OV/BV)明显增加,矿化延迟时间(MLT)明显减少。与Control组相比:CKD组骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、骨小梁数量(Tb.N)显著降低,骨小梁分离度(Tb.Sp)显著性升高;荧光周长百分率(%L.Pm)、矿化沉积率(MAR)、骨形成率(BRF/TV、BRF/BS、BRF/BV)、类骨质周长百分数(%O.Pm)、类骨质面积百分数(%OV/BV)、每毫米成骨细胞数量(Ob.N)、成骨细胞贴壁周长(%Ob.S.Pm)、每毫米破骨细胞数(Oc.N)、破骨细胞贴壁周长(%Oc.S.Pm)、明显升高,MLT与髙磷对照组比无变化,与Basal组比也减少。生长板参数显示:生长板宽度(G.P.Wi)、纵向生长率(L.G.R)明显减少,但是退行细胞高度(D.C.H)没有改变。结论 CKD模型导致骨的变化表现为明显的骨高转换模型,既促进骨形成,也促进骨吸收;最终骨量减少,说明骨吸收大于骨形成。生长板参数G.P.Wi和L.G.R减少,说明此模型对软骨下成骨有抑制作用。 张豪 孟彦 金小冬 陈珺 李英彬 黄韧 左力 李青南关键词:腺嘌呤 慢性肾脏病 成骨细胞内源性ENaC全基因组表达谱差异和α-ENaC siRNA与骨代谢的相关性研究 目的:探索ENAC信号通路在骨代谢中的作用。方法:从新生大鼠收集成骨细胞。使用ENAC的特异性抑制剂阿米洛利进行处理。用MTT法检测成骨细胞的增殖。用基因芯片检测成骨细胞全基因组表达谱。用定量PCR验证差异表达的基因。α... 杨国柱 刘剑 吴越 陈珺 陆幸妍 卢丽 金小东 张豪 李青南关键词:上皮钠通道 成骨细胞增殖 基因表达谱 小干扰RNA 文献传递 骨形态计量学目前应用专家共识 被引量:21 2014年 1960年,美国骨整形外科医生Harold Frost提出一种定量研究骨微结构和骨量的技术——骨组织形态计量学(BHMT),其采用不脱钙硬包埋法和活体荧光标记法进行骨组织标本制作,更好地保留了骨组织微细结构。50多年来的实践证实BHMT是目前评价骨转换与骨矿化最常用和有效的实验手段,至今仍是骨代谢和矿化评价的金标准。目前国际上有两套常用的标准骨组织形态计量学方法:一是Harold Frost与美国犹他大学医学院放射生物系Webster S.S.Jee教授及Sun Valley Hard Tissue Workshops一起发展并提出的BHMT标准命名法,下文简称Dr.Frost and Jee教授团队命名法。二是在美国医生A.Michael Parfitt于1980年提出的一套强调骨组织微结构研究重要性的体视学测量方法基础上,由美国骨矿研究协会(ASBMR)综合提出的标准命名法(1987年第一版和2012年第二版)。上述两种系统命名法均使用广泛,每套系统的指标都很多且各有侧重,使用时可按具体实验需要选择最为适用的系统。本文将讨论2种方法的异同点及其在BHMT研究中的应用。 陈珺 张豪 杨国柱 陆幸研 金小冬 卢丽 李青南关键词:骨组织形态计量学 骨代谢 骨矿化 大鼠肾性骨病模型皮质骨骨量及结构的变化 被引量:1 2015年 目的:观察腺嘌呤联合高磷饮食建立的肾性骨病模型大鼠的皮质骨骨量和骨结构的形态学变化,并探讨其骨矿代谢情况及机制. 方法:3月龄雄性SD大鼠24只,随机分为腺嘌呤模型组(M组,1~4周予含腺嘌呤的高磷饮食,5~6周高磷饮食饲养)和高磷饮食对照组(C组,高磷饮食饲养6周);皮下注射钙黄绿素进行体内双荧光标记,处死大鼠后取左侧胫骨中段不脱钙包埋制备骨标本,骨组织形态计量学分析骨量和骨结构变化情况.结果:静态参数显示:与C组相比,M组骨组织总面积明显变小、皮质骨面积百分比和皮质骨厚度显著降低,骨髓腔面积百分比明显增大;胫骨皮质上出现侵蚀小孔.动态参数显示:与C组相比,M组骨外膜面荧光标记周长百分比无显著变化,但骨矿化沉积率、骨形成率明显增加;骨内膜面荧光标记周长百分比、骨矿化沉积率明显提高,骨形成率和骨吸收周长百分数明显增加. 结论:腺嘌呤作用下高磷饮食大鼠胫骨皮质骨的骨外膜、内膜的骨形成和吸收活跃;皮质骨内外膜骨量丢失,说明骨吸收大于骨形成、骨偶联失衡而导致皮质厚度减少,处于明显的骨高转化代谢状态. 陈珺 孟彦 钟雁 张豪 杨国柱 陆幸妍 李敏 左力 李青南关键词:腺嘌呤 皮质骨 成骨细胞内源性ENaC全基因组表达谱差异和α-ENaC siRNA与骨代谢的相关性研究 杨国柱 刘剑 吴越 陈珺 陆幸妍 卢丽 金小东 张豪 李青南关键词:上皮钠通道 成骨细胞增殖 基因表达谱 小干扰RNA 上皮钠离子通道对大鼠破骨细胞分化和骨吸收功能的影响 被引量:6 2016年 目的本文探讨上皮钠离子通道(ENa C)对破骨细胞功能和活性的影响。方法采用大鼠巨噬细胞集落刺激因子和核转录因子-κB受体活化因子配体诱导大鼠骨髓单核细胞使其分化为破骨细胞。以1.5×104密度接种到12孔板,查随机表分3孔为1组,分为4组:Control组和不同浓度阿米洛利(Ami,ENa C的抑制剂)组。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色进行阳性破骨细胞鉴定;将破骨细胞和骨片共同培养,测定骨吸收陷窝的数目;用RT-PCR技术分析破骨细胞标志酶基因组织蛋白酶K(CK)的表达。结果不同浓度的Ami处理破骨细胞后,TRAP染色阳性破骨细胞减少,抑制破骨细胞的形成和骨吸收,而且降低破骨细胞特异性基因CK的表达。结论本次实验在细胞水平证明ENa C在破骨细胞上的表达并且调控破骨细胞的分化和骨吸收,说明ENa C可能参与破骨细胞的功能调节,提示破骨细胞可能存在一个与ENa C相关调节的新途径,为骨代谢的研究提供了一个新思路。 虎松艳 金小冬 张豪 陈珺 杨国柱 王晓东 唐璐 陆幸妍 卢丽 李青南关键词:破骨细胞 阿米洛利 免疫荧光