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杨国柱: 作品数：45 被引量：139H指数：7; 供职机构：广东药科大学生命科学与生物制药学院广东省生物技术候选药物研究重点实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学社会学更多>>

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基于四环素调控系统的肝脏特异表达的双转基因小鼠的研究: 本文在建立ApoE-rtTATgM的同时，本实验室同期制备带有四环素反应部分TRE的TRE-HCV-C的片段，通过显微注射法制备TRE-HCV-CTgM，通过PCR和Southernblot二级筛选法及传代实验，将Apo...; 杨国柱; 关键词：四环素转基因小鼠丙型肝炎病毒核心蛋白; 文献传递

βLCR对β地中海贫血基因在转基因小鼠体内表达的影响: 2007年; 目的:明确在转基因小鼠体内,βLCR对β地中海贫血基因表达的影响。方法:将完整人β-IVSⅡ-654地中海贫血基因,与串连了人βLCR的β-IVSⅡ-654地中海贫血基因分别经显微注射法制作转基因小鼠;荧光定量RT-PCR法检测β-IVSⅡ-654地贫基因在转基因小鼠体内的表达;采用统计分析比较两类转基因鼠中外源基因的表达量。结果:成功建立两类整合了人β-IVSⅡ-654地贫基因的转基因小鼠模型。荧光定量RT-PCR分析结果表明,在整合了串连人βLCR的β-IVSⅡ-654地贫基因的小鼠体内,外源基因mRNA的表达量远高于仅整合β-IVSⅡ-654地贫基因的小鼠(统计分析P值)。结论:βLCR核心片段的存在是β珠蛋白基因家族(包括β-地贫基因)在转基因小鼠体内获得高效表达的必要条件。; 卢丽黄冰陈系古黄树林杨国柱高楠贾秀华彭展; 关键词：Β地中海贫血转基因小鼠基因表达

成骨细胞内源性ENaC全基因组表达谱差异和α-ENaC siRNA与骨代谢的相关性研究: 目的:探索ENAC信号通路在骨代谢中的作用。方法:从新生大鼠收集成骨细胞。使用ENAC的特异性抑制剂阿米洛利进行处理。用MTT法检测成骨细胞的增殖。用基因芯片检测成骨细胞全基因组表达谱。用定量PCR验证差异表达的基因。α...; 杨国柱刘剑吴越陈珺陆幸妍卢丽金小东张豪李青南; 关键词：上皮钠通道成骨细胞增殖基因表达谱小干扰RNA; 文献传递

骨形态计量学目前应用专家共识被引量：21: 2014年; 1960年,美国骨整形外科医生Harold Frost提出一种定量研究骨微结构和骨量的技术——骨组织形态计量学(BHMT),其采用不脱钙硬包埋法和活体荧光标记法进行骨组织标本制作,更好地保留了骨组织微细结构。50多年来的实践证实BHMT是目前评价骨转换与骨矿化最常用和有效的实验手段,至今仍是骨代谢和矿化评价的金标准。目前国际上有两套常用的标准骨组织形态计量学方法:一是Harold Frost与美国犹他大学医学院放射生物系Webster S.S.Jee教授及Sun Valley Hard Tissue Workshops一起发展并提出的BHMT标准命名法,下文简称Dr.Frost and Jee教授团队命名法。二是在美国医生A.Michael Parfitt于1980年提出的一套强调骨组织微结构研究重要性的体视学测量方法基础上,由美国骨矿研究协会(ASBMR)综合提出的标准命名法(1987年第一版和2012年第二版)。上述两种系统命名法均使用广泛,每套系统的指标都很多且各有侧重,使用时可按具体实验需要选择最为适用的系统。本文将讨论2种方法的异同点及其在BHMT研究中的应用。; 陈珺张豪杨国柱陆幸研金小冬卢丽李青南; 关键词：骨组织形态计量学骨代谢骨矿化

地塞米松诱导近交系和封闭群Wistar大鼠骨骼肌萎缩效应比较被引量：1: 2017年; 目的比较近交系和封闭群Wistar大鼠对地塞米松(dexamethasone,Dex)诱导骨骼肌萎缩的药物效应,探讨建立大鼠糖皮质激素性骨骼肌萎缩症(glucocorticoid-induced muscular atrophy,GIMA)模型的优选方案。方法两品系大鼠各32只采用数字表法随机分为4组:对照组(C组)肌肉注射0.9%氯化钠注射液1.0 m L/kg,每周3次;低频组(L组)、中频组(M组)和高频组(H组)分别每周1、3、5次肌肉注射Dex 1.0 mg/kg,给药90 d,取腓肠肌进行形态学及糖皮质激素受体(glucocorticoid receptors,GR)和肌肉萎缩盒F蛋白(muscle atrophy F-box,MAFbx)基因mRNA表达水平检测。结果 (1)两品系大鼠H组的体质量[近交系:(158.4±7.3)g,封闭群:(196.5±14.4)g]较对照组[近交系:(223.7±10.5)g,封闭群:(279.5±14.5)g]显著减小;两品系大鼠H组的腓肠肌系数变化率[近交系:(-10.90±0.07)%,封闭群:(-13.60±0.12)%]较对照组[近交系:(±0.05)%,封闭群:(±0.01)%]显著减小;M、H组肌纤维横截面积变化率[近交系M和H组:(-13.00±2.00)%、(-29.00±2.00)%,封闭群M和H组:(-31.00±2.00)%、(-35.00±2.00)%较对照组近交系:(±3.40)%,封闭群:(±2.30%)]显著减小;用药组Ⅱ型纤维横截面积变化率[近交系L、M和H组:(-18.00±2.00)%、(-25.00±3.00)%、(-38.00±2.00)%,封闭群L、M和H组:(-45.00±1.00)%、(-53.00±1.00)%、(-44.00±2.00)%较对照组近交系:(±3.00)%,封闭群:(±3.00)%]显著减少。随给药频次增加,近交系大鼠Ⅱ型纤维横截面积变化率减少且组间差异有统计学意义(P<0.05)。(2)两品系大鼠各给药组MAFbx mRNA表达变化率[近交系L、M、H组:(175.00±10.00)%、(675.00±25.00)%、(2 125.00±25.00)%,封闭群L、M、H组:(15.00±2.00)%、(21.00±6.00)%、(33.00±3.00)%]均随给药频次增加而显著增高且组间差异有统计学意义(P<0.05)。近交系大鼠M组GR mRNA表达变化率(400.00±25.00)%和H组GR mRNA表达变化率(750.00±37.00)%较对照组(±37.00)%显著增高,但封闭群大鼠M组GR mRNA表达变化率(-26.00±5.; 翟玉莹李青南刘洋林晓文叶小天陈珺卢丽杨国柱陆幸妍

上皮钠离子通道参与雌激素影响成骨细胞成骨的作用被引量：10: 2011年; 目的探讨雌激素(17β-estradiol)对大鼠骨髓基质干细胞分化的成骨细胞上皮钠离子通道(ENaC)表达和功能的影响。方法采用大鼠骨髓基质干细胞来源的成骨细胞,通过CCK-8试剂盒和AKP试剂盒分别测定雌激素对细胞增殖和分化的影响,通过半定量PCR方法测定雌激素对成骨细胞ENaC和成骨相关基因表达的影响。结果雌激素能促进初级成骨细胞增殖,且较高浓度时(1×10-7,1×10-5mol.L-1)促增殖作用显著(与对照组相比,P<0.05);联用阿米洛利处理后各组细胞增殖速度均有所降低,其中高浓度E2组显著降低(与E2单独处理组相比,P<0.05);雌激素能提高成骨细胞上α-ENaC、γ-ENaC基因的表达水平,且增加趋势与成骨相关基因(Coll-Ia、OC、ALP、ON)mRNA表达的增加趋势一致。结论雌激素促进骨形成的同时也增加ENaC mRNA表达,而阿米洛利(ENaC抑制剂)能阻断雌激素的促成骨作用,说明ENaC可能参与成骨细胞成骨,提示成骨细胞可能存在一个与ENaC相关的调节新途径,为骨代谢的研究提供了一个新思路。; 陈珺巫小容卢丽杨国柱陆幸妍高建林李青南; 关键词：雌激素骨髓基质干细胞成骨细胞

类固醇肌萎缩症与上皮钠通道表达的实验研究被引量：1: 2016年; 目的基于类固醇肌萎缩症(SMA)大鼠模型,分析大鼠骨骼肌萎缩与其上皮钠通道蛋白(ENaC)表达的相关性,探讨ENaC在SMA发病机制中的可能作用。方法将32只3个月龄雌性SD大鼠分为4组分别给药:对照组(C组)每周4次肌内注射生理盐水;低频给药组(L组)、中频给药组(M组)和高频给药(H组)分别予以每周2、4、6次肌内注射地塞米松(Dex)每次1.0mg/kg。给药4周停药处死,取腓肠肌称质量,石蜡包埋制片,行苏木精-伊红(HE)染色形态学观察,肌纤维横截面积(FCSA)测量,以及糖皮质激素受体(GR)和α-上皮钠通道蛋白(α-ENaC)免疫组织化学检测(IHC)及其相关性分析。结果 (1)各给药组大鼠体质量和腓肠肌湿质量均较C组下降,且有剂量依赖性。(2)各给药组FCSA均较C组减少,且有剂量依赖性。(3)GR的M和H组积分光密度(IOD)值较C组增高;α-ENaC的L、M和H组IOD值较C组增高,且有剂量依赖性;GR和α-ENaC的IOD值变化呈正相关。结论 GC诱导骨骼肌组织ENaC表达增高,可能与SMA的肌萎缩病变相关。; 陆幸妍翟玉莹陈鑫刘洋林晓文陈珺杨国柱卢丽李青南黄韧; 关键词：地塞米松

不同频率给予地塞米松对大鼠胫骨皮质骨和松质骨的影响: 2013年; 目的研究不同频率给予地塞米松(Dex)对大鼠胫骨皮质骨和松质骨骨质疏松的影响。方法 3月龄雌性SD大鼠肌注给予Dex 1mg·kg-1,给药频率分别为每周2次、4次和6次,共计给药30d。取胫骨上段和中段进行石蜡包埋,HE染色观察骨结构变化,结合骨形态计量学检测松质骨的骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、骨小梁宽度(Tb.Wi)、骨小梁数量(Tb.N)和骨小梁分离度(Tb.Sp),以及皮质骨的骨组织总面积(T.Ar)、皮质骨厚度(Ct.Th)、皮质骨面积(Ct.Ar)、骨髓腔面积(Ma.Ar),以及骨外膜面周长(P-Pm)和骨内膜面周长(E-Pm)。结果①胫骨上段松质骨:HE染色结果显示,正常对照组骨小梁排列密集,小梁较宽;每周2次组与之相比无明显变化,4次和6次组Tb.Wi变窄(P<0.05)。骨形态计量学进一步确认,与正常组相比,2次组无明显变化;4次及6次组%Tb.Ar和Tb.Wi均明显减少(P<0.05),而Tb.N和Tb.Sp无显著变化。②胫骨中段皮质骨:HE染色结果发现,正常对照组皮质骨切片呈现淡红色、中空环状结构;与正常对照组相比,2次和4次组未见明显差异;6次组Ct.Th和Ct.Ar百分比相对减少(P<0.05)。骨形态计量学确认,与正常对照组相比,6次组T.Ar,P-Pm,Ct.Th和Ct.Ar均明显减少(P<0.05),Ma.Ar,E-Pm无变化,Ma.Ar明显变大(P<0.05)。2次组T.Ar和Ct.Th显著减少(P<0.05),4次组仅T.Ar减少(P<0.05),其他指标均无显著差异。结论 Dex的给药频率影响骨质疏松,增加糖皮质激素给药的频率,可以缩短骨质疏松形成时间。; 杨国柱李青南陈嘉仪林晓静陈珺卢丽贾欢欢黄韧陆幸妍; 关键词：糖皮质激素性骨质疏松胫骨松质骨皮质骨骨组织形态计量学

血清药理学研究车前子对成骨细胞功能的影响被引量：6: 2012年; 目的:研究车前子含药血清对大鼠颅骨成骨细胞体系增殖、分化及成骨能力的影响,并初步探讨上皮钠离子通道(ENaC)参与车前子调节成骨细胞功能的作用。方法:按血清药理学实验方法制备车前子含药血清和对照血清,采用酶消化法分离培养大鼠成骨细胞,CCK-8试剂盒和AKP试剂盒分别测定车前子含药血清对细胞增殖和分化的影响,半定量PCR方法测定车前子含药血清对成骨细胞ENaC和成骨功能指标基因表达的影响。结果:不同浓度的车前子含药血清均能显著刺激成骨细胞增殖、分化,其促进作用与药物浓度呈正相关关系,具有浓度依赖性;与对照组比较,低浓度车前子含药血清能显著上调成骨细胞α-ENaC基因的表达水平,其增加趋势与成骨功能指标基因(OC、ALP、OP)mRNA表达的增加趋势一致。结论:车前子含药血清不仅刺激成骨细胞增殖分化,在促进骨形成的同时也增加α-ENaC mRNA表达,提示其作用机理可能与ENaC介导的调节途径有关,为中药治疗骨代谢疾病的研究提供了一个新思路。; 陈珺刘家剑卢丽杨国柱陆幸妍黄剑李青南; 关键词：血清药理学成骨细胞

不同浓度 hTNFα对软骨细胞及其基质相关基因表达的影响: 2015年; 目的探讨软骨细胞在肿瘤坏死因子(TNFα)作用下对其分泌基质蛋白及相关基因mRNA表达的影响。方法体外培养的小鼠软骨细胞用25,50,100 ng/ml的h TNFα干预,不加入TNFα作为对照,通过RT-q PCR检测h TNFα对软骨细胞分泌基质蛋白及相关基因mRNA表达的影响。结果 h TNFα能降低软骨细胞分泌的Ⅱ型胶原及刺激促Ⅱ型胶原分泌的SOX9基因的表达;对基质可提高基质酶MMP-9,MMP-13,ADAMTS-4和ADAMTS-5基因的表达,提高炎性因子IL-1α,TGFβ,并增加凋亡基因BAX,caspase3的表达。结论 h TNFα通过不同途径影响软骨细胞及基质相关基因的表达,从而促进了关节软骨的降解。; 李敏李舸贾欢欢吴玉娥唐璐陆幸妍陈珺杨国柱张钰李青南; 关键词：软骨细胞软骨基质白细胞介素1Α

杨国柱

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