张淦
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 未成熟树突状细胞体外诱导产生调节性T细胞的研究
- 【目的】探索未成熟树突状细胞(imDC)体外诱导产生纯度较高的调节性T细胞的(Treg)方案。【方法】分离BALB/c小鼠的骨髓细胞,裂红后加重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)和IL-4诱导产生imDC...
- 张淦李永海房爱芳张伟杰
- 输注胰岛抗原特异性Treg细胞延长同系NOD小鼠移植胰岛的存活时间被引量：1
- 2013年
- 目的探讨输注胰岛抗原特异性调节性T淋巴细胞（Treg细胞）对非肥胖糖尿病（NOD）小鼠同系胰岛移植物存活时间的影响。方法n以未成熟树突状细胞（imDc）联合谷氨酸脱羧酶一65在体外诱导童贞T淋巴细胞分化成胰岛抗原特异性Treg细胞。以已发生糖尿病的NOD小鼠为受者，将分离得到的尚未进展为糖尿病的NOD小鼠的胰岛（500胰岛当量）移植至受者的肾包膜下，对照组不行移植，只观察血糖变化；单纯胰岛移植组只进行胰岛移植，不输注胰岛抗原特异性Treg细胞；实验组于术前1d静脉输注1×10^6个胰岛抗原特异性Treg细胞，然后进行胰岛移植。术后检测受者的血糖，以判断移植胰岛的存活时间，观察胰岛移植物的病理学变化。结果对照组血糖持续高于11．1m01／L；单纯胰岛移植组小鼠的血糖于术后1～2d降至正常，到7～17d时开始陆续升高，并维持在术前水平，移植物存活时间为（12．2±2．6）d；实验组小鼠的血糖于术后1～2d降至正常，至第27天开始有小鼠血糖升高超过11．1mmol／L第43天时，所有小鼠的血糖均超过11．1mmol／L，移植物的存活时间为（35．2±4．3）d，明显长于单纯胰岛移植组（P〈0．01）。单纯胰岛移植组的移植胰岛有明显的淋巴细胞浸润，并伴有胰岛细胞严重破坏，胰岛素染色未见完整的胰岛存在，仅有极少量残存的分泌胰岛素的胰岛细胞；实验组第15天时移植胰岛形态完整，仅有少量淋巴细胞浸润，分泌胰岛素的胰岛大量存在。结论体外诱导产生的胰岛抗原特异性Treg细胞可以延缓自身免疫系统对移植胰岛的破坏，明显延长NOD小鼠移植胰岛的存活时间。
- 李永海张淦水丽君房爱芳郭峰向莹张伟杰
- 关键词：胰岛移植
- NOD小鼠未成熟树突状细胞体外诱导淋巴细胞生成并扩增调节性T细胞的研究被引量：2
- 2011年
- 目的探索非肥胖糖尿病(non-obese diabetic,NOD)小鼠未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC)诱导并扩增调节性T细胞(regulatory Tcells,Treg)的优化方案。方法分离、培养NOD小鼠骨髓来源的imDC和淋巴细胞,并进行混合淋巴细胞培养,分别加入白介素(IL)-2、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1、抗CD3抗体和抗CD28抗体刺激淋巴细胞增殖、分化。实验分为4组:对照组(淋巴细胞+IL-2)、实验1组(淋巴细胞+imDC+TGF-β1+IL-2)、实验2组(淋巴细胞+imDC+抗CD3抗体+抗CD28抗体+IL-2)、实验3组(淋巴细胞+imDC+抗CD3抗体+抗CD28抗体+TGF-β1+IL-2)。用流式细胞仪检测各组培养3d后淋巴细胞的扩增情况及混合培养6d淋巴细胞中CD4、CD25及Foxp3的表达。结果 imDC和淋巴细胞混合培养3d后,对照组、实验1组、实验2组和实验3组增殖指数分别为(1.04±0.03)%、(1.26±0.02)%、(1.36±0.01)%和(1.55±0.02)%。实验3组的增殖指数较实验1组和实验2组明显升高(均为P<0.01)。混合培养6d后,对照组、实验1组、实验2组和实验3组的CD4+CD25+T淋巴细胞亚群所占比例分别为(2.41±0.02)%、(17.98±1.02)%、(30.67±2.68)%、(42.84±1.41)%,而CD4+CD25+T淋巴细胞中Foxp3+细胞的比例4组分别为(65.55±1.41)%、(86±1.72)%、(70.29±1.39)%、(92.3±1.99)%,实验3组的淋巴细胞CD4+CD25+、Foxp3+的表达水平较实验1组和实验2组明显升高(均为P<0.01)。结论在imDC和淋巴细胞混合培养时加入TGF-β1、抗CD3抗体、抗CD28抗体可明显刺激imDC诱导扩增Treg,是体外诱导扩增Treg的理想方案之一。
- 李永海张淦李明陈栋向莹郭晖张伟杰
- 关键词：未成熟树突状细胞非肥胖糖尿病抗CD3抗体调节性T细胞
- 两种不同免疫抑制方案对肾移植受者免疫状态的影响被引量：4
- 2014年
- 目的通过比较两种不同免疫抑制方案对肾移植术后受者免疫状态的影响,以寻找有利于移植物长期存活的免疫抑制方案。方法研究纳入亲属活体肾移植受者18例,肾功能稳定。根据应用免疫抑制方案的不同分为两组:西罗莫司(SRL)组8例,方案为SRL+吗替麦考酚酯(MMF)+泼尼松(Pred);他克莫司(TAC)组10例,方案为TAC+MMF+Pred;两组用药时间均超过1年。相应的亲属活体肾移植供者作为空白对照。采用流式细胞技术检测3组外周血调节性T细胞(Treg)(CD4+CD25+Foxp3+)、调节性B细胞(Breg)(CD19+CD5+CD1d+)占外周血淋巴细胞的比例,采用酶联斑点免疫试验(ELISPOT)检测SRL组、TAC组肾移植受者外周血淋巴细胞经其相应供者外周血淋巴细胞特异刺激后,分泌特异性细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)的单个细胞频数。结果 SRL组肾移植受者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占总CD4+T细胞的比例为(6.68±0.42)%,TAC组为(3.59±0.47)%,空白对照组为(6.59±0.36)%,SRL组和空白对照组显著高于TAC组(均P<0.05),SRL组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。SRL组外周血Breg(CD19+CD5+CD1d+)占CD19+B细胞的比例为(16.43±3.56)%,TAC组为(13.09±1.64)%,空白对照组为(16.58±1.31)%,3组之间两两比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。ELISPOT检测SRL组分泌IFN-γ的细胞频数为(117.00±21.54)/500 000,TAC组为(126.00±24.08)/500 000;分泌IL-10的细胞频数SRL组为(347.00±55.29)/500 000,TAC组为(249.00±58.97)/500 000,两组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论长期应用以SRL为基础的免疫抑制方案并不影响Treg占外周血淋巴细胞的比例,而应用以TAC为基础的免疫抑制方案会降低外周血Treg的数量;两种方案都不影响Breg占外周血CD19+B细胞的比例,而且也不影响受者对供者的特异性反应性。
- 房爱芳张淦李永海向莹明长生张伟杰
- 关键词：西罗莫司调节性B细胞免疫状态
