常红星
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人关节软骨来源CD105^+/CD166^+间充质干细胞的分选及其多向分化特性的鉴定
- 2009年
- 目的建立免疫磁珠技术高效分选人关节软骨CD166+/CD105+间充质干细胞(MSCs)的方法,并鉴定其多向分化特性。方法酶消化法获取5例手术切除的膝关节软骨组织细胞,并行原代(P0代)和传代(P2、P4、P6代)培养;流式细胞仪检测其中CD166+/CD105+细胞百分比。比较免疫磁珠连续法与间断法分选P4代培养细胞中CD166+/CD105+细胞的所需时间、分选细胞活度及其百分比和收获率。对连续法分选CD166+/CD105+细胞进行成骨、成软骨、成脂肪诱导,Gomori钙钴法碱性磷酸酶(ALP)、Ⅱ型胶原免疫组化、油红O染色检测其分化特性。结果人关节软骨组织分离细胞和原代培养细胞中的CD105+/CD166+细胞百分比较低[(1.13±0.68)%、(5.16±3.59)%],传代培养细胞中的CD105+/CD166+细胞百分比随传代次数增加而明显增高[P2、P4、P6代培养细胞中CD166+/CD105+细胞百分比分别为(12.68±2.59)%、(17.81±3.80)%、(19.36±3.93)%](P<0.05),传代培养至P4代,其CD105+/CD166+细胞百分比与P6代[(19.36±3.937)%]比较差异不显著(P>0.05)。免疫磁珠连续法分选P4代培养细胞中CD105+/CD166+细胞的百分比高于间断分选法[(93.8±3.95)%vs(90.1±2.43)%,P<0.05],且分选时间显著缩短[(6.8±0.40)hvs(120.0±10.21)h,P<0.01),而细胞收获率[(62.0±7.5)%vs(68.5±7.0)%]和细胞活度[(93.8±1.48)%vs(94.6±1.14)%]差异不显著(P>0.05)。连续法分选CD166+/CD105+细胞成骨诱导后ALP染色阳性;成软骨诱导前Ⅱ型胶原弱阳性,诱导后Ⅱ型胶原阳性;成脂肪诱导后,细胞内可见脂肪滴,油红O染色阳性。结论人关节软骨P4、P6代培养细胞中的MSCs比例较高。免疫磁珠连续法能够高效分选人关节软骨MSCs,所分选的MSCs具有成骨、成软骨及成脂肪分化功能。
- 常红星杨柳李忠陈光兴刘军文亚名戴刚
- 关键词：间充质干细胞免疫磁珠细胞分选
- Wnt3a/β-catenin信号通路诱导人关节软骨间充质祖细胞增殖能力和向软骨分化的能力被引量：8
- 2013年
- 目的研究Wnt3a/β-catenin信号通路对人关节软骨间充质祖细胞(mesenchymal progenitor cells,MPCs)老化的影响。方法 RT-PCR和Western blot检测正常人(对照组)和原发性骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者(OA组)MPCs中Wnt3a/β-catenin的表达。Western blot检测β-catenin在Wnt3a/β-catenin信号激活与阻断后细胞中的积累,MTT检测细胞的增殖情况,RT-PCR检测细胞向软骨细胞诱导后的分化情况。结果 OA组MPCs中Wnt3a和β-catenin蛋白表达明显高于对照组;在Wnt3a/β-catenin信号通路激活的对照组MPCs中β-catenin积累增加,阻断后β-catenin积累降低;Wnt3a/β-catenin信号通路激活的对照组MPCs增殖能力降低,阻断后增殖能力提高;Wnt3a/β-catenin信号通路激活的对照组MPCs向软骨细胞诱导分化后较对照组MPCs中Ⅱ型胶原、aggrecan、SOX9表达降低(P<0.01);Wnt3a/β-catenin信号通路激活的同时加入阻断剂,Ⅱ型胶原、aggrecan、SOX9表达有明显恢复(P<0.05);Wnt3a/β-catenin信号通路阻断组细胞与对照组MPCs组相比没有差异。结论 Wnt3a/β-catenin信号通路激活促进了MPCs老化,Wnt3a/β-catenin信号通路阻断能够抑制MPCs老化,Wnt3a/β-catenin在OA中可能发挥了重要作用。
- 彭旭陈光兴杨柳戴刚常红星刘军
- 关键词：WNT3AΒ-CATENIN
- 免疫磁珠分选人关节软骨CD105+/CD166+间充质干细胞的方法
- 本发明涉及一种细胞分选方法，特别涉及免疫磁珠分选人关节软骨CD105+/CD166+间充质干细胞的方法，该方法为双标志免疫磁珠连续分选法，与目前常用的单标志分离-培养-单标志分离的免疫磁珠间断分选法相比，具有高效、省时、...
- 戴刚常红星刘军李忠陈光兴杨柳
- 文献传递
