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EV71与CB3病毒VP1融合蛋白的构建表达与抗原性初步评价: 2013年; 目的构建pET-22b-ECVP1表达载体,在大肠杆菌中诱导表达肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇B3型(CB3)病毒VP1融合蛋白(ECVP1),并鉴定其抗原性。方法利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分别从EV71与CB3病毒基因组中扩增得到外壳蛋白VP1基因,经重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法拼接构建重组融合蛋白基因(ecvp1),将该片段连接到pET-22b表达载体上,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白,经Western blot鉴定其抗原性。结果pET-22b-ECVP1表达载体构建成功,融合蛋白相对分子量约为65 ku,Western blot分析表明,该融合蛋白能被抗EV71及抗CB3抗体特异识别。结论成功构建pET-22b-ECVP1表达质粒并诱导ECVP1融合蛋白表达,且融合蛋白具有良好的抗原性。; 房华丽王琴罗森高翔屠伟田仁茂刘雄李涛王慧; 关键词：肠道病毒71型柯萨奇B3病毒融合蛋白

抑制2型志贺毒素活性的多肽TF1及其编码基因与应用: 本发明公开了一种抑制2型志贺毒素活性的多肽TF1及其编码基因与应用。本发明提供的多肽，命名为TF1(又名P1)，其氨基酸序列如序列表中序列1所示。该多肽P1可以做成药物以预防和/或治疗由2型志贺毒素或产2型志贺毒素的病原...; 王慧李涛侯晓军王琴屠伟刘越男史晶蔡昆; 文献传递

抑制2型志贺毒素活性的多肽TF1及其编码基因与应用: 本发明公开了一种抑制2型志贺毒素活性的多肽TF1及其编码基因与应用。本发明提供的多肽，命名为TF1(又名P1)，其氨基酸序列如序列表中序列1所示。该多肽P1可以做成药物以预防和/或治疗由2型志贺毒素或产2型志贺毒素的病原...; 王慧李涛侯晓军王琴屠伟刘越男史晶蔡昆

肠出血性大肠杆菌转移紧密黏附素受体的表达及其活性鉴定: 2010年; 目的:在原核表达基因工程菌中实现肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7转移紧密黏附素受体(Translocated Intim in Receptor,Tir)蛋白的高效表达,并对其活性进行初步鉴定。方法:采用PCR方法从EHEC O157:H7基因组中调取tir基因,插入pEASY-T1克隆载体。克隆质粒测序鉴定后,采用NdeⅠ、XhoⅠ限制性核酸内切酶双酶切pEASY-T1-tir质粒获得tir基因,连接同样经过双酶切的pET-22b(+)。表达质粒转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测相对分子质量,Western blotting验证抗原活性。荧光显微镜观察蛋白是否具有嵌入细胞膜的活性。结果:PCR扩增得到1686bp的目的片段。构建的原核表达质粒pET-22b(+)-tir经酶切鉴定及测序与预期序列一致。目的蛋白以裂解上清形式表达,表达量约3mg/ml。经镍柱纯化后纯度达90%以上。重组表达的Tir具有嵌入细胞膜的生物学功能。结论:成功表达了具有生物活性的重组Tir蛋白,为Tir的功能研究奠定基础。; 肖乐王琴蔡昆屠伟侯晓军李涛王慧; 关键词：肠出血性大肠杆菌 TIR 活性鉴定

抑制2型志贺毒素活性的多肽WA8及其编码基因与应用: 本发明公开了一种抑制2型志贺毒素活性的多肽WA8及其编码基因与应用。本发明提供的多肽，命名为WA8(又名P8)，其氨基酸序列如序列表中序列2所示。该多肽P8可以做成药物以预防和/或治疗由2型志贺毒素或产2型志贺毒素的病原...; 王慧李涛侯晓军王琴屠伟刘越男史晶蔡昆; 文献传递

抑制2型志贺毒素活性的多肽WA8及其编码基因与应用: 本发明公开了一种抑制2型志贺毒素活性的多肽WA8及其编码基因与应用。本发明提供的多肽，命名为WA8(又名P8)，其氨基酸序列如序列表中序列2所示。该多肽P8可以做成药物以预防和/或治疗由2型志贺毒素或产2型志贺毒素的病原...; 王慧李涛侯晓军王琴屠伟刘越男史晶蔡昆

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屠伟