姚宏兵
- 作品数：12 被引量：10H指数：2
- 供职机构：甘肃政法学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生政治法律文化科学更多>>
- 甘肃省先天性心脏病环境因素病例调查分析被引量：2
- 2012年
- 目的先天性心脏病(congenital heart defects,CHDs)是最常见的一种心脏畸形,并且具有较高的发病率。先天的心脏畸形是由遗传和环境因素导致的。本文旨在讨论甘肃地区自然环境因素与先天性心脏病的患病风险之间的关系。方法收集甘肃省各县市436例先天性心脏病患者详细资料,从甘肃省的海拔、年平均气温、年平均降水量以及土壤类型方面,用Excel和SPSS17.0进行相关风险环境因素分析。结果高海拔、年平均气温低和缺锌的土壤环境均可能与CHDs的患病风险有相关性。结论甘肃省的高海拔、年平均气温低和土壤缺锌可能成为增加先天性心脏病患病风险的环境因素。
- 谢小冬陈晶晶于敏李培强姚宏兵
- 关键词：先天性心脏病环境因素
- Y14F天花粉蛋白的晶体结构研究被引量：1
- 1997年
- 核糖体失活蛋白（Ribosome inactivating protein,RIP）是广泛存在于植物界的蛋白毒素,天花粉蛋白（Trichosanthin,TCS）又是该家族中的一个重要成员。TCS及其同源蛋白的高分辨率晶体结构为进行结构与功能关系的研究打下了良好的基础,通过对同源蛋白的结构比较发现在结构中存在着很保守的氢键。为了探讨这些保守氢键对结构与功能的影响,我们用基因定位突变的方法,对形成保守氢键的残基进行突变,测定这些突变体的活性与晶体结构,可以加深我们对这些保守氢键所起作用的认识。TCS中Tyr14的羟基与Ser157的主链氧之间形成保守氢键,这一氢键在螺旋α5的弯折处,而且Ser157的主链碳基氧明显偏离了正常螺旋中的与螺旋轴平行的方向,这一现象在已知的RIPs结构中都存在。为了考察这一保守氢键对螺旋α5弯折的形成所起的作用,我们将Tyr14突变为Phe,这样突变后将保留芳香环侧链的特性,突变后的构象变化主要来自这一保守氢键的消失。
- 吴伸阎军姚宏兵董贻诚邵鹏柱
- 关键词：天花粉蛋白突变体晶体结构核糖体失活蛋白
- 天花粉蛋白基因的克隆及其突变体在大肠杆菌中的表达
- 目的：天花粉蛋白(TCS)是一种单链核糖体失活蛋白，它能抑制真核生物蛋白质合成，并具有广谱的抗病毒活性。近期研究发现TCS可专一性地杀死被HIV感染的细胞，而对正常细胞无作用。本实验利用PCR技术从栝楼基因组DNA中扩增...
- 姚宏兵
- 关键词：天花粉蛋白人类免疫缺陷病毒原核表达易错PCR抗病毒活性栝楼
- 文献传递
- 天花粉蛋白Glu160在N-糖苷酶活性中的作用
- 1999年
- 用浸泡法得到了（Ｅ１６０Ａ）天花粉蛋白（ｔｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｉｎ， ＴＣＳ），（Ｅ１６０Ｄ）ＴＣＳ与Ａｄｅ 和（Ｅ１６０Ａ）ＴＣＳ与ＦＭＰ复合物的晶体．在Ｍａｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ 面探测器系统上分别收集了０．２０ ｎｍ ，０．１９ｎｍ 和０．２０５ ｎｍ 分辨率的Ｘ 射线衍射数据，数据处理用Ｍａｒ Ｓｃａｌｅ 程序系统完成．用同晶差值Ｆｏｕｒｉｅｒ法解析了（Ｅ１６０Ａ）ＴＣＳ－Ａｄｅ，（Ｅ１６０Ｄ）ＴＣＳ－Ａｄｅ 和（Ｅ１６０Ａ）ＴＣＳ－ＦＭＰ的晶体结构，结构修正利用Ｘ－ＰＬＯＲ程序，修正结果，晶体学Ｒ因子分别为０．１６６，０．１７６，０．１７９．键长和键角的ＲＭＳ偏差分别为０．００１０ ｎｍ 和２．５０３°，０．００１３ ｎｍ 和２．６６５°，０．００１２ ｎｍ 和２．６７６°．在这三个结构中均未见到Ｇｌｕ１８９侧链方向的改变．Ａｄｅ 或ＦＭＰ仍结合在Ｎ－糖苷酶活性口袋之中，它夹在Ｔｙｒ７０和Ｔｙｒ１１１两个侧链环之间，与Ｔｙｒ７０环近乎平行．这一结果表明：ＴＣＳ中的Ｇｌｕ１６０分别突变成Ａｌａ 和Ａｓｐ，仍能与ＡＭＰ发生Ｎ－糖苷酶反应，但是活性降低了一些．可见Ｇｌｕ１６０对ＴＣＳ与ＡＭＰ的作用是重要的，但不是必要的．
- 李建辉吴伸姚宏兵邵鹏柱董贻诚
- 关键词：天花粉蛋白N-糖苷酶晶体结构AMP
- 甘肃省法庭科学实践中基于分子遗传学的集成创新研究
- 谢小冬孙红兵陶晓岚胡卫星王国建张子龙吴骅杨鑫李晓林刘贤海王涛哈飞苏刚骆继怀李炯李培强姚宏兵
- 本项目建立了甘肃省基于群体遗传学调查、法医学应用评估之上的DNA基础数据库，为DNA分析技术在法庭科学实践的应用提供了可靠的基础资料；由此建立的甘肃省DNA信息查询比对平台覆盖了全省14个地州市，86个县区的重点人群，可...
- 关键词：
- 关键词：法医学分子遗传学DNA分析
- 天花粉蛋白Y14F/R22L定点突变及其活性研究被引量：2
- 1998年
- 利用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）技术，对天然天花粉蛋白（ｎＴＣＳ）基因在Ｔｙｒ１４和Ａｒｇ２２两个保守残基处同时进行定点突变，即Ｔｙｒ１４变成Ｐｈｅ，Ａｒｇ２２变成Ｌｅｕ，然后克隆到ｐＥＴ－８ｃ高效表达载体上，构建成重组质粒ｐＥＴＹ１４Ｆ／Ｒ２２Ｌ．经序列分析，定点突变的结果与预先设计的完全一致，突变后的天花粉蛋白命名为Ｙ１４Ｆ／Ｒ２２ＬＴＣＳ．将ｐＥＴＹ１４Ｆ／Ｒ２２Ｌ转化到Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３，ｐＬｙｓＳ）中，进行表达．经ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ柱纯化，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定，纯度可达９０％．ＲＩＰ活性测定显示，Ｙ１４Ｆ／Ｒ２２ＬＴＣＳ的活性比ｎＴＣＳ降低了７．５倍，活性变化不显著，因此，ＴＣＳ的Ｔｒｙ１４和Ａｒｇ２２对维持其活性部位构象并不是必需的．但由于Ｙ１４Ｆ／Ｒ２２ＬＴＣＳ在Ｅ．ｃｏｌｉ中的表达量与ｎＴＣＳ相比明显下降，因此，Ｔｙｒ１４和Ａｒｇ２２可能与ＴＣＳ翻译后的折叠有关．
- 姚宏兵吴伸董贻诚邵鹏柱
- 关键词：天花粉蛋白定点突变PCR
- Y14F/R22L天花粉蛋白的晶体结构研究被引量：1
- 1998年
- Y14F/R2 2LTCS的晶体结构是用同晶差值Fourier法解得 .经X_PLOR程序修正得到Y14F/R2 2LTCS的分子结构 ,并找到了 6 5个水分子 .对 0 2 3nm分辨率衍射数据的晶体学R因子为 0 185,键长和键角的rms偏差分别为 0 0 0 12nm和 2 6 52° .在Y14F/R2 2LTCS中 ,Tyr14变成Phe ,Phe周围变化很小 ,α5的弯折依然存在 ;Arg2 2变成Leu ,余下的空间被水分子 2 56所占据 ,水分子 2 56与Ala16 1,Ala16 2的主链氧成氢键 ,部分代替Arg的作用 .并讨论了二级结构间保守氢键的作用 .
- 吴伸闫军姚宏兵李建辉邵鹏柱董贻诚
- 关键词：天花粉蛋白突变体晶体结构
- 天花粉蛋白Glu189在N-糖苷酶活性中的作用
- 1999年
- 培养了(E160A,E189A)TCS(天花粉蛋白)的单晶。用浸泡法得到了(E160A,E189A)TCS与Ade复合物的晶体。在MarResearch面探测器系统上分别收集了均为0.20nm分辨率的X射线衍射数据,数据处理用MarScale程序系统完成。用同晶差值Fourier法解析了(E160A,E189A)TCS和(E160A,E189A)TCS-Ade的晶体结构,结构修正利用X-PLOR程序.修正结果,晶体学R因子分别为0.180、0.184,键长和键角的RMS偏差分别为0.0012nm和2.566°、0.0012nm和2.622°。在(E160A,E189A)TCS-Ade中,Ade仍结合在N-糖苷酶活性口袋之中,它夹在Tyr70和Tyr111两个侧链环之间,与Tyr70环近乎平行。这一结果表明:TCS中的Glu160和Glu189同时突变成Ala,仍能与AMP发生N-糖苷酶反应.前文已经证明在(E160A)TCS中Glu189没有援救作用。目前,没有发现Glu189对TCS与AMP的直接作用,但Glu189与其它残基的协同作用及其在TCS与rRNA作用中扮演什么角色,尚待进一步研究。
- 李建辉吴伸姚宏兵邵鹏柱董贻诚
- 关键词：天花粉蛋白突变体N-糖苷酶晶体结构
- (E160A)和(E160D)天花粉蛋白两种突变体晶体结构研究被引量：3
- 1998年
- 培养了（Ｅ１６０Ａ）ＴＣＳ和（Ｅ１６０Ｄ）ＴＣＳ的单晶。在ＭＡＲＲｅｓｅａｒｃｈ面探测器系统上分别收集了０．１９３ｎｍ和０．２０ｎｍ分辨率的Ｘ射线衍射数据。数据处理用ＭＡＲＳＣＡＬＥ程序系统完成。用同晶差值Ｆｏｕｒｉｅｒ法解析了突变体的晶体结构，结构修正利用Ｘ－ＰＬＯＲ程序。修正结果，晶体学Ｒ因子分别为０．１７５，０．１７９，键长和键角的ＲＭＳ偏差分别为０．００１１ｎｍ和２．４５７°，０．００１３ｎｍ和２．６７５°。在这两个突变体的结构中均未见到Ｇｌｕ１８９侧链方向的改变。通过对（Ｅ１６０Ａ）ＴＣＳ和（Ｅ１６０Ｄ）ＴＣＳ的结构比较，说明（Ｅ１６０Ｄ）ＴＣＳ活性低于（Ｅ１６０Ａ）ＴＣＳ的原因：这可能是由于在（Ｅ１６０Ｄ）ＴＣＳ中Ｔｙｒ１１１和Ｔｙｒ７０的侧链都具有较大的运动性，使它们与腺嘌呤碱基的芳香堆垛作用减弱。
- 李建辉吴伸姚宏兵邵鹏柱董贻诚
- 关键词：天花粉蛋白突变体晶体结构
- 甘肃裕固族人群15个STR基因座遗传多态性被引量：2
- 2015年
- 本研究对中国甘肃地区裕固族243名健康无关个体进行15个STR基因座遗传多态性调查。采用Amp FSTR华夏TMPCR直接扩增试剂盒,在AB 9700型扩增仪上进行扩增,利用AB 3500XL遗传分析仪进行基因分型。结果在15个STR基因座共检测出180个等位基因和564种基因型,其分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。对所调查的裕固族人群15个STR基因座具有较好识别能力。
- 陶晓岚刘贤海臧丽丽姚宏兵王涛李建虎
- 关键词：法医物证学STR基因座遗传多态性裕固族
