周雪荣
- 作品数：9 被引量：227H指数：8
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 马铃薯Y病毒基因组3′-端区域的克隆和序列分析被引量：8
- 1991年
- 以马铃薯Y病毒(PVY,中国分离株)基因组RNA的cDNA为模板,我们用聚合酶连锁反应(PCR)合成了完整的外壳蛋白(CP)基因及部分3′末端非编码区序列。在5′-引物Y5中引入了限制性酶NcoI位点及起始密码AUG,3′-引物Y3中引入了Sall位点。PCR产物经NcoI及Sall双酶切后克隆入pGEM衍生质粒,并测定了其中一个克隆pPCY6的CP基因的序列,以此克隆的CP基因片段作探针,从cDNA库中钓出相关的几个克隆,并测定了序列,由此我们获得了包含部分NIb基因,全部的CP基因及3′-非编码区共1317个碱基。序列分析表明,该株系CP基因核苷酸序列与0株系同源性(94.2％)较与N株系(89.6％)同源性稍高,但氨基酸序列的同源性差别不大(分别为93.3％及91.8％)。目前我们已将该基因克隆入双元载体pBI121.1,并通过脓杆菌转化马铃薯,以期得到抗PVY的马铃薯工程株。
- 周雪荣方荣祥王成球莽克强
- 关键词：马铃薯外壳蛋白基因PCRY病毒
- 烟草花药特异表达基因启动子的克隆及序列分析被引量：26
- 1996年
- 通过PCR扩增,从烟草(Nicotiana tabacum cv.NC89)中克隆了花药绒毡层中特异表达基因的启动子,序列分析表明,该启动子含1303个核苷酸,与已报道的序列比较,核苷酸的同源性为99.4％。
- 彭仁旺周雪荣周奕华方荣祥莽克强
- 关键词：烟草启动子基因表达
- 表达马铃薯Y病毒外壳蛋白的转基因烟草的抗病性研究被引量：20
- 1995年
- 将马铃薯Ｙ病毒中国分离物（ＰＶＹ－Ｃ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因，在土壤农杆菌ＬＢＡ４４０４的介导下，转化烟草生产品种ＮＣ８９，获得了６个转基因烟单株系。通过抗性分析发现，６个株系中有一个株系在２００μｇ／ｍｌＰＶＹ－Ｃ的攻毒下，仍未发病。分子检测发现，转基因植物中抗性产生的程度并不是同ＰＶＹ－Ｃ外壳蛋白的表达水平成正相关。
- 项瑜杨兰英周雪荣崔晓江彭学贤
- 关键词：马铃薯Y病毒外壳蛋白转基因植物转基因烟草
- 表达核糖核酸酶基因的雄性不育油菜的获得被引量：53
- 1997年
- 从细菌Ｂａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ染色体ＤＮＡ中克隆了ＲＮａｓｅ（ｂａｒｎａｓｅ）基因，构建了ＴＡ－２９基因５＇调控区（－１３００－＋３）与ｂａｒｎａｓｅ基因的嵌合基因，通过农杆菌介导的遗传转化，获得了“双低”甘蓝型油菜“中双８２１”的转基因植株。转化植株与末转化植株在高度、生长速度、花器形态、花色等方面基本相同，但转化植株花丝短小、花药干瘪、没有花粉；自花授粉或以其为父本进行的异花授粉均不能结实，表现为完全的雄性不育。
- 周雪荣彭仁旺方荣祥陈正华莽克强
- 关键词：油菜核糖核酸酶基因表达基因植物雄性不育
- 双价外壳蛋白基因植物表达载体的构建及马铃薯转基因植株的鉴定被引量：43
- 1994年
- 在克隆了马铃薯Ｘ病毒（ＰＶＸ）、马铃薯Ｙ 病毒（ＰＶＹ）和马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）的外壳蛋白基因的基础上，构建同时包含ＰＶＸ和ＰＶＹ 与ＰＶＹ 和ＰＬＲＶ 两个外壳蛋白基因植物表达框架的表达载体，通过农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）介导转化烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ ）和生产上常用的几个马铃薯（Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ ）优良品种：“Ｆａｖｏｒｉｔａ”、“虎头”、“克４”。经ＰＣＲ检测证明外源基因已整合到植物的染色体上，得到批量转基因植株。在转ＰＶＸ＋ＰＶＹ 外壳蛋白基因的烟草上接种ＰＶＸ （５ μｇ／ｍ Ｌ）、ＰＶＹ（２０ μｇ／ｍ Ｌ）病毒。
- 宋艳茹李枞侯林林张莉枝马庆虎彭学贤崔晓江周雪荣王海云莽克强
- 关键词：外壳蛋白基因转基因植株马铃薯
- RT－PCR检测烟草环斑病毒的研究被引量：23
- 1995年
- 本文报道应用ＲＴ一ＰＣＲ技术检测烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）的结果。根据ＴＲＳＶＲＮＡ－２序列３末端非编码区设计、合成引物一１和引物一２；用ＴＲＳＶＲＮＡ作模板，引物一２作引物，反转录合成ｃＤＮＡ，并以此作模板进行ＰＣＲ扩增，５～６小时内可得到结果，检测粗提液中ＲＮＡ灵敏度达４００ｐｇ，并且可以直接从受侵染的叶片汁液中检出ＴＲＳＶ，为口岸快速检疫推出一个更灵敏、准确的分子生物学新方法。值得推广应用。
- 相宁周雪荣孙彤刘宏迪张成良杨莉
- 关键词：RT-PCR烟草环斑病毒
- 3价转病毒外壳蛋白基因马铃薯的获得被引量：7
- 1994年
- 马铃薯在全世界广泛种植,既是重要的粮食作物,又可作蔬菜,其世界年总产量仅次于小麦、水稻和玉米.马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯卷叶病毒(PLRV)引起的病害是造成我国马铃薯退化的重要原因,严重危害马铃薯生产.尤其是2种甚至3种病毒混合侵染带来的损失远大于各病毒单独侵染.国外科学家的研究表明,表达病毒外壳蛋白(CP)基因的转基因马铃薯能显著延缓该病毒病害症状的发展并减轻其危害程度.美国已获得同时表达PVX和PVY CP基因的双价转基因马铃薯,其中1个转基因株系对这两种病毒的混合侵染表现高抗.国际上还未见转3基因抗病毒马铃薯的报道.
- 崔晓江彭学贤周雪荣莽克强宋艳茹侯林林李枞张莉枝
- 关键词：转基因马铃薯马铃薯
- 转基因雄性不育油菜选育的简介被引量：19
- 1996年
- 转基因雄性不育油菜选育的简介彭仁旺，周雪荣，方荣祥，陈正华，莽克强（中国科学院微生物研究所，北京１０００８０；中国科学院遗传研究所，北京１００１０１）杂种优势的利用是作物生产中用以提高产量、改进品质的重要措施之一，通过雄性不育系培植杂种是杂种优势利用...
- 彭仁旺周雪荣方荣祥陈正华莽克强
- 关键词：油菜雄性不育转基因油菜
- 表达barstar基因及bar基因的转基因油菜的研究被引量：64
- 1998年
- 从细菌Ｂａｃｉｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ染色体ＤＮＡ中克隆了ｂａｒｎａｓｅ抑制剂ｂａｒｓｔａｒ的基因，构建了带有ＴＡ－２９基因５′调控区（－１３００－＋３）与ｂａｒｓｔａｒ基因编码区、ＣａＭＶ３５Ｓ启动子与除草剂抗性基因ｂａｒ两个表达框架的植物表达质粒ｐＢＢＳ。以“双低”油菜“５－４”的子叶柄为受体，通过农杆菌介导的遗传转化，获得了在含有１０ｍｇ／Ｌ卡那霉素和２０ｍｇ／ＬＰＰＴ的筛选培养基上再生的转基因植株。ＰＣＲ分析结果表明，ｂａｒｓｔａｒ基因已整合到油菜染色体上；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测表明，ｂａｒｓｔａｒ基因及ｂａｒ基因在转基因植物中得到了正确的调控与表达。以转基因油菜“５－４”为父本授粉给表达ｂａｒｎａｓｅ基因的雄性不育植株，不育株能正常结实。
- 彭仁旺周雪荣王峻岭王峻岭方荣祥莽克强
- 关键词：抗除草剂基因转基因油菜
