方荣祥
- 作品数：114 被引量：634H指数：14
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 病毒——昆虫—植物三者互作研究进展及展望被引量：11
- 2017年
- 全球气候变暖,极端天气频发,入侵型、新发和重发昆虫传作物病毒病害已经成为限制我国农作物优质高产的主要因素。因缺乏抗病抗虫的种质资源、育种周期长,虫传病害防治难度极大,目前我国农业处于几乎完全依赖化学防控媒介昆虫的被动应付局面,生态与环境成本极大。以往研究虫传病毒病害往往注重病毒和植物寄主两个方面,这些研究为理解作物病毒病害的暴发机制提供了基础知识,但尚未能深入到病害防控的关键节点——媒介昆虫介导的病毒侵染循环这一根本性问题上,导致目前在病毒病害防治实践上缺乏有效抓手。近年来,随着分子生物学和组学研究的飞速发展,以及微观生物学技术和理念对宏观生物学的快速渗透与交叉,病毒—昆虫—植物三者互作机制研究取得了诸多重要进展,在寻找病毒病害流行暴发的宏观生态学现象背后的分子生物学与生物化学机制上取得了长足进步,不但为复杂生态系统多元互作分子机制提供了参考模型,也为通过人工干扰和操纵生物间互作关键节点,从而促进虫传病毒病害的持久防控提供了科学依据和新的有效抓手,变被动应付为主动调控病害灾变过程。文章简要回顾了近年来病毒—昆虫—植物三者互作领域的主要研究进展和发展趋势,并抛砖引玉提出了对未来发展的建议和思考。建议国家组织研究力量,大力加强:(1)大田生产条件下病毒病害发生的多元生物体系互作机制及科学防控科技支撑能力建设;(2)前沿基础和新方法新策略探索及应用平台建设;(3)虫媒病害绿色防控的微生物组学颠覆性技术等方向的探索与突破,力求在虫传作物病毒病害绿色生态防控方面为农业供给侧改革提供强有力的科技创新和支撑能力。
- 叶健龚雨晴方荣祥
- 关键词：介体昆虫植物病毒防控策略
- 宁沪杭地区黄瓜花叶病毒(CMV)株系群划分的初步研究被引量：11
- 1997年
- 宁沪杭地区黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）株系群划分的初步研究程宁辉１杨金水１濮祖芹２方中达２方荣祥３关键词黄瓜花叶病毒，鉴别寄主，株系，毒力黄瓜花叶病毒（ＣｕｃｕｍｂｅｒＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓ，ＣＭＶ）是由蚜虫以非持久性方式传播的世界性分布的植物病毒种群，已...
- 程宁辉杨金水濮祖芹濮祖芹方荣祥
- 关键词：植物病毒黄瓜花叶病毒株系
- 翻译后修饰可能影响黄瓜花叶病毒2b蛋白抑制子活性及稳定性
- 2011年
- 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)编码的2b蛋白具有RNA沉默抑制子功能,为了研究翻译后修饰对2b功能的影响,利用反向PCR定点突变方法对CMV-Q株系2b蛋白的1个预测的磷酸化位点(S40)和2个预测的泛素化/SUMO化位点(K22,K39)进行了点突变,同时将点突变体插入植物表达载体。通过农杆菌共注射法对3个2b突变体的抑制子活性进行了分析,结果证明,当S40突变为A(2bS40A)后,2b抑制局部和系统沉默的活性均大幅降低;当K22突变为R(2bK22R)后,2b的抑制子活性无明显变化;而将K22和K39均突变为R(2bK22R/K39R)后,2b抑制系统沉默的活性则大幅减弱。对叶片中2b突变体的蛋白含量的Western blotting检测表明,与野生型2b蛋白相比,2bK22R在植物中积累水平变化不大,而2bS40A和2bK22R/K39R的蛋白积累量则明显降低,说明K39和S40位点在维持2b蛋白的抑制子活性及其在植物细胞中的稳定性方面起重要作用。
- 李沫贾燕涛方荣祥
- 关键词：黄瓜花叶病毒翻译后修饰
- 烟草抗花叶病新品系“转墓因NC89”选育技术的研究被引量：7
- 1994年
- 本文报导了国内首例抗烟草花叶病毒（ＴＭＶ）和黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）的转基因双抗烟草新品系的选育方法，获得了具有抗ＴＭＶ和ＣＭＶ的双抗优质新品系。在新品系第４—６代的田间试验中，验证了其抗病毒特性的遗传稳定性；与对照品种ＮＣ８９在农艺性状、品质和烘烤特性等方面进行比较，证明转基因抗病新品系除抗病性显著增强外，其它特性均略优于原ＮＣ８９良种。１９９２年在河南省示范推广６６６７ｈｍ~２，转基因抗病新品系对烟草花叶病的相对控制效果为５０％－７０％，防病增产的经济效益显著。
- 周汝鸿张振臣吴青孙清方荣祥荞克强田颖川王桂玲候文华董继超杨静李克治
- 关键词：纯合系TMVCMV
- 烟草花药特异表达基因启动子的克隆及序列分析被引量：26
- 1996年
- 通过PCR扩增,从烟草(Nicotiana tabacum cv.NC89)中克隆了花药绒毡层中特异表达基因的启动子,序列分析表明,该启动子含1303个核苷酸,与已报道的序列比较,核苷酸的同源性为99.4％。
- 彭仁旺周雪荣周奕华方荣祥莽克强
- 关键词：烟草启动子基因表达
- 黄瓜花叶病毒坏死型卫星RNA的cDNA克隆和全序列分析被引量：1
- 1997年
- 从田间发生坏死病害的番茄病株中分离得到黄瓜花叶病毒TN分离物,经研究证实TN分离物带有1株坏死型卫星RNA(TN-SatRNA).利用已知CMV卫星RNA的两端序列作引物扩增并克隆了TN-SatRNA的cDNA.序列分析显示TN-SatRNA全长为390个核苷酸.比较TN-SatRNA与富有代表性的CMV卫星RNA的结构表明,这几种卫星RNA中具有4个结构同源区(Ⅰ:1～81nt,Ⅱ:216～261nt,Ⅲ:278～338nt;Ⅳ:349～390nt),而在82～215nt的区域几种卫星RNA的结构变化较大.在TN-SatRNA的3’端具有已报道的坏死型卫星RNA特征性序列结构.经3’RACE方法确定TN-SatRNA的3’端自然序列,与PCR扩增引物有1个核苷酸的差别.
- 程宁辉濮祖芹方中达方荣祥
- 关键词：黄瓜花叶病毒卫星RNACDNA克隆
- 一种用于去除转基因植物中选择标记基因的方法
- 本发明描述了一种植物病毒表达载体，可在植物细胞中瞬时、高效表达位点特异性重组酶，以消除转基因植物中的选择标记基因的一种新方法。该方法是将植物病毒表达载体导入转基因植物的细胞，来瞬时表达位点特异性重组酶，去除两个同向重组位...
- 方荣祥贾洪革陈晓英
- 文献传递
- A组轮状病毒VP6与霍乱毒素B亚基融合蛋白在大肠杆菌中的表达及生物活性分析被引量：12
- 2001年
- 利用霍乱毒素B亚基 (CholeratoxinBsubunit,CTB)的免疫载体作用 ,将轮状病毒相关抗原引入口服免疫体系 ,可激起有效的粘膜免疫反应 ,这里报道了CTB基因与A组轮状病毒地方株T114VP6全基因的融合 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3 )中进行了融合蛋白的表达。在IPTG诱导下得到分子量为 5 6kD的融合蛋白 ,表达量占菌体蛋白的15 %。分别用抗CT的抗体和抗A组轮状病毒的高价免疫血清进行WesternBlot检测 ,结果证明融合蛋白CTB VP6保留了天然霍乱毒素B亚基及轮状病毒VP6的抗原性。GM1 ELISA检测表明 ,复性后的融合蛋白具有与神经节苷脂GM1 结合的能力。
- 郭婷夏方荣祥李国华钱渊
- 关键词：轮状病毒融合蛋白抗原性大肠杆菌
- 花椰菜花叶病毒(新疆分离物)基因组DNA的全部核苷酸序列被引量：1
- 1985年
- 用Maxam-Gilbert化学切断法,从含全长病毒DNA的克隆pCaMV C17中,测定了CaMV-XJ基因组的全部核苷酸序列。CaMV-XJ DNA含有8,060个碱基对。在不同的译读相位中,CaMV基因组含有6个主要ORF或可能的基因,与其他巳作全序列测定的三个CaMV分离物比较,有三个显著的差别;(1)ORFⅥ编码的氨基酸变化达16％,显著高于其他区域的变化和其他三个分离物之间的差别,(2)在ORFⅣ的近氨基末端有39bp的插入,它与被插入区的序列几乎是直接重复;(3)由于核苷酸置换而引入了终止信号,所以T.Hohn[2]推测,可能存在的ORFⅦ不可能编码有功能的蛋白。
- 方荣祥吴晓军卜明田颖川蔡发兴莽克强
- 关键词：花椰菜花叶病毒DNA序列分析
- 一种利用RNA干扰技术培育抗虫性提高的转基因植物的方法及其专用DNA片段
- 本发明公开了一种利用RNA干扰技术培育抗虫性提高的转基因植物的方法及其专用DNA片段。该DNA片段是式I所示的基因片段，其中，SEQ<Sub>正向</Sub>是ATP合酶E亚基基因的全长cDNA片段中的至少包括19bp的...
- 方荣祥陈晓英郭红艳
- 文献传递
