周峰 作品数:38 被引量:249 H指数:9 供职机构: 华南农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 转基因生物新品种培育专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 理学 更多>>
水稻种子空间搭载的诱变及基因组变化研究 <正>应用自行研制、带空间重离子定位装置的夹心式水稻搭载装置,把广东籼稻栽培品种青华占干种子搭载于神舟飞船三号7天,返地后田间种植、观察,并以300Gy60Co- γ射线处理同类种子及未经处理种子为对照,对各代植株及后代... 骆艺 王旭杰 庄楚雄 卫增泉 颉红梅 周峰 姚涓 梅曼彤文献传递 高空气球搭载诱导水稻育性降低突变体RAPD分析 被引量:6 2004年 选用300对引物,对经高空气球30km搭载飞行8h后返地种植筛选获得的水稻育性降低突变体基因组进行DNA多态性分析,结果发现:育性降低突变体与原种之间存在多态性. 余红兵 周峰 姚鹃 梅曼彤关键词:水稻 高空气球 RAPD分析 转基因耐除草剂大豆及产品中外源成分检测方法的建立 被引量:5 2005年 分别从DNA和蛋白质2个水平上对转基因耐除草剂大豆及其产品的检测方法进行了研究.设计合成引物检测大豆内参照基因Lectin(大豆凝集素)及转基因抗除草剂Roundup Ready大豆外源基因,包括来自土壤细菌Agrobacterium tum efaciens株系CP4的5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶(5-enolpyruvylsh ik im ate-3-phosphate synthase,EPSPS)基因、花椰菜花叶病毒(Cau liflowermosaic virus,CaMV)35S启动子、胭脂碱合酶3′端的转录终止子(nopalinesynthase,NOS).应用优化的常规PCR方法,对大豆及其加工产品进行了检测,检测灵敏度可达0.1%.通过PCR方法从转基因大豆中扩增出CP4-EPSPS基因,在大肠杆菌中表达,利用表达的外源蛋白质作为抗原免疫家兔,得到该蛋白质的多克隆抗体,并建立了一套基于蛋白质印迹杂交(western hybrid ization)的检测转基因大豆及其粗加工品的方法,其检测极限达到1%以下.此两方法互相配合,互相印证,有助于规范化转基因检测方法的建立. 姚涓 赵均良 陈金顶 穆虹 周峰 姜大刚 梅曼彤土壤磷素高效利用转基因大豆特异性PCR检测方法 被引量:2 2012年 华南农业大学根系生物学研究中心采用拟南芥的紫色酸性磷酸酶基因AtPAP15转化大豆品系粤春03-3(YC03-3),获得了酸性磷酸酶活性明显提高、可高效利用土壤磷素的转基因大豆新品系AP15-1。本研究以AP15-1为研究对象,应用TAIL-PCR技术,根据载体序列设计特异引物,获得了转化载体左侧插入的旁邻序列。设计事件特异性检测引物,进行PCR扩增,只能在AP15-1的样品中扩增出特异性条带,进一步用实时荧光定量PCR作分析,结果显示,该引物对重复性好,融解曲线显示只有一个特异峰值。本实验应用该引物对建立的检测方法,检测的灵敏度可以达到0.01%,实时荧光定量PCR检测的极限值可以达到9个基因组的拷贝数,能够满足对转基因大豆新品系AP15-1及其衍生品种检测的需要。 姚涓 潘志文 陈伟庭 周峰 穆虹 姜大刚 梅曼彤关键词:转基因大豆 TAIL-PCR 定量PCR 转基因番木瓜阳性质粒分子的构建和应用 被引量:1 2022年 转基因抗病番木瓜已经获得了全球多个国家的商业化应用和进口批准。为了解决转基因番木瓜检测工作中存在阳性对照不易获取的问题,本研究通过基因数据库(美国国家生物信息中心,NCBI),筛选番木瓜内标准基因Papain和Chymopapain基因以及已经报道的番木瓜转化体‘华农1号’、‘55-1’和‘GM YK’的特异性序列,构建了转基因番木瓜阳性质粒分子,并对其特异性、灵敏度以及适用性进行了验证分析,结果表明:该阳性质粒分子包含的5个外源片段的扩增产物条带清晰、特异性好,检测灵敏度高,可以稳定地检测出100个拷贝的质粒分子;同时对质粒分子的适用性进行了测试,结果显示,构建的质粒分子可以应用于番木瓜组织和加工品的转基因检测中。由此表明本研究构建的转基因番木瓜阳性质粒分子可以作为阳性对照应用于转基因番木瓜的特异性检测。 陈伟庭 高洁儿 潘志文 周峰 王声斌 姜大刚 姚涓关键词:转基因番木瓜 一种检测耐除草剂大豆中EPSPS基因的酶联免疫试剂盒及其使用方法 本发明公开了一种检测耐除草剂大豆中EPSPS基因的酶联免疫试剂盒及其使用方法。该试剂盒包括抗EPSPS多克隆抗体、包被有抗EPSPS单克隆抗体的酶标板、酶标二抗、转基因大豆标准品、非转基因大豆标准品、浓缩洗涤液、显色液、... 梅曼彤 许少鹏 赵均良 姚涓 穆虹 周峰 姜大刚文献传递 转基因番木瓜“华农一号”事件特异性定性PCR检测方法的建立 被引量:11 2009年 以我国自主研发的转基因抗环斑病毒番木瓜"华农一号"为研究对象,应用TAIL-PCR技术,用载体中靠近右边界的Nos启动子序列设计特异引物,扩增插入的旁邻序列;根据测序结果,设计了产物长度分别为753和298 bp但均跨越转化载体和番木瓜基因组序列的2套特异引物,对"华农一号"进行检测,证明其可特异地把"华农一号"从转基因番木瓜品系中检测出来;2对引物的检测灵敏度都可以达到0.05%的标准,高于欧盟0.9%的检测要求;利用2对特异引物对"华农一号"的果肉、果皮、种子进行检测,可得到特异性良好的扩增. 姜大刚 周峰 姚涓 穆虹 梅曼彤关键词:转基因番木瓜 TAIL-PCR OsKRP6,水稻KRP家族的一个特殊成员的功能分析 赵均良 罗彩英 姚涓 周峰 易继财 梅曼彤关键词:细胞周期调控 水稻 功能分析 一种鉴定水稻品种的CAPS分子标记方法及应用 本发明公开了一种鉴定水稻籼稻和粳稻品种的CAPS分子标记方法及应用。所述方法包括如下步骤:S1.提取水稻样本基因组DNA;S2.以权利要求3所述引物对步骤S1基因组DNA进行PCR扩增;S3.将步骤S2的PCR产物经<I... 张群宇 刘耀光 周峰 王曼 薛德星 裴蕾 江燕翔 赵秀彩 祝钦泷转基因番木瓜基因组DNA的快速制备和PCR检测方法 2021年 转基因番木瓜检测中,模板DNA的制备是关键一步。为了提高检测效率,建立快速制备番木瓜样品基因组DNA和PCR检测方法十分重要。建立了番木瓜基因组DNA的快速制备方法,包括样品准备、制备缓冲液匀浆和稀释上清。在完成不同番木瓜样品的基因组DNA快速制备后,对获得的DNA进行PCR检测验证。普通PCR验证结果显示,本方法制备的叶片和果肉基因组DNA溶液稀释5倍时,PCR扩增条带清晰,更高稀释倍数时,叶片基因组DNA扩增条带强于果肉基因组DNA;实时荧光PCR验证结果显示,叶片基因组DNA的PCR扩增效率位于合理区间。灵敏度测试结果表明,含量低至0.1%的叶片和果肉样品,内标准基因和外源基因特异性片段普通PCR和实时荧光PCR均能得到预期扩增,且重复性较好。本研究建立的番木瓜基因组DNA快速制备与PCR方法效果良好,体系稳定。 潘志文 陈伟庭 高洁儿 周峰 姚涓 王声斌 姜大刚关键词:转基因番木瓜 DNA制备 PCR