吴玉石
- 作品数:7 被引量:15H指数:2
- 供职机构:华中农业大学更多>>
- 发文基金:江苏检验检疫局科研项目武汉市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 消减抗生素抗性的暹罗芽胞杆菌和菌剂及其应用
- 本发明属于生物环保技术领域,尤其涉及一种消减抗生素抗性的暹罗芽胞杆菌和菌剂及其应用。所述消减抗生素抗性的暹罗芽胞杆菌的保藏编号为CCTCC NO:M 20232193。本发明提供的暹罗芽胞杆菌可以有效消减土壤抗生素抗性,...
- 蔡珉敏赵峥峥高冰奇杨崇瑞吴玉石孙晨鞠岩陈浏张吉斌郑龙玉黄凤喻子牛
- 牛白血病病毒env(gp51)基因的克隆和原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立被引量:6
- 2009年
- 从持续感染牛白血病病毒(BLV)的羊胎肾细胞(FLK-BLV)中提取前病毒DNA,用PCR方法扩增编码牛白血病病毒gp51蛋白的env(gp51)基因,序列测定结果表明扩增片段全长828 bp。将扩增基因插入原核表达载体pET-32a构建pET-32a-gp51重组质粒,转化BL21(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明重组融合蛋白大小约为43 000,Western-blot结果表明重组表达蛋白具有免疫反应性。以纯化的重组蛋白gp51作为抗原,建立检测BLV抗体的间接ELISA诊断方法。结果表明,抗原gp51的最佳包被浓度为2.19μg.mL-1,血清的最佳稀释倍数为1∶80,阳性判定标准确定为样品OD450 nm大于0.451。用该方法对12份参考血清进行检测,准确率为91.67%。
- 周毅吴玉石段宏安张睿周祖涛毕丁仁石德时
- 关键词:牛白血病病毒原核表达间接ELISA
- 地方流行性牛白血病间接gp51-ELISA抗体检测试剂盒的研制被引量:1
- 2009年
- 利用重组牛白血病痛毒gp51蛋白作为包被抗原研制了gp51-ELISA诊断试剂盒。试剂盒主要成分包括抗原gp51包被96孔板、HRP标记的兔抗牛IgG和牛白血病阴性、阳性标准血清。对试剂盒进行了特异性、灵敏度、重复性及保存期试验。结果表明,试剂盒特异性好,灵敏度是AGIDT的4-8倍,批间和批内的变异系数分别小于10%和15%,于-20℃保存至少能保持6个月检测结果稳定。与法国Synbiotics公司同类试剂盒进行比对试验,诊断敏感性、特异性和符合率分别为75%、96.1%和94.6%。对采集于山东济南的164份奶牛血清和进口澳大利亚奶牛的398份血清进行检测,抗体阳性率分别6.10%和4.77%。
- 吴玉石周毅段宏安张睿徐晔毕丁仁石德时
- 关键词:间接ELISA诊断试剂盒
- 锦鲤疱疹病毒的PCR鉴定被引量:8
- 2008年
- 根据锦鲤疱疹病毒(koi herpesvirus,KHV)的基因序列合成了2对引物,对送检的发病锦鲤样品提取DNA进行PCR检测,分别扩增出KHV的胸腺嘧啶脱氧核苷激酶基因(thymidine kinase,TK)409 bp和AF411803基因序列484 bp的条带,对484 bp的PCR扩增产物经限制性内切酶TaqⅠ和AluⅠ酶切,分别得到200 bp/284 bp和185 bp/299 bp的片段,484 bp的PCR扩增产物的测序结果与GenBank上已发表的KHV序列一致。结果显示发病锦鲤为KHV阳性。
- 段宏安张睿徐晔周毅姚燕林王海涛李金华刘小琴吴玉石
- 关键词:PCR锦鲤疱疹病毒
- 禽流感疫苗免疫和野毒感染的鉴别诊断策略被引量:1
- 2007年
- 近年来,用灭活疫苗免疫接种已成为我国控制禽流感的一种主要策略,但免疫禽类不能与自然野毒感染的禽类从血清学水平上进行鉴别,并常导致贸易障碍。为了克服禽流感灭活苗的这种局限性,提出对疫苗免疫和野毒感染禽类鉴别诊断。一是免疫群内安插未免疫过的“哨兵禽”,二是采用亚单位疫苗免疫定向检测血凝素蛋白,三是接种疫苗的血凝素与野毒同源而神经氨酸酶为异源,四是检测非结构蛋白(NS1)的血清学反应。文章对上述四种鉴别诊断策略的优缺点进行了评价,为禽流感的控制策略提供一些新的思路。
- 吴玉石肖运才胡思顺李自力石德时毕丁仁
- 关键词:禽流感非结构蛋白血凝素神经氨酸酶
- 牛白血病重组gp51-ELISA试剂盒的研制
- 段宏安周毅徐晔张睿吴玉石王益军石德时李金华
- 本研究利用病毒增殖和PCR扩增,获得了流行性牛白血病病毒gp51基因,构件了克隆载体和表达载体,经诱导表达获得了gp51原核表达蛋白,对表达的gp51蛋白的免疫学反应性进行了鉴定,并建立了牛血清中流行性牛白血病病毒抗体的...
- 关键词:
- 关键词:ELISA试剂盒
- 牛白血病间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用
- 地方流行性牛白血病(Enzootic Bovine leukosis,EBL)是由牛白血病病毒(Bovine leukemia virus,BLV)引起的以淋巴细胞持续性增生为特征的传染性肿瘤性疾病,主要发生于4~8岁的...
- 吴玉石
- 关键词:ELISA试剂盒抗体检测免疫学活性
- 文献传递