包谨芳
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 供职机构：上海市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖尿病肾病大鼠骨骼肌自噬-溶酶体途径水平变化及低蛋白联合α-酮酸饮食对其作用被引量：6
- 2013年
- 目的 观察糖尿病肾病大鼠骨骼肌中自噬水平的变化及低蛋白联合α-酮酸饮食对其的干预作用,探讨低蛋白联合α-酮酸改善糖尿病肾病大鼠骨骼肌萎缩的机制.方法 24周龄Goto-Kakizaki大鼠分为3组：正常蛋白组（22％酪蛋白饮食,简称NPD组）、低蛋白组（6％酪蛋白饮食,简称LPD组）及低蛋白联合α-酮酸组（6％酪蛋白饮食,简称Keto组）,每组15只;15只Wistar大鼠给予正常蛋白饮食,作为对照组（简称CTL组）.48周后检测各组大鼠比目鱼肌中自噬-溶酶体标志物微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）、Bcl2/腺病毒E1B结合蛋白3（Bnip3）、组织蛋白酶L（Cathepsin L）的mRNA及蛋白含量,电镜进一步验证自噬-溶酶体途径的变化.结果 与CTL组大鼠相比,NPD组LC3B、Bnip3及Cathepsin L的mRNA均较高（均P＜0.05）.且NPD组LC3B-Ⅰ、LC3B-Ⅱ、Bnip3及Cathepsin L的蛋白均较CTL组高（0.82±0.33比0.25±0.07,0.76±0.38比0.20±0.12,1.25±0.30比0.56±0.19,1.29 ±0.40比0.69±0.20）.与NPD相比,LPD组LC3B、Bnip3及Cathepsin L mRNA含量稍低,且LC3B-Ⅰ、LC3B-Ⅱ、Bnip3及Cathepsin L的蛋白含量稍低,但差异均无统计学意义（均P＞0.05）.与NPD组及LPD组相比,Keto组上述自噬标志物的mRNA明显低,且其蛋白含量明显低.电镜示NPD组及LPD存在多量的自噬小体或自噬性溶酶体,而CTL组及Keto组检查阴性.结论 糖尿病肾病大鼠骨骼肌存在着自噬-溶酶体途径活化的现象.低蛋白联合α-酮酸饮食可阻断骨骼肌中自噬-溶酶体途径的活化,进而缓解骨骼肌萎缩.
- 黄娟袁伟杰王嘉琳谷立杰殷俊董婷包谨芳唐知还
- 关键词：糖尿病肾病
- Notchl信号在乙型肝炎病毒X基因介导的肾小管上皮细胞免疫活性异常中的作用被引量：4
- 2013年
- 目的探讨乙型肝炎病毒x基因（HBx）转染人近端肾小管上皮细胞系HK一2细胞后对其表达Notchl信号的影响，并观察Notchl信号在HBx介导的肾小管上皮细胞免疫活性中的作用。方法用分子克隆的方法构建pcDNA3．1／myc．HBx质粒及pcDNA3．1／myc—Notchl质粒，转染HK-2细胞，并应用短发卡RNA（shRNA）沉默Notchl基因表达。将细胞分为7组：①正常培养组；②转染HBx空载质粒组；③转染HBx质粒组；④转染HBx质粒＋Notchl空载质粒组；⑤转染HBx质粒＋Notchl质粒组；⑥转染HBx质粒＋NotchlshRNA空载质粒组；⑦转染HBx质粒＋NotchlshRNA沉默质粒组。实时定量PCR和蛋白印迹法检测细胞中Notchl受体的变化，流式细胞术检测细胞表面人主要组织相容性复合物（MHC）一II、CD40表达的变化，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清中白细胞介素（IL）-4、干扰素（IFN）一1水平。结果HK-2细胞经转染HBx基因后，可高表达HBx，NotchlshRNA在HK-2细胞中的转染效率也高达70％，基因沉默有效；转染HBx基因组细胞Notchl水平高于正常培养组及转染HBx空载质粒组相比，且Notchl过表达组细胞表面MHC。II、CD40表达均明显高于Notchl空载质粒组（9．69％±0．52％比4．90％±0．32％，21．56％±0．71％比15．74％-4-0．20％，均P〈0．05），其上清液中IL_4水平亦高于Notchl空载质粒组（50．2±0．6比28．1±1．2，P〈0．05），而IFN一1水平较低（11．9-4-1．7比18．8±0．8，P〈0．05）。Notchl基因沉默后上述指标结果呈相反变化。结论HBx基因转染HK-2细胞后可引起Notchl表达上调；Notchl又可促进细胞表面免疫分子的表达，并调控细胞因子分泌，最终导致细胞损伤及免疫微环境的紊乱。
- 王轩周益袁伟杰尚明花包谨芳朱楠
- 关键词：上皮细胞免疫分子
