刘银星
- 作品数：16 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划天津市重大科技攻关项目天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2突变体在大肠杆菌中的高效分泌表达被引量：3
- 2004年
- 构建抗CD2 0嵌合抗体片段F(ab′) 2 突变体 ,研究其在大肠杆菌中的高效表达及其表达产物的生物学活性。采用PCR法构建抗CD2 0嵌合抗体片段F(ab′) 2 突变体 ,并用双脱氧终止法测定DNA序列 ;采用 19L发酵罐高密度发酵抗CD2 0嵌合抗体片段F(ab′) 2 突变体 ,采用亲和色谱和分子筛色谱法纯化表达产物 ,并用SDS PAGE和薄层激光扫描鉴定纯化产物 ;采用活细胞间接免疫荧光法测定纯化产物与靶细胞的结合活性 ;MTT法测定纯化产物对Raji细胞的生长抑制作用 ,并研究其作用机理。DNA序列测定结果表明 ,抗CD2 0嵌合抗体片段F(ab′) 2 突变体已成功构建 ,表达可溶性产物的产量达 36 0mg L ,具有与Raji细胞 (CD2 0 + )结合的活性 ,并抑制Raji细胞的生长 ,其作用机理为诱导Raji细胞凋亡。
- 熊冬生郑梦杰刘银星许元富王金红杨纯正
- 关键词：CD20突变体大肠杆菌
- 抗CD3基因工程嵌合抗体IgG在哺乳动物细胞中的表达和活性测定被引量：3
- 2003年
- 利用基因工程方法将鼠源性抗CD3抗体HIT3a的可变区和人源抗体 (IgG)的完整的恒定区连接起来 ,构建全抗型抗CD3嵌合抗体 ,该型抗体具有较低的免疫源性可作为免疫抑制剂应用于器官移植 ,减少受体产生免疫排斥 ,提高移植器官的存活率。利用PCR方法从抗CD3ScFv重组噬菌体表达载体pCANTAB 5E上扩增抗CD3抗体的轻链和重链可变区 ,将轻链和重链可变区组装到含有人抗体 (IgG)恒定区的表达载体中 ,构建抗CD3嵌合抗体IgG的轻链和重链表达载体PKN10 0和PG1D10 5 ,并用脂质体法共转染CHO细胞。结果证明 ,抗CD3嵌合抗体的VL 和VH 与HIT3a抗体的VL 和VH 完全相符 ,ELISA和Westernblot检测结果证实转染细胞的培养上清中含有抗CD3嵌合抗体IgG的表达 ,表达产物能与Jurkat细胞结合 ,并能竞争性抑制HIT3a抗体和Jurkat细胞结合活性 ,3H TdR掺入实验表明 ,抗CD3嵌合抗体与亲代抗体HIT3a一样 ,具有促进外周血单核细胞增殖的作用。我室构建的全抗型抗CD3嵌合抗体分子表达载体可在CHO细胞中稳定表达 ,表达产物有较好生物活性 。
- 邵晓枫徐晨许元富熊冬生刘银星杨纯正彭晖杨铭朱桢平
- 关键词：基因工程抗体嵌合抗体抗CD3抗体
- 嵌合抗CD20抗体Fab′片段诱导Raji细胞凋亡过程中活性氧自由基的变化被引量：2
- 2003年
- 目的 研究嵌合抗CD2 0抗体Fab′片段对B淋巴细胞株Raji细胞活性氧自由基 (ROS)的影响。 方法 利用MTT法测定Fab′片段抑制细胞生长 ,形态学方法和DNA琼脂糖凝胶电泳法观察Fab′片段对细胞凋亡的影响 ,用DCFH DA和双氢罗丹明 1 2 3(DHR )标记细胞内活性氧(ROS)变化 ,并用流式细胞仪检测。结果 MTT法测定抗CD2 0抗体Fab′片段对Raji细胞的生长具有抑制作用 ,其抑制作用呈明显的剂量依赖性 ,电镜观察 ,可见“凋亡小体”出现 ,DNA电泳可见典型的“梯形”条带 ,抗CD2 0抗体Fab′片段能增加Raji细胞内ROS水平 ,且随浓度增加而增加。 结论 ROS水平升高在抗CD2
- 范冬梅刘银星杨铭熊冬生许元富彭晖邵晓枫杨纯正
- 关键词：抗CD20抗体B淋巴细胞凋亡ROS
- 抗CD<Sub>20</Sub>嵌合抗体突变体基因及其应用
- 本发明公开了抗CD<Sub>20</Sub>单克隆抗体HI<Sub>47</Sub>突变的轻链可变区基因，由所述基因编码的多肽，含有所述基因和多肽以及含有所述基因和多肽的融合蛋白的在制备用于肿瘤的诊断和治疗中的应用。本发...
- 杨纯正熊冬生刘银星许元富范冬梅彭晖邵晓枫许元生赖增祖朱祯平杨铭齐静王金宏纪庆王彩云
- 文献传递
- 恶性血液肿瘤的单克隆抗体靶向治疗被引量：4
- 2003年
- 造血细胞表达谱系专一性抗原是单克隆抗体靶向治疗恶性血液肿瘤的理想靶点。基因工程技术的发展为降低单克隆抗体的免疫源性,加强单克隆抗体对肿瘤细胞的杀伤作用提供了有力的手段。针对CD20、CD52、CD33的工程抗体Rituximab、Campath—1H和Mylotary已应用于临床治疗,在低度滤泡性非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病和急性髓系白血病的治疗中取得了良好的效果。
- 刘银星杨纯正
- 关键词：恶性血液肿瘤单克隆抗体靶向治疗
- 抗CD<Sub>20</Sub>嵌合抗体突变体基因及其应用
- 本发明公开了抗CD<Sub>20</Sub>单克隆抗体HI<Sub>47</Sub>突变的轻链可变区基因，由所述基因编码的多肽，含有所述基因和多肽以及含有所述基因和多肽的融合蛋白的在制备用于肿瘤的诊断和治疗中的应用。本发...
- 杨纯正熊冬生刘银星许元富范冬梅彭晖邵晓枫许元生赖增祖朱祯平杨铭齐静王金宏纪庆王彩云
- 文献传递
- CD20分子与靶向治疗被引量：5
- 2003年
- CD2 0是B淋巴细胞上的跨膜蛋白质 ,分子量范围为 33～ 37kD ,以非糖基化的磷酸化蛋白质形式存在。CD2 0是调节B淋巴细胞生命与分化信号转导的重要分子 ,其在B细胞中特有的表达方式、生物学作用和存在形式决定了其成为治疗B淋巴细胞瘤的主要靶位点。研究CD2 0的生理作用有利于阐明抗CD2
- 刘银星杨纯正
- 关键词：B淋巴细胞瘤靶向治疗
- 单价抗CD20抗体诱导人B细胞淋巴瘤Raji细胞的凋亡被引量：1
- 2003年
- 背景与目的:抗CD20抗体和片段已应用于非霍奇金淋巴瘤的临床治疗,但仍需要开发新的抗CD20抗体和片段(未修饰的或放射性标记的),以治疗对美罗华(利妥昔单抗)无反应的患者。鼠源性抗CD20抗体HI47的嵌合抗体片段Fab和F(ab)'2已被构建。本研究目的是观察HI47(鼠抗-CD20抗体)和其嵌合抗CD20抗体片段抑制肿瘤细胞生长和诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法:用免疫荧光法测定抗CD20抗体与CD20+人B细胞淋巴瘤Raji细胞的结合能力;MTT法测定抗CD20抗体片段对Raji细胞生长的影响;用膜联蛋白Ⅴ染色和DNA琼脂糖凝胶电泳检测和验证抗CD20抗体片段诱导Raji细胞凋亡。结果:HI47和其嵌合的抗CD20抗体片段均可与CD20+Raji细胞结合,结合率可达90%以上;HI47不能与美罗华竞争结合Raji细胞;HI47和其嵌合的抗CD20抗体片段浓度为100μg/ml对Raji细胞的抑制率分别为:(57.0±1.5)%、(65.2±2.5)%、(77.2±3.2)%;单价的抗CD20抗体片段Fab(20μg/ml)能够诱导Raji细胞的凋亡,早期凋亡率为17%。结论:HI47的嵌合抗体片段对Raji细胞有抑制作用,能诱导Raji细胞的凋亡。
- 刘银星范冬梅熊冬生许元富邵晓枫许元生彭晖杨铭秦岚朱祯平杨纯正
- 关键词：B细胞淋巴瘤RAJI细胞细胞凋亡
- 抗CD<Sub>20</Sub>单克隆抗体的重链和轻链可变区基因及其应用
- 本发明公开了抗CD<Sub>20</Sub>单克隆抗体HI<Sub>47</Sub>重链和轻链可变区基因，由所述基因编码的多肽，含有所述基因的载体及所述的基因和多肽在制备用于B淋巴细胞瘤的治疗和诊断的药物中的应用。
- 杨纯正朱祯平熊冬生许元富彭晖赖增祖邵晓枫范冬梅徐晨杨铭刘银星郑梦杰
- 文献传递
- 嵌合抗CD20抗体突变体的表达及其作用机理的研究
- 近年来，抗体疗法在肿瘤临床受到越来越多的关注，尤其以CD20为靶点治疗非霍杰金氏淋巴瘤的单克隆抗体/(包括放射性标记的抗体/)在临床已经取得了令人瞩目的成功。目前，美国FDA已正式批准上市的抗CD20抗体有Rituxim...
- 刘银星
- 关键词：CD20凋亡
- 文献传递
