刘新珏
- 作品数：14 被引量：43H指数：5
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- 基因芯片检测拉米夫定治疗慢性乙型肝炎后引起的HBV YMDD变异被引量：6
- 2003年
- 目的 建立乙型肝炎病毒变异基因诊断芯片对拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中出现的肝炎病毒P基因区YMDD变异进行快速准确的检测诊断方法。方法 设计特异性寡核苷酸探针数组 ,特别处理芯片载体 ,用点样法制备乙型肝炎病毒变异基因诊断芯片。选择 30例服用拉米夫定后 ,HBVDNA转阴 ( <5 0 0copies/ml) ,6 8周后又反跳≥ 5 0 0copies/ml的病人进行基因芯片杂交检测分析。同时用PCR直接测序法对病人血清标本进行双盲HBVDNA聚合酶活性区域测序对照。结果 30例服药后HBVDNA反跳病人中 ,基因芯片测得HBVYMDD变异 2 1例 ,其中YVDD变异11例 ,YIDD变异 10例。HBVDNAPCR直接序列测定结果为有核苷酸A741变为G ,使氨基酸由蛋氨酸 5 5 2变为缬氨酸 (氨基酸基序由YMDD变为YVDD) ,6例核苷酸A669变为C ,氨基酸由亮氨酸5 2 8变为蛋氨酸 ;核苷酸G743 变为T ,使氨基酸由蛋氨酸 5 5 2变为异亮氨酸。 (氨基酸基序由YMDD变为YIDD)。其中有 3例伴有核苷酸T781变为C ,使氨基酸由亮氨酸 5 6 5变为脯氨酸。标本阳性变异序号与基因芯片检测结果完全一致。结论 乙型肝炎病毒变异基因诊断芯片可以同时检测YVDD、YIDD变异 ,与PCR直接测序法比较 ,准确率达 10 0 %。
- 赵伟刘全俊刘伟张林张汉荣刘新珏周镇先
- 关键词：拉米夫定基因芯片YMDD变异
- 基因芯片检测拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中HBV变异技术的建立和应用被引量：4
- 2003年
- 目的建立乙型肝炎病毒变异基因诊断芯片对拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中出现的肝炎病毒P基因区YMDD变异进行快速准确的检测诊断。方法设计特异性寡核苷酸探针阵列,特殊处理芯片载体。用点样法制备乙型肝炎病毒变异基因诊断芯片。在本院住院治疗患者中选择30例服用拉米夫定后,HBV DNA转阴(<500 copies/ml)168周后又反跳≥5 000 copies/ml的患者进行基因芯片杂交检测分析。同时用PCR直接测序法对上述30例患者血清标本进行双盲HBVDNA聚合酶活性区域测序对照。结果 30例服药后HBVDNA反跳患者中基因芯片测得HBV YMDD变异21例,其中YVDD变异11例。YIDD变异10例。HBVDNA PCR直接序列测定结果,有核苷酸A741变为G,使氨基酸由蛋氨酸552变为缬氨酸(氨基酸基序由YMDD变为YVDD)11例,并有6例核苷酸A669变为C,使氨基酸由亮氨酸528变为蛋氨酸。核苷酸G743变为T,使氨基酸由蛋氨酸552变为异亮氨酸(氨基酸基序由YMDD变为YIDD)10例。其中有3例伴有核苷酸T781变为C,使氨基酸由亮氨酸565变为脯氨酸。标本阳性变异序号与基因芯片检测结果完全一致。结论 乙型肝炎病毒变异基因诊断芯片可以同时检测YVDD,YIDD变异,同PCR直接测序法比较,准确率达100％,无假阳性。
- 赵伟刘伟刘全俊张林张汉荣刘新珏周镇先
- 关键词：基因芯片拉米夫定慢性乙型肝炎HBV变异肝炎病毒
- 病毒性肝炎基因芯片检测肝炎肝硬化患者肝组织中HBV DNA的研究被引量：1
- 2001年
- 目的:研究病毒性肝炎基因芯片的制备及其检测HBV DNA的准确性.方法:将PCR扩增的HBV DNA探针用点样仪点于玻片介质上,并经过点样处理后制备成基因芯片;收集肝炎后肝硬化肝组织标本99份,分别用基因芯片、原位分子杂交法、免疫组织化学法检测HBV DNA和HBcAg,比较各种方法的优缺点.结果: 53例HBcAg、HBV DNA阳性组织中基因芯片检测阳性40例; HBcAg阳性22例中基因芯片检测阳性6例; 32例HBcAg HBV DNA阴性组织中基因芯片检测均阴性.结论:肝炎基因诊断芯片可以检测肝组织中HBV DNA,准确率可达75%,假阳性率低.
- 赵伟刘伟刘全俊张林周镇先刘新珏
- 关键词：基因芯片肝组织乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸
- 病毒性肝炎基因芯片检测肝炎肝硬化患者肝组织中HBVDNA的实验和临床研究
- 基因芯片又称微型DNA阵列里按特定的排列方式固定基因探针/基因片段在玻片上,通过电子计算机高效大规模在取相关生物信息,本研究将从基因库中筛选出的乙型肝炎高度保守序列片段,通过分子克隆操作,用芯片点样仪点到特制的玻片上,制...
- 赵伟刘伟张林周镇先刘新珏刘全俊
- 关键词：基因芯片病毒性肝炎HBVDNA
- 文献传递
- DNA芯片对乙型肝炎肝硬化患者肝组织中病毒的检测被引量：2
- 2002年
- 我们从基因库中筛选出乙型肝炎病毒(HBV)高度保守序列片段,通过分子克隆操作,用芯片点样仪点到特制的玻片上,制成乙型肝炎基因诊断芯片,检测了99例乙型肝炎肝硬化患者肝组织标本,同时用免疫组织化学法、原位分子杂交法检测乙型肝炎核心抗原(HBcAg)和HBV DNA.
- 赵伟刘伟刘全俊张林周镇先刘新珏
- 关键词：DNA芯片乙型肝炎肝硬化肝组织病毒检测
- DNA芯片检测肝组织及血清中乙型肝炎病毒DNA的临床研究被引量：4
- 2003年
- 目的 研究DNA芯片检测乙型肝炎和肝硬化患者肝组织及血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的应用价值。方法 用点样仪将聚合酶链反应 (PCR)扩增的HBVDNA探针制成基因芯片。对 15例慢性乙型肝炎病人的血清和肝活检组织 ,99例乙型肝炎后肝硬化肝组织 ,分别用基因芯片、原位分子杂交、免疫组织化学和雅培试剂检测HBVDNA、乙型肝炎核心抗原 (HBcAg)、乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)和乙型肝炎e抗原 (HBeAg)。结果 用基因芯片对 15份HBsAg、HBeAg阳性的乙型肝炎患者血清进行检测 ,HBVDNA均阳性 ,阳性率符合率为 10 0 % ;15份肝活检组织标本 ,免疫组化法检测HBcAg阳性 15例 ,原位分子杂交法和基因芯片检测HBVDNA均阳性 14例 ,阳性率 93%。 99份肝炎后肝硬化患者肝组织标本 ,HBcAg阳性 6 7份 ,HBVDNA阳性 5 3份 ,基因芯片检测HBVDNA阳性 46份 ,阳性率分别为 6 9%、88%。 32例HBcAg、HBVDNA阴性的肝组织中 ,基因芯片检测HBVDNA均为阴性。结论 肝炎基因诊断芯片可检测肝组织及血清中HBVDNA ,诊断准确率高 ,假阳性率低。
- 赵伟万建民刘伟张林刘全俊周镇先刘新珏
- 关键词：DNA芯片肝组织血清乙肝病毒DNA
- 基因芯片技术检测慢性乙型肝炎肝硬化患者肝组织及血清HBVDNA研究
- 2004年
- 目的研究DNA芯片技术在检测乙型肝炎和肝硬化患者肝组织及血清中HBVDNA的应用,并与雅培试剂、免疫组织化学和原位分子杂交法比较。方法用点样仪将PCR扩增的HBVDNA探针制成基因芯片,对15例慢性乙型肝炎(下称慢乙肝)患者的血清及肝活检组织、99例乙型肝炎后肝硬化肝组织,分别用基因芯片、原位分子杂交法、免疫组织化学法、雅培试剂检测HBVDNA、HBcAg、HBsAg、HBeAg。结果15例慢乙肝HBsAg、HBeAg阳性患者的乙型肝炎血清基因芯片检测均阳性。15例肝组织标本中,免疫组化法HBcAg阳性15例,HBVDNA原位分子杂交阳性14例,基因芯片检测阳性14例。99例乙型肝炎后肝硬化肝组织标本中,HBcAg阳性67例、HBVDNA阳性53例,基因芯片检测阳性46例;32例HBcAg、HBVDNA阴性组织基因芯片检测均阴性。结论肝炎基因诊断芯片可以检测肝组织及血清HBVDNA,其诊断准确率高,假阳性率低。
- 赵伟刘伟张林刘全俊周镇先刘新珏
- 关键词：肝组织肝硬化患者血清HBVDNA芯片技术
- 肝炎基因诊断芯片对丙型肝炎病毒基因分型检测的初步研究被引量：7
- 2002年
- 目的 研究丙型肝炎病毒 (HCV)基因分型诊断芯片的制备和其对丙型肝炎患者血清HCVRNA基因分型诊断的准确性。方法 根据丙型肝炎病毒 5′端非编码区末端 (5UTR)和C区设计引物和特异性探针 ,将设计的 2 0条特异性寡核苷酸探针用核苷酸合成仪合成后 ,配制成浓度为 5 0μmol/ml的点样液 ,用点样仪点到特殊处理的玻片介质上 ,制成丙型肝炎病毒基因分型诊断芯片。收集HCVRNA阳性的丙型肝炎患者血清 6 0份作为实验组 ,健康人血清 6 0份作为对照组。用荧光定量PCR仪对两组血清进行HCVRNA定量检测 ,实验组血清HCVRNA含量均大于 5 0 0拷贝 /ml,对照组血清HCVRNA含量均小于 5 0 0拷贝 /ml。两组血清进行HCVRNA分离纯化、逆转录反应、巢式PCR扩增后 ,分别用基因芯片、HCVRNA核酸序列测定法 (美国Li Cor核酸序列测定仪 )进行双盲丙型肝炎基因分型检测。结果 实验组血清基因诊断芯片检测均为阳性 ;基因分型 :1b型 4 6例 ,3a型 3例 ,3b型 3例 ,2a型 2例 ,2b型 2例 ,混合型 1b +2a 2例 ,1b +3b型 2例 ;核酸序列测定分型 1b型 5 0例 ,3a型 3例 ,3b型 3例 ,2a型 2例 ,2b型 2例 ;基因诊断芯片检测和核酸序列测定检测的基因分型结果符合率为 93.3%。对照组血清基因芯片检测均阴性。
- 赵伟刘伟刘全俊张林周镇先刘新珏张汉荣
- 关键词：C型肝炎样病毒属基因型基因芯片丙型肝炎
- DNA芯片技术诊断乙、丙型病毒性肝炎的研究被引量：5
- 2002年
- 目的 :研究病毒性肝炎基因芯片的制备 ,用肝炎基因诊断芯片、病毒抗原抗体及DNA/RNA(PCR)检测方法对照检测乙型和丙型肝炎血清 ,比较两种方法的优缺点。方法 :血清来自乙型肝炎患者 40例、丙型肝炎患者 2 0例和健康人 40例。乙型肝炎确诊用雅培设备试剂 ,荧光微离子法 ;抗HCV检测丙型肝炎及PCR法检测HCVRNA。确诊后同健康人血清一起进行双盲混合编组 ,用肝炎基因诊断芯片检测。结果 :40例乙型肝炎病毒标志阳性血清 ,基因诊断芯片检测阳性 3 0例、阴性 10例 ;12例HCVRNA阳性血清 ,基因诊断芯片检测阳性 8例 ;抗HCV阳性、HCVRNA阴性血清 8例 ,基因诊断芯片检测阳性 2例、阴性 6例 ;40例健康人血清 ,乙型和丙型肝炎基因诊断芯片检测均为阴性。结论 :肝炎基因诊断芯片可以同时检测乙型和丙型肝炎 ,诊断乙型肝炎的准确率可达 80 % ,假阳性率低 ;诊断丙型肝炎的阳性率低 。
- 赵伟刘全俊刘伟张林周镇先刘新珏
- 关键词：基因芯片病毒性肝炎
- 基因芯片检测肝炎肝硬化患者组织中HBV DNA的实验和临床研究
- 肝炎基因诊断芯片是根据肝炎病毒的特征基因片段设计探针序列,将其用芯片点样仪点到特制的玻片上,从待测血液、组织标本中抽取微量肝炎病原体HBVDNA,PCR扩增后,荧光标记,与芯片探针杂交,用特有的荧光波长扫描仪扫描芯片,通...
- 刘伟赵伟刘全俊张林周镇先刘新珏
- 关键词：基因诊断基因芯片
- 文献传递
