刘双龙
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
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- 发文基金：山东省农业科学院青年科研基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 荷斯坦牛中性粒细胞β-防御素基因克隆及其原核表达质粒的构建被引量：3
- 2007年
- 根据已发表的牛β-防御素基因序列设计引物,从具有临床乳腺炎症状的荷斯坦奶牛血液中性粒细胞中提取RNA,克隆牛β-防御素基因并插入到原核表达载体pQE-30中,构建了原核表达质粒pQE-30/β-defesion。测序结果表明,克隆的目的基因长189bp,编码1个氨基酸,与已报道的牛β-防御素氨基酸序列同源性达95.6%。本研究为牛乳腺防御素的表达及功能、活性的研究奠定了一定的基础。
- 刘双龙王长法杨宏军杨少华阿合买提.买买提高运东仲跻峰
- 关键词：Β-防御素荷斯坦牛
- 荷斯坦牛中性粒细胞β-防御素基因克隆及其原核表达质粒的构建
- 为研究牛乳腺防御素功能活性，研发牛防御素生物制剂来防治奶牛乳腺炎。根据已发表的牛β-防御素基因序列设计一对引物，从具有临床乳房炎症状的荷斯坦奶牛血液中性粒细胞中用试剂盒提取总RNA。经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出...
- 刘双龙
- 关键词：中性粒细胞基因克隆原核表达质粒奶牛乳腺炎
- 文献传递
- 荷斯坦奶牛中性粒细胞β-防御素cDNA的克隆与序列分析被引量：2
- 2007年
- 为研发牛β-防御素生物制剂,防治奶牛乳腺炎。根据已发表的牛β-防御素基因序列设计一对引物。收集患乳腺炎奶牛乳静脉血液中性粒细胞,用试剂盒提取总RNA。经RT-PCR扩增牛β-防御素cDNA片段,回收纯化PCR产物,连接pMD18-T载体,转化感受态细胞JM109。在含X-Gal、Amp及IPTG的LB平板上筛选阳性克隆,经菌落PCR及双酶切鉴定后,对目的片段进行测序。结果表明RT-PCR扩增出的cDNA片段碱基数为189bp,含有一个完整的ORF,能编码63个氨基酸的多肽,多肽中含6个保守半胱氨酸残基。用Blast程序进行检索比较,表明扩增序列与GenBank中发表的BNBD-7编码区序列96.3%相同。结果成功克隆出奶牛β-防御素家族的成员BNBD-7基因,为重组牛β-防御素的开发奠定了基础。
- 刘双龙王长法杨宏军杨少华阿合买提.买买提高运东仲跻峰
- 关键词：Β-防御素克隆
