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丁满生

作品数：9 被引量：16H指数：2
供职机构：华东理工大学更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
相关领域：化学工程生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 1篇学位论文
  • 1篇会议论文
  • 1篇专利

领域

  • 4篇化学工程
  • 3篇生物学
  • 2篇医药卫生
  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 6篇杆菌
  • 6篇大肠杆菌
  • 4篇重组大肠杆菌
  • 3篇载脂蛋白
  • 3篇脂蛋白
  • 3篇复性
  • 3篇包涵体
  • 2篇载脂蛋白AI
  • 2篇基因
  • 2篇纯化
  • 1篇代谢流
  • 1篇代谢通量
  • 1篇代谢通量分析
  • 1篇氮源
  • 1篇蛋白
  • 1篇性质分析
  • 1篇载脂蛋白A-...
  • 1篇质粒
  • 1篇质粒拷贝数
  • 1篇碳氮源

机构

  • 9篇华东理工大学
  • 2篇上海凯曼生物...

作者

  • 9篇丁满生
  • 8篇储炬
  • 7篇马文峰
  • 7篇郭美锦
  • 7篇庄英萍
  • 7篇张嗣良
  • 1篇汪利俊
  • 1篇龚邦强

传媒

  • 3篇微生物学通报
  • 1篇中国生物制品...
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇华东理工大学...

年份

  • 1篇2006
  • 4篇2005
  • 4篇2004
共 9 条 记 录，以下是 1-9
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排序方式：
重组人载脂蛋白A-I_((米兰变体))的复性及纯化
2004年
目的　从大肠杆菌中获得载脂蛋白A I(米兰变体 ) 的包涵体 ,对包涵体进行复性、纯化 ,最终获得具有生物活性的载脂蛋白A I(米兰变体 ) 。方法　包涵体以尿素溶解后 ,以疏水层析法复性重组蛋白 ;以离子交换层析对其进一步纯化 ,并对所得的蛋白进行生物活性分析。结果　经复性纯化的蛋白纯度达 95 % ,体外生物活性检测显示其具有生物活性。结论　本法能快速有效地对目的蛋白进行复性、纯化 。
汪利俊丁满生郭美锦储炬庄英萍张嗣良谭小钉刘大涛
关键词：大肠杆菌载脂蛋白复性纯化包涵体
重组大肠杆菌的发酵方法
本发明公开了一种重组大肠杆菌的发酵方法，其一在发酵过程中用全合成培养基替代现有技术中的复合培养基；其二采用了独特的外源基因诱导表达方法，使重组大肠杆菌的发酵既可实现高密度、又可实现高表达。因此，本发明具有工艺新颖、菌体收...
庄英萍马文峰丁满生郭美锦储炬张嗣良
文献传递
重组大肠杆菌两次诱导高密度、高表达代谢通量分析
＜正＞ 微生物细胞代谢过程是分子尺度、细胞尺度及反应器介尺度等多尺度的,为了实现代谢过程的最优化,我们必须对代谢过程进行跨尺度的测量与控制;代谢过程的另一显著特点,即生命过程所特有的信息流、物质流、能量流是在不断的变化的...
庄英萍马文峰丁满生储炬张嗣良
重组人载脂蛋白AI米兰变体在大肠杆菌中的高效表达和纯化
人载脂蛋白AI米兰变体(APO AI<,M>)是第一例报道的人载脂蛋白的变体.其突变位点在173位精氨酸(ARG)变为半胱氨酸(CYS),从而蛋白能形成二聚体形式.同时ARG<'173>→CYS明显改变了APO AI蛋白...
丁满生
关键词：代谢流分离纯化基因克隆基因工程大肠杆菌
文献传递网络资源链接
温度诱导模式对重组大肠杆菌质粒拷贝数的影响被引量：9
2006年
对于大肠杆菌温度表达系统,温度的选择和变化对外源基因的表达至关重要,最直接的因素表现在对质粒拷贝数的影响上。本文通过重组大肠杆菌DH 5α表达载脂蛋白A I-M ilano来分析不同温度诱导模式对质粒拷贝数的影响,确立了二次升温诱导(30°C→42°C→37°C→42°C)有利于菌体质粒拷贝数的增加,从而提高目的蛋白的表达量,结果表明:二次升温诱导比一次升温诱导蛋白表达量增加80%。
丁满生马文峰郭美锦储炬张嗣良龚邦强
关键词：温度质粒拷贝数大肠杆菌
重组人载脂蛋白AI_(米兰变体)在大肠杆菌中的高效表达
2005年
通过大肠杆菌表达系统来生产重组人载脂蛋白AIM(proapolipoprote in AIM,proapoAIM)。整个proapo AIM基因被分成两个片断,通过RT-PCR的方法合成。在对该基因的上游部分进行改造后,插入到表达载体pBV220中进行表达。蛋白的表达量达到45%左右,蛋白的表达形式为包涵体。包涵体通过疏水柱进行柱上复性,复性后的蛋白具有良好的生物活性。
丁满生马文峰张梅芳刘大涛郭美锦庄英萍储炬龚邦强
关键词：载脂蛋白AIMILANO包涵体复性
利用大肠杆菌高效表达人载脂蛋白AI及其性质分析被引量：1
2005年
载脂蛋白AI(apolipoproteinAI,apoAI)是高密度脂蛋白HDL的主要组成成分 ,流行病学研究表明apoAI的含量决定血浆中HDL的高低 ,而HDL具有胆固醇逆向转运的功能 ,起到降低冠心病发生概率的作用。通过大肠杆菌表达系统来生产apoAI的蛋白原proapoAI,蛋白的表达形式为包涵体 ,通过疏水柱进行柱上复性。同时在proapoAI和apoAI之间设计一个酸水解位点 ,通过将蛋白原proapoAI进行酸水解来得到成熟蛋白apoAI。最终得到的成熟蛋白apoAI在结构分析和脂结合特性上都与天然的apoAI相似 ,从而为该蛋白的工业生产上提供了一个良好的基础。
丁满生马文峰张梅芳刘大涛郭美锦庄英萍储炬张嗣良龚邦强
关键词：载脂蛋白AI包涵体复性
重组人载脂蛋白ApoA-I表达条件的优化被引量：2
2004年
对大肠杆菌DH5α发酵培养表达人载脂蛋白ApoA I的发酵条件进行了优化研究。结果表明 :将重组质粒pBV2 2 0 ApoA I转化不同的大肠杆菌宿主菌 ,筛选得高表达水平的E coliDH5α pBV2 2 0 ApoA I表达系统 ,摇瓶发酵表达率为 2 2 2 % ,BL2 1 (DE3)的表达水平与其相当 ,而TG1的表达率只有 1 1 %。在FMG 5L发酵罐进行发酵条件优化 ,认为细胞生长培养的最适pH为 7 0 ,重组ApoA I表达时的最适pH为 7 4。分批发酵的初始糖浓度为 3 0g·L 1,且碳氮源的最佳比例为 2∶1 ,使重组ApoA I表达率达总蛋白的 40 % ,浓度达 2 86g·L 1。
马文峰丁满生郭美锦庄英萍储炬张嗣良
关键词：大肠杆菌
两次诱导实现重组大肠杆菌高密度、高表达研究被引量：5
2005年
通过不同温度诱导模式对大肠杆菌高密度,高表达的研究,确定两次升温诱导模式实现大肠杆菌高密度、高表达重组人载脂蛋白的目的。实验证实两次诱导成功的避免了乙酸对高密度、高表达的影响,最终发酵的细胞密度OD600达150,蛋白表达量4.8g·L-1,证明两次升温诱导的发酵方法在高密度、高表达外源蛋白上是成功的,从而为基因工程菌规模化生产奠定了基础。
马文峰庄英萍郭美锦丁满生储炬张嗣良
关键词：重组大肠杆菌
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