丁一
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 供职机构：同济大学附属东方医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Cx43转基因自体成肌细胞移植对犬急性心肌梗死后心肌结构和心功能的影响被引量：11
- 2006年
- 目的移植Cx43转基因自体成肌细胞（Cx43 SMC）到犬急性心肌梗死（AMI）区内，观察移植Cx43 SMC对心肌结构和心功能的影响。方法将24条健康杂种犬采用计算器随机法分为3组（n=8），即成肌细胞（SMC）移植组、Cx43 SMC移植组和对照组。取犬自体骨骼肌，经体外分离、培养和转化，将质粒载体pLenti6／V5-DEST-Cx43转入骨骼肌成肌细胞。利用结扎左前降支（LAD）的方法建立AMI动物模型，经LAD和梗死区多点注射的方法将实验组犬注射SMC或Cx43 SMC（细胞总数2×10^6个），对照组注射等量的细胞培养液。分别在AMI前1d、AMI后4周、细胞移植4周后，用超声心动图（UC／3）测量左室射血分数（LVEF）、左室舒张末期内径（LVDD）和左室收缩末期内径（LVSD）；并进行心肌组织的光镜和电镜的病理学检查。结果AMI前UCG检查犬左室形态和收缩功能正常，结扎LAD4周后，LVEF降低、LVDD和LVSD均增加（P〈0．05）。移植后4周，与对照组和移植前比较，SMC和Cx43 SMC移植组的LVEF升高、LVDD和LVSD减少（P〈0.05），其中Cx43 SMC移植组较SMC移植组为显著（P〈0．05）。组织病理学检查亦显示移入的Cx43 SMC在宿主心肌组织中排列有序，与宿主心肌细胞的排列方向一致，其间有闰盘形成。结论Cx43 SMC梗死区心肌移植后可减轻心室重构的进程，增加心肌的收缩力，改善心功能。
- 范慧敏汪进益刘中民洪暄孔祥赵曙光丁一
- 关键词：骨骼肌细胞连接蛋白43心肌梗死细胞移植
- 成年犬骨骼肌成肌细胞的培养纯化、鉴定及生长特性的研究
- 2006年
- 目的建立简便、有效的成年犬骨骼肌成肌细胞(skeletal myoblast cells,SMCs)体外分离培养、纯化和鉴定的方法,并观察犬SMCs的生长特性。方法采用机械分解法与IA型胶原酶和胰蛋白酶的二步酶消化法相结合,分离消化法培养获取犬SMCs,用DMEM培养液培养,以Ficoll梯度液纯化,进行Desmin免疫组化鉴定,并观察细胞形态、生长特性。结果犬SMCs培养后经台盼蓝检查成活率达95％以上,在接种后4～5 d增殖达高峰,细胞生长旺盛;Ficoll分离纯化的SMCs纯度较高;Desmin免疫细胞化学染色有97％的SMCs胞浆呈阳性反应。结论改良方法获得的SMCs具有良好的增殖、分化能力;采用Ficoll纯化以血清培养,即可获得高产量高纯度的SMCs。
- 汪进益范慧敏刘中民马亮丁一李杨
- 关键词：骨骼肌成肌细胞细胞培养纯化免疫细胞化学
- 大鼠皮肤成纤维细胞MyoD cDNA转染后的形态变化被引量：4
- 2007年
- 目的探讨运用肌肉转录调节因子(myoblast-determining,MyoD)基因转染使大鼠皮肤成纤维细胞(dermalfibroblasts,DFs)转化为肌细胞的可能性。方法采用差速贴壁法培养Sprague-Dawley(SD)大鼠的DFs;利用携带MyoD cDNA的真核表达载体pLenti6/V5-DEST-MyoD转染培养的大鼠DFs,经Blasticidin筛选2周后挑选转基因单克隆细胞,传代培养,进行细胞形态学观察及细胞免疫化学鉴定。结果大鼠DFs在导入MyoD cDNA后可见:(1)部分细胞形态发生改变,类似骨骼肌细胞,胞体伸展,胞浆颗粒增多;(2)经抗Desmin抗体的细胞免疫化学检测证实转染后的细胞有下游蛋白Desmin的阳性表达。结论DFs能转化为具有潜在功能的类骨骼肌细胞,提示DFs可成为心血管疾病基因治疗的靶细胞。
- 汪进益范慧敏刘中民丁一马亮李杨
- 关键词：皮肤成纤维细胞靶细胞
